黄连解毒汤通过促进自噬减轻脓毒症大鼠心肌损伤

目的:探究黄连解毒汤对脓毒症大鼠急性心肌损伤的保护作用与自噬相关蛋白的关联。方法:将35只SPF级SD雄性大鼠随机分为Sham组、CLP组、HLJDD组、H+RAP组、H+3MA组共5组(n=7)。连续给药7 d,通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。术后3 d仍存活的大鼠采血行血常规检测；苏木素-伊红(HE)染色观察心脏组织的病理变化；蛋白免疫印迹法检测心脏组织中自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1、P62)的表达；Q-PCR法检测大鼠心脏组织中ATG9 m RNA的表达差异。结果:与Sham组比较，CLP组小鼠血常规中感染指标(WBC、Gran、Gran%)水平明显升高(P<0.05),心肌细胞坏死、炎症细胞浸润明显，自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1、ATG9 m RNA的表达明显下调，P62蛋白累积明显(P<0.05);与CLP组比较，HLJDD组脓毒症大鼠感染指标明显降低(P<0.05),心脏组织损伤明显减轻，LC3-Ⅱ、Beclin-1、ATG9 m RNA的表达明显上调，P62蛋白明显下降(P<0.05);H+RAP组模拟了HLJDD组的趋势，...     

乌司他丁对脓毒症大鼠早期肾脏的保护作用

目的:研究乌司他丁对脓毒症大鼠早期肾功能的影响。方法:36只SD大鼠随机分为3组:对照组、盲肠结扎穿刺(CLP)组、盲肠结扎穿刺(CLP)+乌司他丁组(UTI),每组12只,对照组、CLP组术后即刻皮下注射生理盐水5mL,CLP+UTI组术后即刻皮下注射乌司他丁(10万UP/kg,溶于5mL生理盐水中)。分别于术后3h、6h、12h、48h每组各杀死4只大鼠,股静脉采血,同时取肾组织。测定血尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)浓度,并制备肾脏病理切片,采用放射免疫法测定肾组织中TNF-α。结果:与CLP组比较,各时点CLP+UTI组肾组织TNF-α明显降低(P0.05),对照组和CLP+UTI组BUN和SCr浓度均降低(P0.05)。结论:乌司他丁对脓毒症大鼠早期肾功能有保护作用。     

基于自噬/凋亡研究淫羊藿女贞子合用糖皮质激素对3-MA诱导的ASMCs自噬抑制状态的作用

目的 研究淫羊藿女贞子合用糖皮质激素对自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)抑制气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells, ASMCs)自噬的影响。方法 培养大鼠原代ASMCs,随机分为5组，即正常组(正常大鼠血清)、3-MA组(正常大鼠血清+3-MA)、激素组(正常大鼠血清+3-MA+地塞米松)、中药组(3-MA+淫羊藿女贞子含药血清)、合用组(3-MA+淫羊藿女贞子含药血清+地塞米松)。根据分组分别加入正常大鼠血清或含药大鼠血清；除正常组外，其余各组同时加入3-MA刺激ASMCs, 48h后进行检测。电镜观察细胞超微结构；MTT法检测细胞活力：免疫细胞化学法检测增殖蛋白Ki-67蛋白表达；Annexin V-FITC/PI法检测凋亡活性；Western Blot或免疫荧光法检测LC3、Bax、Bcl-2、P53、Caspase-3、Beclin-1、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 与3-MA组比较，各给药组可不同程度地增加3-MA抑制的自噬活性，上调LC3 II/I比值、Beclin-1表达，下调mTOR及p-mTO...     

锦红汤对脓毒症大鼠小肠TLR4及其信号通路表达的影响

目的:研究锦红汤对脓毒症大鼠小肠Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)及其信号通路表达的影响。方法:将192只大鼠常规适应性喂养后按照每组32只随机分为正常组(Z)、模型组(M)、假手术组(J)、中药组(H)、西药组(T)、联合组(L)等6组。治疗组造模后即予相应药物干预1次,其余组均同时以等量生理盐水干预,每组大鼠再按0 h、2 h、6 h、24 h分为4个亚组,每亚组8只。在各个时间点采集标本,所有大鼠于标本采集完毕后处死。正常组:喂正常饲料。模型组:造模(CLP脓毒症模型),术后予生理盐水灌胃1次。假手术组:剖腹后只在盲肠根部穿入丝线,不行结扎和穿孔,术后予生理盐水灌胃1次。中药组:造模(CLP脓毒症模型),术后予锦红汤灌胃1次。西药组:造模(CLP脓毒症模型),术后予亚胺培南腹腔内注射1次。联合组:造模(CLP脓毒症模型),术后予锦红汤灌胃联合亚胺培南腹腔内注射1次。观察6组大鼠小肠组织形态学变化和TLR4及其信号通路相关基因蛋白表达的变化。结果:模型组2 h后肠绒毛出现排列混乱、缩短或变钝,6 h后上皮细胞水肿,部分脱落显著,黏膜下间质水肿,24 h后肠黏膜绒毛萎缩,而上皮细胞坏死,黏膜水肿和炎症细胞浸润。中药组、西药组和联合组24 h后肠黏膜表现与模型组比较有改善,但3组之间差异不大(P0.05);大鼠小肠组织LPS受体(lipopolysaccharide,CD14)、Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、核转录因子kappa B(nuclear factor kappa,NF-κB)表达的影响蛋白表达在24 h后正常组表达最低,模型组表达最高;与正常组、假手术组比较,模型组、西药组、中药组、联合组大鼠小肠组织CD14、TLR4、TNF-α、NF-κB蛋白表达均有不同程度的升高(P0.05);西药组、中药组、联合组大鼠小肠组织CD14、TLR4、TNF-α、NF-κB蛋白表达较模型组呈一定程度的下降(P0.05);西药组、中药组大鼠小肠组织CD14、TLR4、TNF-α、NF-κB蛋白表达降低不如联合组(P0.05)。结论:锦红汤可能是通过减轻或阻断TLR4及其信号传导通路,从而减轻炎性因子产生来改善疾病预后。     

丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠外周血CD4~+T细胞调节的作用研究

目的探讨丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠外周血CD4+T细胞的作用。方法采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症大鼠模型(CLP),给予丹参酮ⅡA(TanⅡA)处理,分别于治疗前及治疗后24、48、72 h各时间点取静脉血,流式细胞仪检测全血细胞中辅助性T细胞(Th1、Th2、Th17);采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 CLP组大鼠血清TNF-α、IL-17、IL-1水平和Th17比例明显高于同期Sham组(P0.05),而TanⅡA各亚组血清TNF-α、IL-17、IL-1水平和Th17比例均低于CLP同期各亚组(P0.05);CLP组大鼠血清IL-10水平和Th1/Th2比值明显低于Sham组(P0.05),而TanⅡA各亚组血清IL-10水平和Th1/Th2比值高于CLP同期各亚组(P0.05)。结论丹参酮ⅡA可能通过作用于脓毒症大鼠的外周血CD4+T细胞发挥调节免疫、改善炎症反应的作用。     

黄连解毒汤通过诱导自噬减轻脓毒症小鼠肝损伤

目的 探讨黄连解毒汤对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症小鼠肝损伤保护作用中自噬相关蛋白的表达。方法 将60只8周龄C57BL/6小鼠随机分为假手术组、脓毒症模型组、黄连解毒汤低、高剂量组（1.44，2.88 g?kg^-1）共4组（n=15）。连续给药3 d，末次给药1 h，盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。观察小鼠24 h生存率；另取5只，术后12 h处死小鼠，收集血清和肝组织。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中炎症因子白细胞介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β）的水平；生化法检测血中丙氨酸氨基转移酶（ALT），天冬氨酸氨基转移酶（AST）的水平；苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织的病理变化；TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）染色观察肝细胞凋亡指数（AI）；蛋白免疫印迹法检测肝组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1），自噬效应蛋白1（Beclin1），自噬标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ（LC3-Ⅱ/Ⅰ）的表达。结果 与假手术组比较，模型组小鼠12，24 h生存率明显降低，血清中炎症因子IL-6，TNF-α，IL-1β水平明显升高（P<0.05），AST，ALT活性明显增加（P<0.05），肝细胞肿胀、炎症细胞浸润，肝细胞凋亡，HMGB1表达明显增加（P<0.05），自噬相关蛋白Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ增加（P<0.05）；与模型组比较，各给药组脓毒症小鼠12，24 h生存率明显提高，炎症因子IL-6，TNF-α水平及AST，ALT活性明显降低（P<0.05），肝组织损伤明显减轻，肝细胞凋亡减少（P<0.05），HMGB1的表达明显减少（P<0.05），Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显增加（P<0.05）。结论 黄连解毒汤可能通过诱导自噬、抑制凋亡等机制，减轻CLP所致脓毒症小鼠肝损伤。     

丹参通络解毒汤对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及自噬和血管生成因子的影响

目的 探讨丹参通络解毒汤(DSTL)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及自噬和血管生成因子的影响。方法 将雄性SD大鼠随机平均分成5组：假手术组(Sham组)、MIRI模型组(MIRI组)、MIRI模型+DSTL组(DSTL组)、MIRI模型+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA组)以及MIRI模型+自噬激动剂雷帕霉素组(Rap组),每组10只。采用苏木精-伊红(HE)染色评估心肌的病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌细胞损伤标志物肌酸激酶MB同功酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(CTnI)的水平,免疫组织化学染色检测Beclin1的表达和分布,蛋白免疫印迹(WB)测定p62、内皮一氧化氮合成酶(eNOS)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果 MIRI组大鼠在显微镜下显示严重的心肌细胞坏死和炎症浸润,CK-MB、CTnI和Beclin1的水平明显升高(P<0.01),p62、eNOS和VEGF的水平显著降低(P<0.01),而DSTL组的大鼠显示较轻微的病理变化,CK-MB、CTnI和Beclin1的水平下降(P<0.01),p62、...     

桃红芩连汤对脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1的影响

目的观察脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)的水平,探讨桃红芩连汤治疗脓毒症心肌损伤机制。方法 48只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分成假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、脓毒症中药治疗组(ZY组),每组16只。于手术后24、48h分别检测TNF-α、IL-6、TnⅠ、HMGB1浓度,光镜观察心肌病理变化。结果与Sham组比较,CLP组在24、48hTNF-α、IL-6、TnⅠ及HMGB1水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.01);与CLP组同期比较,ZY组24、48h时TNF-α、IL-6、TnⅠ及HMGB1浓度均明显下降,差异亦有统计学意义(P0.05)。光镜下CLP组和ZY组可见心肌损伤,CLP组较ZY组损伤明显。结论桃红芩连汤可降低脓毒症相关炎症因子水平,对心肌有保护作用。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马神经细胞自噬的影响＊

目的 探究补肾活血方对血管性痴呆（Vascular Dementia， VD）大鼠模型自噬的影响。方法 52周龄SD雄性大鼠50只，随机分为假手术组（Sham组）、模型组（VD组）、模型+补肾活血方组（BSHX组）、模型+雷帕霉素组（Rap组）和模型+3-甲基腺嘌呤组（3-MA组），每组10只大鼠。除Sham组外其余各组采用两血管阻断法（2-VO）建立VD模型。BSHX组中药灌胃治疗28天；自噬干预组于造模前30 min侧脑室给药。运用Morris水迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力；通过尼氏染色和透射电子显微镜（Transmission electron microscope，TEM）观察大鼠海马区病理形态及自噬变化；采用蛋白免疫印迹（Western blot）法和反转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测大鼠海马Beclin-1、P62以及微管相关蛋白1轻链3（LC3）蛋白及mRNA表达情况。结果 与VD组比较，BSHX组大鼠学习记忆能力显著提升（P<0.05），镜下观察BSHX组和3-MA组的细胞形态及数量均有改善，自噬小体鲜见，Beclin-1以及LC3蛋白和mRNA表达水平显著降低（P<0.05），P62蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）结论 补肾活血方可以降低VD大鼠海马区Beclin-1和LC3蛋白及mRNA的表达，提高P62的表达，通过抑制自噬的发生，减轻对神经细胞的损伤，改善学习记忆能力。     

针刺激活Ⅲ型PI3K/Beclin-1通路调控脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马区细胞自噬

目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马组织Ⅲ型磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)及Beclin-1等自噬相关指标的影响，探讨针刺调控Ⅲ型PI3K/Beclin-1通路适度激活脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马神经细胞自噬的作用机制。方法:SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、针刺组、模型+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、针刺+3-MA组，每组11只。使用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。模型+3-MA组、针刺+3-MA组于再灌注前30 min予侧脑室注射3-MA 5䥺SymbolmApL(400 nmol/5䥺SymbolmApL)。针刺组、针刺+3-MA组针刺“大椎”“水沟”“百会”,每15 min捻转1次，留针30 min,每12 h治疗1次，共7次。于再灌注后2 h、干预后进行Garcia神经功能评分，干预后通过TTC染色法观察大鼠脑组织缺血面积百分比，Western blot法检测缺血侧海马组织Ⅲ型PI3K、Beclin-1、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、溶酶体相关膜蛋白2(Lamp2)、P62的蛋白表达水平，透射电镜法观察缺血侧海马组织神经...     

白藜芦醇对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及对HMGBl及TLR4mRNA表达的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对脓毒症大鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的保护作用及对ALI大鼠肺组织中高迁移率族蛋白(high mobility group box 1 protein,HMGBl)及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)和白藜芦醇组(Res组),采用盲肠结扎穿刺术(Cecal ligation and puncture,CLP)制备脓毒症相关性ALI大鼠模型,造模1 h后,Res组给予40mg/kg,Sham和Sep组给予等量生理盐水,均经股静脉注射。各组分别于2、6、12和24h,取大鼠肺组织,HE染色观察病理形态学变化,RT-PCR检测脓毒症大鼠各器官组织HMGB1及TLR4的mRNA的动态表达变化。结果:Res组在造模后12 h,肺组织病理变化与Sep组相比有所减轻,24 h Res作用达到最强,各种病理改变明显减轻,部分肺组织开始接近正常形态;Res组与Sepsis组比较,肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达明显下调。结论:Res可以通过下调肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达减轻脓毒症诱导的肺损伤。     

四磨汤通过调控NF-κB信号通路改善重度脓毒症大鼠结肠上皮细胞屏障功能障碍炎症状态作用研究

目的:探讨四磨汤对重度脓毒症大鼠结肠上皮细胞屏障功能障碍炎症状态的改善作用以及其对核转录因子κB(NF-κB)信号的调控机制。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建大鼠重度脓毒症模型；实验分组为正常组、模型组、四磨汤低剂量组、四磨汤高剂量组、激活剂组，每组10只；试剂盒检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量；末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)染色检测各组大鼠结肠组织的细胞凋亡；免疫荧光检测结肠组织中高迁移率蛋白-1(HMGB1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的表达；免疫组化检测结肠中白细胞共同抗原(CD45)、闭合蛋白1(Claudin-1)和闭锁蛋白1(ZO-1)的表达；Western blot法检测结肠组织中NF-κB、磷酸化NF-κB65 (NF-κB p65)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:四磨汤能明显下调重度脓毒症大鼠血清中TNF-α和IL-6的含量；抑制结肠组织中的细胞凋亡，降低结肠组织中HMGB1和NLRP3的...     

桃红芩连汤对脓毒症大鼠心肌能量代谢影响

目的观察脓毒症大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肌钙蛋白I(Tn I)的浓度变化,探讨桃红芩连汤对脓毒症心肌能量代谢的改善。方法 24只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分成假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、中药治疗组(ZY组),每组8只。于手术后24 h分别检测TNF-α、IL-6、Tn I、PGC-1α浓度,光镜观察心肌病理变化。结果与Sham组比较,CLP组PGC-1α、TNF-α、IL-6及Tn I水平显著升高(P0.01);与CLP组比较,ZY组PGC-1α、TNF-α、IL-6及Tn I浓度明显下降(P0.05)。光镜下CLP组和ZY组可见心肌损伤,CLP组较ZY组损伤明显。结论桃红芩连汤可降低脓毒症相关炎症因子水平,对心肌有保护作用。     

黄连解毒汤对脓毒症大鼠的心脏保护作用

目的探讨中成药黄连解毒汤对脓毒症大鼠心脏的保护作用。方法50只大鼠随机分为假手术组、模型组、黄连解毒汤组,采用盲肠结扎穿孔方法复制脓毒症模型,假手术组除不对盲肠进行结扎穿孔外,余同模型组;模型组和黄连解毒汤组分别在造模前后给予生理盐水和黄连解毒汤（1.5mL／100g）灌胃。观察黄连解毒汤对大鼠72h生存时间,血清肿瘤坏死因子（TNF—a）、肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK—MB）水平,心肌组织形态学等指标的影响。结果黄连解毒汤组能够显著延长脓毒症大鼠的72h生存时间,降低脓毒症大鼠血清中CK、CK—MB及TNF—a水平,减轻心肌组织的损伤,差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论黄连解毒汤有延长脓毒症大鼠的生存时间、减轻炎症因子对的心脏损伤、保护大鼠心脏功能的作用。     

桃仁膝康丸激活软骨细胞自噬延缓骨性关节炎软骨退变的研究

目的观察桃仁膝康丸(TRXK)对外科手术诱导的大鼠骨性关节炎(OA)软骨退变的保护作用并探讨其与软骨细胞自噬的关系。方法将健康雄性SD大鼠40只随机分为:假手术组、模型组、TRXK组和TRXK+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,采用改良的Hulth法制备大鼠膝关节OA模型。术后2周开始TRXK组和TRXK+3-MA组给予TRXK 1.25 g·kg-1·d-1灌胃,TRXK+3-MA组同时给予3-MA 1.5 mg·kg-1·d-1腹腔注射,连续用药12周。光镜下观察软骨组织形态学变化,并进行Mankin评分,Real-time PCR法检测膝关节软骨组织中Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶13(MMP13)和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)m RNA的表达,Western Blot法检测软骨组织中ULK1、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ/Ⅱ(LC3-Ⅰ/Ⅱ)蛋白质的表达。结果与模型组比较,TRXK能明显降低Mankin评分,升高软骨组织中COL2A1和Aggrecan,而降低MMP13和ADAMTS5 m RNA表达(P0.05);另外,TRXK能提高ULK1、Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白质表达(P0.05)。结论桃仁膝康丸可以通过诱导软骨细胞自噬延缓或阻止外科手术诱导的大鼠膝关节OA的软骨退变,其激活软骨细胞自噬的机制有待进一步研究。     

参麦注射液对脓毒症保护作用的实验研究

目的研究参麦注射液对盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症大鼠血清促炎性递质和C反应蛋白(CRP)水平的影响,探讨参麦注射液对脓毒症的保护作用。方法96只SD大鼠随机分为A组、B组、C组,各32例,CLP造模后A组、B组皮下注射生理盐水(5 mL/kg),C组皮下注射参麦注射液(5 mL/kg),并于术后12,24,36,48 h测量3组SD大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8和CRP水平。结果CLP造模后B、C 2组血清TNF-α、IL-6、IL-8和CRP水平均明显升高,C组在各时点TNF-α、IL-6、IL-8和CRP水平均显著低于B组(P均<0.01)。结论参麦注射液可显著降低脓毒症大鼠血清促炎性递质和CRP水平,可能对脓毒症具有保护作用。     

电针足三里对脓毒症模型大鼠肠道Ghrelin及高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的探讨脓毒症模型大鼠血清及肠组织Ghrelin及高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein,HMGB1）表达及电针足三里干预对其表达的影响。方法采用随机数字表法将48只Wistar雄性大鼠分为假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术组（cecal ligaton and puncture, CLP组）、CLP加电针足三里组（electroacupanctrue, EA组）及CLP加Ghrelin受体阻断剂加电针组（GHSRA组）,每组12只。通过CLP术诱导制备严重腹腔感染致脓毒症模型。Sham组沿腹正中线切口后立即缝合腹壁切口。EA组于CLP术后20 min行持续针刺双侧足三里30 min（强度为2 mA, 2～100 Hz）, GHSRA组于电针前静脉注射Ghrelin受体阻断剂 ［D Arg1,D Phe5,D Trp7.9,Leu11］ substance P,用量为700 nmol/kg。注射开始20 min后行电针足三里治疗,操作同EA组。各组大鼠于CLP术后12 h取血标本,采用ELISA法测定血清HMGB1及Ghrelin含量,免疫组化法测定肠组织Ghrelin免疫阳性细胞数目,蛋白质印迹法（Western blot）检测肠组织HMGB1蛋白表达。结果与Sham组比较,CLP组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达显著增加（P<0.05）,Ghrelin水平及其免疫阳性细胞表达率显著降低（P<0.05）;与CLP组比较,EA组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达显著降低（P<0.05）,而Ghrelin水平及其免疫阳性细胞表达率显著增加（P<0.05）;与EA组比较,GHSRA组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达增加（P<0.05）,但Ghrelin水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;Sham、CLP和EA组大鼠血清HMGB1与Ghrelin水平呈负相关（r=－0.528, P<0.01）。结论电针足三里可抑制脓毒症模型大鼠肠道HMGB1蛋白表达,促进Ghrelin表达。Ghrelin受体阻断剂能阻滞电针对HMGB1的抑制作用,电针足三里的抗炎作用可能与Ghrelin有关。     

龙蛭汤含药血清联合3-MA、白藜芦醇对氧化应激环境下血管内皮细胞自噬及管腔形成的影响

目的观察龙蛭汤含药血清联合3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine, 3-MA)、白藜芦醇(Resveratrol, Res)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的氧化应激环境下血管内皮细胞(HUVECs)自噬及管腔形成的影响。方法 SPF级SD大鼠分别予生理盐水、龙蛭汤水煎液灌胃7 d,取腹主动脉血制备含药血清,分装备用。通过建立H_2O_2诱导的HUVECs氧化应激自噬模型,分别加入正常对照组(Control组)、生理盐水含药血清组(空白血清组)、3-MA(3-MA组)、3-MA+10%龙蛭汤含药血清(3-MA+LZD组)、Res(Res组)、Res+10%龙蛭汤含药血清(Res+LZD组);CCK8、划痕实验、基质胶管型形成实验分别检测HUVECs增殖、迁移及管型形成能力,细胞免疫荧光检测自噬表达强度,Western Blot比较各组细胞Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF的蛋白表达水平。结果与空白血清组相比,Res组与Res+LZD组的细胞增殖数、迁移距离及管型形成数均明显增多,LC3荧光表达增强,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF蛋白水平升高,3-MA组的自噬、VEGF蛋白水平均降低;与3-MA组、Res组相比,加入龙蛭汤含药血清后的细胞增殖、迁移、管型形成数增多,3-MA+LZD组自噬荧光表达增强,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、VEGF蛋白水平升高;Res+LZD组下调Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白水平,与自噬荧光表达趋势一致,同时VEGF蛋白表达水平上调。结论龙蛭汤含药血清通过调节Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ自噬蛋白水平调控自噬通路,提高血管内皮细胞活力,促进内皮细胞迁移及管型形成,可能是血管内皮细胞氧化应激损伤后的血管新生的重要作用机制。     

川芎嗪对脓毒症大鼠心功能保护作用的研究

目的研究川芎嗪注射液对脓毒症大鼠心功能的保护作用。方法 45只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(CLP组)、川芎嗪组(TMP组),每组15只,分别在造模后12,24,48,72 h用心脏超声检测大鼠的心功能,72 h后留取大鼠左室心肌,进行组织形态学观察。结果与Sham组比较,在12,244,87,2 h 4个时点,CLP组大鼠EF值降低,差异有统计学意义(P<0.05),而TMP组大鼠在上述4个时点可提高EF值水平,与CLP组比较差异有统计学意义(P<0.05);在心肌组织形态学方面,与CLP组比较,TMP组大鼠心肌炎症较CLP组减轻。结论川芎嗪注射液有抑制炎症反应,改善脓毒症大鼠心功能的作用。     

黄芪甲苷减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的机制研究

目的：探讨黄芪甲苷预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤及自噬的影响。方法：大鼠90只，分别划分成HIRI组、Sham组、干预组，根据再灌注时间分为术后4、8、16 h 3个亚组。HIRI组和干预组均建立肝脏缺血再灌注（I/R）模型。检验谷丙(ALT)及谷草（AST)转氨酶的含量；光镜下观察肝细胞及肝小叶等结构的变化；免疫印迹法分析Beclin-1的表达含量；在电镜下寻找肝细胞中自噬小体的数量差异。结果：1）同Sham组比较，HIRI组大鼠血清ALT和AST水平明显升高(P<0.05)，于8 h达到顶峰。与HIRI组比较，干预组ALT和AST水平均明显降低(P<0.05)；2）病理学结果示HIRI组大鼠肝脏出现了不同程度的损伤，而干预组的肝损伤明显改善；3）Western Blot结果现示，同Sham组比较，HIRI组Beclin-1蛋白灰度比均明显升高(P<0.05)，于8 h达到顶峰。与HIRI组比较，干预组Beclin-1蛋白灰度比均明显降低(P<0.05)；4）电镜结果示，HIRI组肝细胞中的自噬小体数量较Sham组在术后8 h明显上升(P<0.05)；而干预组自噬小体较HIRI组在术后8 h明显减少(P<0.05)。结论：黄芪甲苷预处理可减轻大鼠肝缺血再灌注损伤，其可能的机制之一是通过降低大鼠HIRI时的自噬水平。