cAMP对大鼠颅脑损伤后神经功能及脑水肿的影响

目的 探讨蛋白激酶A（PKA）激活物cAMP对颅脑损伤（TBI）大鼠神经功能、脑水肿的影响。方法 选取120只成年雄性SD大鼠随机分为6组（每组20只）:假手术组（暴露硬脑膜而不给予液压打击）;高、中、低剂量cAMP组（TBI后1 h腹腔注射60、40、20 mg/kg PKA激活物8-Bromo-cAMP）;溶媒组（TBI后1 h腹腔注射cAMP溶媒二甲基亚砜10 μl）;模型组（液压打击处理）。TBI后48 h,采用神经损伤严重程度评分（NSS）评估神经功能,干湿重法测定脑含水量,免疫印迹法检查海马细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、非磷酸化缝隙连接蛋白43（NP-Cx43）、谷氨酸转运蛋白-1（GLT-1）及钠钾ATP酶的表达,高效液相色谱法检测海马谷氨酸（Glu）的含量。结果 TBI后,大鼠NSS明显增高（P<0.05）,脑含水量明显增加（P<0.05）,海马ERK1/2表达水平明显增加（P<0.05）,海马Glu含量明显增加（P<0.05）,而NP-Cx43、GLT-1、钠钾ATP酶表达水平明显降低（P<0.05）;cAMP干预后,显著逆转这些反应（P<0.05）,而且呈剂量依赖性。结论 大鼠TBI后,给予cAMP干预,激活PKA,可通过门卫效应抑制ERK1/2,使NP-Cx43、GLT-1及钠钾ATP酶水平明显增高,进一步降低Glu等脑毒性代谢产物、缓解脑水肿,从而改善大鼠神经功能。     

缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注后缝隙连接蛋白43的影响

目的 观察缺血后处理对脑缺血再灌注后缝隙连接蛋白43(Cx43)的影响.方法 30只Wistar雄性大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、缺血后处理(IP)组.采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑缺血2h后,I/R组予再灌注,IP组给予大脑中动脉血流再通30s,之后阻断血流30s,如此进行3个循环之后予永久再灌注.于脑缺血再灌注后24h行TTC染色观察脑梗死体积、神经功能缺损评分,应用激光共聚焦显微镜观察Cx43蛋白表达量及分布的变化,行各组间比较.结果 IP组脑梗死体积明显小于I/R组,IP组神经缺损评分低于I/R组,与Sham组相比,I/R组Cx43数量明显减低、分布紊乱,IP组Cx43表达数量及分布明显好于I/R组.结论 缺血后处理可减小脑梗死体积、减轻神经功能缺损,缺血后处理能抑制Cx43表达减少、改善Cx43分布情况.     

人参皂甙Rb1通过调控缝隙连接蛋白40治疗脑缺血再灌注损伤的机制

目的观察人参皂甙Rb1(GS-Rb1)通过调控缝隙连接蛋白40(Cx40)表达在治疗脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia and reperfusion injury,Cerebral I/R injury)的相关性机制。方法选取100只体重350～450 g的4月龄的SD雄性大鼠随机分为5组,每组20只,脑缺血再灌注模型建立为采用夹闭颈总动脉法。具体分组为:(1)假手术(sham)组;(2) GS-Rb1(I/R+GS-Rb1)治疗组;(3) GS-Rb+H-89阻断(I/R+GS-Rb1+H-89)组、(4)溶媒(I/R+DMSO)组及;(5)损伤(I/R)组,每组20只。实验时间均设定为I/R后8 h。每组取10只大鼠进行行为学检测和脑组织含水量测定,另10只则获取海马区皮质通过蛋白免疫印记法(Western Blot,WB)测定神经元Cx40蛋白的变化、采用酶联免疫荧光(ELFA)及酶联免疫吸附(ELISA)检测神经元氧化应激因子NAPDH氧化酶活性、炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-a等含量的变化。结果实验结果显示,治疗组的NSS评分、脑水肿程度、NAPDH氧化酶活性、炎性因子及海马皮质Cx40表达均较溶媒组及损伤组明显下降(P 0. 05)。而H-89可明显抑制上述GS-Rb1对Cx40蛋白表达下调、降低NAPDH氧化酶活性及缓解炎性因子产生的作用(P 0. 05)。结论 GS-Rb1可能通过激活PKA途径而对Cx40蛋白表达下调,从而产生抑制损伤性物质的释放及传递,以达到脑损伤缓解作用。     

与缺氧诱导因子-1 α调控相关的缝隙连接 43蛋白磷酸化参与脑缺血再灌注损伤的机制

目的观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)所致的缝隙连接43蛋白(connexin43,Cx43)磷酸化对脑缺血再灌注(cerebral ischemia and reperfusion,I/R)损伤的相关机制。方法选取成年SD雄性大鼠100只,随机分为4部分5组,每组20只:(1)假手术组,仅暴露双侧颈总动脉而不予夹闭;(2)治疗组,I/R后立即腹腔注入HIF-1α特异抑制剂2甲氧基本雌二醇(2ME2) 15 mg/kg,实验时间设定为I/R后4 h及8 h;(3)溶媒组,以溶媒二甲基亚枫(DMSO)替代2ME2;(4) I/R损伤组,I/R形成后不给予处理,(3)和(4)实验时间均设定为I/R后8 h。每组取10只动物行脑组织含水量测定;另10只动物在预定时间取海马区域皮质标本,采用免疫印迹法(Western blot,WB)检测磷酸化Cx43(p-Cx43)、Bcl-2、Bax、Caspases-3的表达水平,并用酶联免疫法(ELISA)检测海马皮质组织中炎性因子的含量,用干蒸法测定脑水肿的程度。结果采用2ME2干预的治疗组大鼠各时间段的脑含水量及海马皮质组织的p-Cx43、炎性因子、Cx40、凋亡促进因子Bax、Caspases-3表达水平均明显降低(均P 0. 05),凋亡抑制因子Bcl-2表达水平明显升高(P 0. 05)。结论通过特异性抑制HIF-1α的形成,可降低神经细胞Cx43磷酸化的形成,明显降低炎性因子的分泌;并可对脑I/R所致的损伤产生缓解作用;对脑缺血疾病在超急性期的治疗有着重大的意义。     

大鼠颅脑损伤后大脑中动脉形态结构的变化

目的探讨颅脑损伤后大鼠损伤侧和对侧大脑中动脉形态结构及管壁细胞Cx40、Cx43的改变。方法成年SD大鼠45只按随机数字表发随机分为正常组（9只）、假手术组（9只）及损伤组（27只）,损伤组又根据伤后时间分为伤后6 h、24 h、72 h三个亚组（每亚组9只）。利用液压冲击法建立大鼠颅脑损伤模型,通过显微镜和透射电镜观察损伤侧和对侧大脑中动脉形态学改变,免疫组化法检测管壁细胞Cx40、Cx43表达水平改变。结果颅脑损伤后,大鼠损伤侧大脑中动脉随时间进程出现不同程度的内皮细胞形态结构改变、内弹力膜皱缩、平滑肌细胞水肿变形,进而管腔出现不同程度的狭窄甚至闭塞;损伤对侧大脑中动脉也出现形态结构改变,但发生较晚,程度较轻。与对照组相比,损伤组大鼠损伤侧和对侧大脑中动脉血管壁细胞Cx40、Cx43表达均明显增加（P〈0.05）,伤后24 h达高峰。结论颅脑损伤后不仅损伤区域大血管受损,远隔区域大血管亦可见损伤性改变。     

慢性脑低灌注大鼠海马缝隙连接蛋白32和36的表达变化

目的：观察慢性脑低灌注大鼠海马组织中缝隙连接蛋白（Cx）32和Cx36的变化,探讨其在慢性脑低灌注认知功能损害中的作用。方法：双侧颈总动脉永久性结扎（2VO）制作慢性脑低灌注模型,Morris水迷宫检测2VO大鼠空间学习记忆能力变化,免疫组化检测2VO大鼠海马各区Cx32和Cx36的表达水平。结果：慢性脑低灌注大鼠的空间学习记忆能力较假手术对照组显著下降,海马Cx32和Cx36的表达也有降低。结论：Cx32和Cx36可能参与了慢性脑低灌注导致的认知功能损害。     

缝隙连接蛋白-43阻断剂辛醇对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的观察小鼠脑缺血再灌注后缝隙连接蛋白-43(Cx43)表达变化及缝隙蛋白阻断剂辛醇对小鼠梗死体积的影响。方法采用线栓法制备小鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO模型),应用免疫印迹(Western blot)方法观察脑缺血再灌注损伤前后Cx43表达变化和辛醇对Cx43表达的影响,并计算各组死亡率及脑梗死体积。结果小鼠脑缺血2h再灌注损伤24h条件下,缺血区Cx43表达在损伤前后无明显变化(P>0.05)。辛醇能显著抑制脑缺血再灌注损伤后Cx43表达,降低死亡率及减少脑梗死体积,具有统计学差异(P<0.05)。结论由Cx43组成的缝隙连接蛋白在脑缺血再灌注损伤过程中具有重要作用,缝隙蛋白-43阻断剂辛醇通过抑制海马及皮质Cx43表达,进而降低死亡率及梗死体积,从而发挥神经保护作用。     

缝隙连接蛋白43在偏头痛大鼠三叉神经颈髓复合体的表达及其对痛觉超敏的影响

目的 探讨三叉神经颈髓复合体内缝隙连接蛋白43(Cx43)对偏头痛大鼠痛觉超敏的影响. 方法 将SD大鼠随机数字表法分为空白组、假手术组、生理盐水组、改良致炎剂3d组、改良致炎剂7d组、甘珀酸(CBX)预防组、CBX预防对照组、CBX治疗组和CBX治疗对照组,每组6只.用改良致炎剂反复刺激硬脑膜法建立偏头痛大鼠模型.Von-Frey纤维丝测定眶周痛觉阈值,免疫荧光染色法观察大鼠三叉神经颈髓复合体内Cx43的表达. 结果 行为学结果显示,与对照组相比,改良致炎剂组大鼠眶周痛阈逐日下降,出现痛觉超敏表现;而CBX预防组大鼠未出现痛觉超敏表现;CBX治疗组大鼠给予CBX后痛阈上升.细胞核及Cx43免疫荧光染色显示:改良致炎剂组大鼠后角细胞数及Cx43表达较对照组增多,3d组以Ⅰ、Ⅱ层增多为主,7d组以Ⅰ～Ⅳ层增多为主;CBX预防组及治疗组Cx43平均吸光度值与其对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 反复予硬脑膜改良致炎剂能有效诱导偏头痛大鼠产生眶周痛觉超敏表现,并能引起三叉神经颈髓复合体内Cx43表达上调.非特异性缝隙连接阻断剂CBX能有效抑制Cx43表达上调,缓解痛觉超敏,提示Cx43在偏头痛大鼠痛觉超敏形成和加重中起重要作用.     

癫痫幼鼠海马和颞叶皮质区缝隙连接蛋白43和突触体素表达的变化

目的观察神经元缝隙连接蛋白43（Cx43）和突触体素（synaptophysin P38）在戊四氮（PTZ）点燃癫痫幼鼠海马及颞叶皮质区中的表达，探讨两者与癫痫的关系及其在癫痫形成中的作用。方法将50只21日龄Wistar大鼠分为对照组和实验组。实验组采用PTZ点燃癫痫幼鼠，按点燃进程分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级及Ⅳ级发作组。采用免疫组化和图像分析技术，观察海马及颞叶皮质区Cx43和P38表达的变化。结果应用PTZ点燃后，实验各组幼鼠海马及颞叶皮质区Cx43和P38的表达明显高于对照组（P〈0．01），且随发作级别的增高，幼鼠海马及颞叶皮质各区Cx43和P38的表达均增加。但各组间海马区和颞叶皮质区Cx43和P38的表达情况的比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cx43和P38的表达水平与癫痫的发生发展有密切关系，为研究小儿癫痫的病因及发病机制提供依据。     

伽玛刀照射后胶质细胞CX43和GFAP表达变化及意义

目的研究伽玛刀照射后胶质细胞缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)和胶质纤维酸蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)表达的变化。方法体外培养原代星形胶质细胞(astrocytes,Ast)分为正常对照组和γ刀照射组,后者经γ刀照射(边缘剂量4～36Gy),培养72小时后检测GFAP,Cx43。结果4～12Gy组与正常对照组无显著差异,至16Gy组胶质细胞开始增生GFAP表达阳性细胞数大于正常对照组且呈剂量依赖性增高至32Gy组GFAP表达达最大值。Cx43表达在12Gy组即开始明显下降且Cx43表达呈计量依赖性减低,在24～32Gy降低尤为显著至32Gy组达最低值。结论原代培养Ast经伽玛刀照射后GFAP表达增高,同时Cx43表达减低。Cx43的异常低表达可能是胶质增生及放射损伤的重要原因。     

TLR4基因突变对小鼠坐骨神经损伤修复的影响

目的 探讨Toll样受体4（TLR4）基因突变达对小鼠坐骨神经损伤修复的影响。方法 取10只C3H/HeJ小鼠（TLR4基因突变作为突变组,20只C3H/HeN小鼠（TLR4基因正常）随机分为假手术组（n=10）和模型组（n=10）。突变组和模型组在暴露的坐骨神经中部用止血钳夹持60 s以建立小鼠坐骨神经损伤模型,假手术组仅暴露坐骨神经而不进行夹伤。造模后4周,采用坐骨神经功能指数（SFI）评分评定坐骨神经功能,然后每组取3只小鼠行HE染色观察坐骨神经病理改变,每组取3只小鼠采用RT-PCR检测坐骨神经组织白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA表达水平,每组取4只小鼠采用免疫印迹法检测坐骨神经组织生长相关蛋白43（GAP43）、p75神经营养素受体（p75NTR）蛋白表达水平。结果 与假手术组相比,模型组SFI评分显著降低（P<0.05）,HE染色显示细胞形态异常并出现大量嗜中性粒细胞和巨噬细胞,坐骨神经组织IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平以及GAP43、p75NTR蛋白表达水平均显著增高（P<0.05）。与模型组相比,突变组SFI评分明显增高（P<0.05）,组织结构病理改变明显改善,IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达水平以及GAP43、p75NTR蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论 TLR4基因突变可促进小鼠坐骨神经损伤后修复,可能与降低IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平有关。     

实验性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛兔基底动脉Cx43蛋白表达的时相变化

目的 通过建立兔二次蛛网膜下腔出血实验模型,观察兔蛛网膜下腔出血后基底动脉缝隙连接蛋白Cx43表达的时相变化特点,初步探讨蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的形成机制.方法 选择健康新西兰大白兔30只,随机分为5组:正常对照组(n=6)和蛛网膜下腔出血模型组(1d、3d、7d和14d,n=6):建立兔二次蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛实验模型,脑血管造影分析基底动脉的直径变化并应用Western Blot检测基底动脉Cx43蛋白的表达变化.对血管直径与Cx43表达变化情况进行相关分析.结果 成功建立兔二次蛛网膜下腔出血模型;脑血管造影显示注血后1d基底动脉即出现痉挛(85.7%±8.6%,P<0.05);7d时达高峰(66.5%±7.6%,P<0.01);14d时仍有痉挛(78.4%±8.2%,P<0.05)但程度较前缓解.Cx43蛋白表达在建立SAH模型后1d(38.6%±5.6%,P<0.05)、3d(50.2%±5.7%,P<0.05)、7d(57.8%±5.3%,P<0.01)、14d(32.4%±3.6%.P<00.05)均升高,其中7d为高峰,14d开始下降.Cx43蛋白表达的时相性变化与SAH后基底动脉直径的时相性变化相关系数为0.914.结论 实验结果 显示蛛网膜下腔出血后兔基底动脉缝隙连接蛋白Cx43的表达发生了时相性变化,并且Cx43蛋白表达强弱与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛程度在时程上存在正相关关系,表明缝隙连接蛋白Cx43可能参与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的形成.

Abstract：

Objective The study was designed to explore the change of expression of connexin43(Cx43)protien in the model of subarachnoid hemorrhage(SAH)of rabbits,hoping to provide the basis to study the mechanism of cerebral vasospasm(CVS).Methods 30 New Zealand rabbits were divided into 5 groups:SAH group(1d,3d,7d,14d,n=6)and control group(n=6).The model of CVS following SAH was established.Digital subtraction angiography was performed to detect the change of the basilar arteries diameter.The expression of Cx43 protien in basilar arteries tissue at different time points following experimental SAH was examined by using western blotting analysis.The data were statistically analyzed using the bivariate correlations test.Results The model of SAH in rabbits was successfully established.All 30 rabbits were analyzed.Cerebral angiograms on 1d,3d,7d and 14d showed severe narrowing of the BAs,and on 7d showed the most narrowing and on 14d began to Relieve.Western blotting showed that the expression of Cx43 protein were detected in normal rabbit basilar arteries tissue.However,the expression of Cx43 protein increased gradually and significantly in models compared with that of control(P<0.05),which reached peak on 7d(P<0.01)and then decreased on 14d(P<0.05).There was positive correlation between expression of Cx43 and cerebral vasospasm.Conclusions The above results demonstrates at the first time that the Cx43 protein expression is altered after the SAH,and exhibits a time-dependent change.which might be connected with the development of CVS.In summary,our data demonstrates gap junctions may play an important role in the pathogenesis of cerebral vasospasm after SAH.     

丹参酮ⅡA通过抑制TLR4/NF-κB途径减轻糖氧剥夺对大鼠脑微血管内皮细胞的炎症损伤

目的 探讨丹参酮ⅡA对大鼠脑微血管内皮细胞糖氧剥夺炎症损伤的影响及其机制。方法 原代培养雄性SD大鼠脑微血管内皮细胞，分为对照组、糖氧剥夺组和丹参酮ⅡA组。对照组用DMEM培养，糖氧剥夺组细胞用无糖DMEM培养，丹参酮ⅡA组用在无糖DMEM基础上加用含8 μg/ml丹参酮ⅡA培养。利用CCK8检测细胞活力，酶联免疫吸附试验检测细胞炎症因子IL-6和TNF-α水平；实时PCR和免疫印迹法检测细胞TLR4和NF-κB mRNA和蛋白表达水平。结果 与对照组相比，糖氧剥夺组细胞活力明显降低（P<0.05），IL-6和TNF-α水平明显增加（P<0.05），TLR4和NF-κB mRNA和蛋白表达均明显增加（P<0.05）；丹参酮ⅡA明显抑制糖氧剥夺作用（P<0.05），但未恢复到对照组水平（P<0.05）。结论 丹参酮ⅡA可减轻糖氧剥夺对大鼠脑微血管内皮细胞的炎症损伤，其作用机制可能与抑制TLR4-NF-κB信号通路有关     

柚皮苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究柚皮苷(Naringin,NRG)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及星形胶质细胞是否参与其中。方法柚皮苷连续灌胃7 d后进行大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO),缺血2 h后拔出线栓进行再灌注。24 h后TUNEL染色观察凋亡细胞数量,苏木精-伊红(hematoxyli-eosin,HE)染色观察形态学改变,免疫荧光染色分别检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)。结果同模型组相比,柚皮苷预干预后凋亡细胞数量显著减少(P0.05),细胞损伤明显减轻。免疫染色显示柚皮苷可以减轻星形胶质细胞的激活程度,同时Cx43的表达也有所降低(P0.05)。结论柚皮苷预干预可有效减轻脑缺血再灌注损伤,该保护作用同降低星形胶质细胞Cx43表达密切相关。     

AMPK对氧糖剥夺再灌注后小胶质细胞介导炎性反应的影响

目的：探讨氧糖剥夺再灌注（OGD／R）损伤后腺苷酸活化蛋白激酶（AM PK ）对小胶质细胞介导的炎性介质释放及信号传导的影响。方法培养BV2细胞株,应用OGD 6 h再灌注24 h建立缺血再灌注损伤离体模型,AICAR（5μmol／L、50μmol／L、100μmol／L）或 Compound C（0．1μmol／L、1μmol／L、10μmol／L）不同程度激活或抑制AMPK磷酸化,MTT法检测细胞活性,免疫印迹及ELISA方法,检测OGD／R后BV2细胞AMPK活性变化,以及对NF－κB信号通路中IκB磷酸化、TNF－α释放的影响。结果各浓度AICAR均能够促进OGD／R后BV2细胞存活（P ＜0．05）,抑制IκB磷酸化水平（P ＜0．05）,AICAR（100μmol／L）能够增加AMPK磷酸化水平（P ＜0．05）,抑制TNF －α的释放（P＜0．01）。而Compound C（10μmol／L）促进BV2细胞死亡（P＜0．01）,降低OGD／R后AMPK及IκB磷酸化水平（P ＜0．05）,促进 TNF －α释放（P ＜0．05）。结论 AMPK 磷酸化激活能够减轻OGD／R后BV2细胞介导的炎性损伤作用,而抑制AM PK磷酸化能够加重神经炎性反应。     

阿托伐他汀对颅脑损伤大鼠神经元凋亡的抑制作用

目的 探讨阿托伐他汀对颅脑损伤（TBI）大鼠神经元凋亡的抑制作用及机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和阿托伐汀他组，各10只。采用液压打击法制作TBI模型，阿托伐他汀组连续灌胃阿托伐他汀2周（1 mg/kg/d），假手术组、模型组灌胃等体积生理盐水。给药结束后第2天，参照Zea Longa 5分制标准进行神经功能评分。酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（IL）-6和IL-1β水平；免疫印迹法检测损伤脑组织Toll样受体4（TLR4）、核转录因子（NF）-κB p65、p-IκB、cleaved Caspase-3蛋白表达；末端标记法检测神经元凋亡；HE染色观察脑组织病理变化。结果 与模型组相比，阿托伐他汀组大鼠神经功能缺损评分、细胞凋亡率、血清IL-6、TNF-α和IL-1β水平明显改善（P<0.05），损伤脑组织TLR4、NF-KB p65、p-IκB、cleaved Caspase-3水平明显下调（P<0.05）；HE染色显示脑组织损伤程度明显减轻。结论 阿托伐他汀可能通过抑制TLR4/NF-кB信号通路，抑制TBI大鼠的神经元细胞凋亡，促进神经功能恢复。     

卒中相关性肺炎血清炎症因子和外周血淋巴细胞亚群的分析

目的 探讨卒中相关性肺炎（SAP）病人血清炎症因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平变化及其临床意义。方法 选取2016年3月至2017年3月收治的48例SAP,根据A2D2S2L评分分为低危（0~2分,14例）、中危（3~9分,15例）、高危（≥10分,19例）三组。入院后次日清晨取空腹静脉血,应用流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）,应用酶联免疫吸附试验法检测血清炎症因子（IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4）。结果 随着危险程度的增高,血清IL-1β、IL-6、IL-4、TNF-α水平均明显增高（P<0.05）,外周血CD3+和CD4+细胞百分比显著增高（P<0.05）。低危组CD4+/CD8+显著高于高危组和中危组（P<0.05）,而后两组无统计学差异（P>0.05）;三组CD3+/CD8+均无显著差异（P>0.05）。结论 血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4以及T细胞淋巴亚群变化情况反映SAP病人的A2D2S2L评分,血清IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α与A2D2S2L评分呈正相关,T细胞亚群CD3+、CD4+百分比与A2D2S2L评分呈负相关。     

银杏总黄酮对脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应的抑制作用

目的探讨银杏总黄酮(TFG)对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞(MG)炎症反应的抑制作用。方法通过LPS诱导小胶质细胞系(BV-2)小胶质细胞活化建立神经系统炎症模型,分别用不同浓度TFG(0、40、80、120和160 mg/m L)处理细胞,CCK-8方法检测各组细胞活性,选取TFG(80 mg/m L)预处理细胞,倒置相差显微镜观察小胶质细胞形态变化。ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、抑制性卡巴蛋白(IκB-α)、核因子κB(NF-κB)/p65蛋白表达水平。结果低剂量组TFG(40和80 mg/m L)对小胶质细胞活性无明显影响,差异无统计学意义(P 0. 05);高剂量的TFG(120和160 mg/m L)显著抑制小胶质细胞活性,差异具有统计学意义(P 0. 05)。与LPS组相比,TFG+LPS组显著抑制LPS诱导的小胶质细胞形态变化及细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达和释放(P 0. 05);明显降低TLR4蛋白表达水平(P 0. 05);显著增加胞质内IκB-α的表达(P 0. 05);抑制NF-κB/p65向核内转移(P 0. 05)。结论 TFG抑制LPS所诱导的小胶质细胞炎症反应效果良好,对以神经炎症为病理特征的神经退行性病变有一定治疗作用。     

Connexin 43 gap junction proteins are up-regulated in remyelinating spinal cord

Alterations in the expression of gap junction proteins have previously been observed in several diseases affecting the central nervous system; however, the status of connexin 43 (Cx43) has not yet been reported in spinal cord remyelination. We studied Cx43 expression in demyelination and remyelination by using a chronic guinea pig model of experimental allergic encephalomyelitis (EAE). Hartley guinea pigs were immunized with homogenized whole CNS and complete Freund's adjuvant. Animals became chronically ill by day 40 postimmunization, and animals with paralysis were entered into the study. Animals were treated on days 40-60 postimmunization with either saline or drugs that promote remyelination: an adenosine amine congener (100 mug/kg), an anti-alpha4-integrin blocker (CT301; ELN 69299; 30 mg/kg), or a combination of both drugs. Remyelination was induced in all drug-treated groups. Cx43 expression was virtually absent in demyelinated lesions of saline-treated controls compared with healthy tissue and normal appearing white matter (P < 0.001), whereas Cx43 was considerably increased (300-500%) in remyelinating lesions of all treatment groups (P < 0.001), most notably in CT301-treated animals. These changes in Cx43 expression indicate that Cx43 may beimportant for recovery from neuroinflammation.