汉族人群及蒙古族人群组apoB基因3＇VNTR等位基因分布的研究（简报）

汉族人群及蒙古族人群组ａｐｏＢ基因３＇ＶＮＴＲ等位基因分布的研究（简报）陈保生，何平，吕新跃，薛红，王克勤，白广林（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所，北京１００００５）载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因３＇端下游有一个可变数目串联重复序列（ｖａｒ...     

正常人和内源性高甘油三酯血症患者血浆、HDL、LDL及VLDL中脂质与载脂蛋白的相关分析

用直线相关及多元逐步回归的方法对２０例正常人及２０例内源性高甘油三酯血症患者血浆、ＶＬＤＬ、ＬＤＬ及ＨＤＬ的脂质与载脂蛋白的关系进行了分析。单因素分析结果表明：ＴＧ及ｖＬＤＬ、ＴＧ分别与血浆ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ、Ｅ，ＬＤＬａｐｏＢ１００，ＶＬＤＬ中ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ、Ｅ．Ｂ１００呈正相关，与ＨＤＬ３ｐｏＡⅠ呈负相关；ＨＤＬ－Ｃ与血浆ａｐｏＡⅠ、ＨＤＬ中ａｐｏＡⅠ、ＣⅢ呈正相关，与血浆ａｐｏＣⅢ、Ｅ．ＬＤＬａｐｏＢ１００及ＶＬＤＬ中ａｐｏＢ１００、ＣⅡ、ＣⅢ、Ｅ呈负相关；ＴＣ与ａｐｏＢ１００、ＬＤＬａｐｏＢ１００呈正相关。多因素分析结果表明：有７种因素对ＴＧ有显著性影响，其中ＶＬＤＬａｐｏＣⅢ，血浆ａｐｏＣⅢ、Ｅ及ａｐｏＢ１００／ＡⅠ与ＴＧ呈正相关，ＨＤＬ中ａｐｏＣⅡ．Ｅ及ＣⅡ／ＣⅢ与ＴＧ呈负相关；只有血浆ａｐｏＣⅢ、ＶＬＤＬａｐｏＣⅢ、ＬＤＬａｐｏＢ１００三种因素对ＶＬＤＬＴＧ有显著性影响；对ＨＤＬ－Ｃ有显著性影响的因素是：ａｐｏＡⅠ、ＨＤＬａｐｏＡⅠ及ＨＤＬａｎｏＣⅡ呈正相关，ＶＬＤＬａｐｏＥ及ＨＤＬａｐｏＡⅡ呈负相关；ａｐｏＢ１００及ａｐｏＣⅡ与ＴＣ呈正相关。文内还对所得结果进行了讨论。     

载脂蛋白E基因多态性与高脂血症的关系

目的 研究载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因多态性对血脂水平的影响及其与高脂血症的关系。方法 应用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测法,测定８７例正常对照者和１６３例高脂血症患者的ａｐｏＥ基因型;血脂水平按常规方法测定。结果 共检测出４种ａｐｏＥ基因型,分别显Ｅ３／３、Ｅ４／３及Ｅ４／２。高脂血症组ａｐｏＥ４／３基因型和ε４等位基因频率均高于对照组（Ｐ〈０．０５）;不同的ａｐｏＥ等位基因间ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ水平存在差别,依次是ε４〉ε３〉ε２。结论 ａｐｏＥ基因多态性影响血脂的代谢水平;ε４等位基因是高脂血症的遗传易患因素之一。     

抗癌胚抗原单区抗体的质粒构建及表达

目的 对抗癌胚抗原单区抗体进行表达研究。方法 采用ＰＣＲ技术将已获得的抗癌胚抗原（ＣＥＡ）原单克隆抗体Ｅ７Ｂ１０重，轻链可变区基因（ＶＨ、ＶＫ）进行改造后分别克陲是大肠杆菌表达质粒ＰＥＴ－２４α（＋）中，并进行表达，结果 显示重、轻链可变区在大肠杆菌中获得高铲表达，基力体总蛋白的２０％与２５％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ图谱显示表达产物分子量为１３ＫＤ、１２ＫＤ，与其基因编旧白 理     

成人多囊肾病家系的连锁分析

目的 通过对成人多囊肾病家系的限制性片断长度多态性连锁分析，探讨该病出现症状前的诊断。方法 以α珠蛋白基因３′端高度可变区（３’ＨＶＲ）为遗传标记进行Ｓｏｕｔｈｈｅｒｎ杂交。结果 观察到超过１０种３′ＨＶＲ等位片段，对１名家系成员做出症状出现前诊断，结论３’ＨＶＲ能有效地应用于成人多囊肾病的连锁分析。     

脑血管性痴呆载脂蛋白Eε4等位基因及血脂的关联分析

为探讨载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）外显子４基因多态性与血管性痴呆（ＶＤ）的关系,采用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性分析法（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测４９例ＶＤ患者和１０８例同龄对照,同时检测血脂水平。结果发现ＶＤ组ＡｐｏＥε４等位基因频率（０．２１４）明显高于对照（Ｐ〈０．０１）。ＶＤ组血清总胆固醇（ＴＣ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）和ａｐｏＢ高于对照组（Ｐ〈０．０１）。提示ＡｐｏＥε４等位基因     

载脂蛋白E基因型与脑叶出血的关系

目的 探讨载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型与脑叶出血的关系。方法 用ＰＣＲ技术检测２６例脑叶出血ａｐｏＥ的基因型，并与３０名健康同年龄对照组和３０例基底节脑出血组比较。结果 脑叶出血组ε４等位基因频率明显高于健康对照组（Ｐ〈０．０５），且脑叶出血组Ｅ３／３基因型有下降趋势；而基底节出血组ａｐｏＥ基因型与ε４等位基因频率和健康对照组比较没有显著性差异（Ｐ〉０．０５）。结论 ε４等位基因有较高的脑叶出血风     

老年人载脂蛋白E表型多态性分布

目的：探讨ａｐｏＥ在老年人中的多态性分布规律。方法：用等电聚焦电泳和免疫印迹法检测了８２２例健康老年志愿者（６０～９６岁）的ａｐｏＥ基因表型及等位基因频率。结果：受检人群Ｅ２、Ｅ３、Ｅ４频率分别为６．３２％、８７．４１％、６．２７％。各年龄组间ａｐｏＥ基因表型频率与基因型频率分布有明显差异，随年龄增加Ｅ２频率增高，　Ｅ４则下降。男女性别组间的频率分布差异无显著性。结论：ａｐｏＥ基因表型和等位基因频率与年龄有关，与性别无关，推测Ｅ２为长寿基因。     

成都地区362名汉族成人载脂蛋白E表型分布及其与血脂和载脂蛋白之间的关系

为探讨成都地区汉族人群载脂蛋白（ａｐｏ）Ｅ多态性情况及其与血脂、ａｐｏ 之间的关系,作者随机抽取了成都地区健康体检的３６２名汉族成人,采用等电聚焦免疫印迹分析法对其血清ａｐｏＥ表型进行了测定,同时对受检者空腹血ＴＧ、ＴＣ及ａｐｏＡⅠ,Ｂ１００,ＣⅡ,ＣⅢ,Ｅ进行了全面分析。结果显示：成都地区汉族人群ａｐｏＥ表型分布频率为：Ｅ３／３ ７２．９３％ ,Ｅ２／３ １２．９８％ ,Ｅ３／４ １１．３３％ ,Ｅ２／４ １．３８％ ,Ｅ４／４ １．３８％ ,Ｅ２／２未检测到。ＡｐｏＥ等位基因频率为：ε３ ０．８５０８,ε２ ０．０７１８,ε４ ０．０７７４。３６２名汉族成人不同ａｐｏＥ表型的血脂和载脂蛋白水平显示：与ａｐｏＥ３ （Ｅ３／３）或ａｐｏＥ４（Ｅ３／４ ＋ Ｅ４／４ ）组比较,ａｐｏＥ２ （Ｅ２／３ ＋ Ｅ２／２ ）组血清ＴＣ及ａｐｏＢ１００ 明显降低（Ｐ＜ ０．０５）,ａｐｏＥ水平明显升高（Ｐ＜０．００１）,ＴＧ、ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣⅡ、ａｐｏＣⅢ水平无统计学差异;与ａｐｏＥ３ 组比较,ａｐｏＥ４ 组ＴＧ、ＴＣ、ａｐｏＡⅠ、Ｂ１００、ＣⅡ、ＣⅢ和Ｅ均无统计学差异。     

载脂蛋白E基因对血脂代谢的调节及其与脑梗塞的关系

应用改良的聚合酶链反应－限制性片段长度多态性的方法，测定了１０２例正常人和６８例脑梗塞者的载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型，并分析了两组受试者的血脂，脂蛋白和载脂蛋白Ｂ（ａＰＯＢ）水平的差别，以及该基因对上述脂质参数的影响。结果显示：ａｐｏＥ４等位基因有升高血总胆固醇（ＴＣ），低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ｃｈ）和ａｐｏＢ水平的作用，而ａｐｏＥ２位基因则有相反的作用，后者的频率在脑梗塞组高于对照组，提示     

Structure and function of alleles in the 3' end region of human apoB gene

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆａｌｅｌｅｓｉｎｔｈｅ３’ｅｎｄｏｆｔｈｅａｐｏＢｇｅｎｅｉｎＨａｎ,ＭｏｎｇｏｌｉａｎａｎｄＴｉｂｅｔａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｉｎＣｈｉｎａａｓｗｅｌａｓｔｈｅｒｏｌｅｓｉｎｔｈｅｒｅｇ...     

湖北恩施土家族地区人群载脂蛋白B基因3＇VNTR与患冠心病相关性的临床分析

目的：探讨湖北恩施土家族地区人群载脂蛋白B（apolipoproteinB,ApoB）基因3＇VNTR与冠心病（coronary heart dis-ease,CHD）易感性的相关性。方法：应用聚合酶链反应（PCR）对102例健康人和58例CHD患者的ApoB基因多态性进行分析。结果：土家族冠心病组3＇VNTR等位基因的分布不同,以HVE32为主,汉族患者以HVE34、HVE36和HVE38为主,性别无明显差异性。结论：ApoB基因3＇VNTR多态性与该地区土家族冠心病患者易感性有关,与性别无关。     

青海藏族人群载脂蛋白B基因多态性的研究

目的：了解藏族人群载脂蛋白B基因多态性的特点。方法：应用聚合酶链式反应首次研究了青海正常藏族人群（100例,男女各半）载脂蛋白B基因的可变数目串连重复序列（VNTR）及信号肽插入／缺失（Ins／Del）两个位点的多态性分布。结果：共检出20种VNTR等位基因,以HVE32等位基因（频率为0．27）最常见,其次为HVE34等位基因（频率为0．21）。该人群中信号肽的编码序列以Ins等位基因占优势,频率为0．745,Del等位基因频率为0．255。结论：青海藏族人群中的apoB基因VNTR多态性分布与汉族人群间存在差异,与西方白种人群比较VNTR和Ins／Del多态性的差异更为显著。提示东西方人种族之间存在各自的遗传恃点。     

Genetic diversity at the FMR1 locus in Mexican population

BACKGROUND: Fragile X syndrome is the most frequent cause of inherited mental retardation; it is caused by expansion of CGG repeats in the first exon of the FMR1 gene. Number of CGG repeats varies between 6 and 50 triplets in normal individuals and the most common alleles have 29 or 30 repeats. Allelic patterns in the global population are similar; however, some reports show statistical differences among several populations. Distribution of allelic frequencies for FMR1 locus has not been reported in Mexican population. METHODS: Determination of the CGG repeat number was achieved by polymerase chain reaction (PCR) on modified DNA from 129 unrelated Mexican mestizos (46 FRAXA-negative males with mental retardation and 83 healthy individuals). DNA modification by sodium bisulfite achieves conversion of unmethylated cytosine residues to uracil, which allows efficient amplification by single PCR. Methylation status of FMR1 region for each individual was also established. DNA sequencing of a number of amplified samples was realized to validate the procedure. RESULTS: Molecular analysis of the FMR1 gene showed 23 different alleles. Statistical comparison of allelic length between healthy and affected individuals does not show significant differences. Trinucleotide repeat number varied from 16-40, with modal number of 32 (27.58%), second peak at 30 (25.28%), and minor peak at 34 (10.34%). Together, allelic distribution in the Mexican sample differs significantly from those reported for Caucasian, Chinese, African, Indonesian, Brazilian, Chilean, and Mixtec populations. An excess of large alleles (> or =34 repeats) was evident. CONCLUSIONS: Allele distribution in FMR1 gene from Mexican mestizos is different from that of other reported populations around the world. This unusual modal pattern probably is related to the particular ethnic background of the Mexican population. On the other hand, PCR on modified DNA is a valuable and efficient method for determination of CGG repetitive sequences in FMR1 gene.     

正常人群及3个智力低下家系FMR1基因CGG重复序列检测与分析

目的:检测、分析脆性X综合征致病基因FMR1第1外显子的三核苷酸CGG重复序列在正常人群及智力低下家系中的分布情况。方法:采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术方法,对随机抽取的154名中国汉族正常人(男73人、女81人)和3个智力低下家系有关成员FMR1基因CGG重复序列进行分析。结果:共检测到19种等位基因,CGG重复变异范围n=12～40,最大频率等位基因n=29,频率为16.2%。3个智力低下家系中未检测到CGG重复序列异常扩增。结论:在中国正常人群体中FMR1基因CGG重复序列变异分布与高加索人群体有差异;所检测的3个家系智力低下症状不是由于FMR1基因CGG重复异常扩增所致。     

STR基因座D1S518、D4S2639、D15S817汉族人群遗传多态性调查

目的分析武汉地区汉族人群D1S518、D4S2639、D15S8173个短串联重复序列（STR）基因座遗传多态性，探讨其在法医学检验中的应用价值。方法应用PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及银染显带等技术，对各样品进行3个STR基因座分型，调查武汉地区汉族人群3个STR基因座遗传多态性基因频率分布。结果D1S518基因座观察到8个等位基因，24个基因型；D4S2639基因座观察到9个等位基因，32个基因型；D15s817基因座观察到7个等位基因，18个基因型，3个STR基因座的杂合度分别为0．7547、0．8165、0．7602；多态性信息含量分别为0．7290、0．7568、0．7222。结论DIS518、D4S2639、D15S8173个STR基因座基因频率分布与Hardy-Weinberg平衡吻合良好，在武汉地区汉族人群中呈现较高的遗传多态性，属于高信息度遗传标记。     

新疆哈萨克族血管紧张素原基因GT重复序列多态性研究

目的: 探讨研究血管紧张素原(AGT)基因 3′端 GT重复序列多态性在不同种族群体中的分布特点。方法: 应用PCR扩增、毛细管电泳和Genetic Profiler 自动分析软件进行微卫星基因组扫描分析技术,检测 170 名新疆哈萨克民族AGT基因的3′端GT重复序列多态性。结果: 新疆哈萨克民族 AGT基因 3′端 GT重复序列存在13种等位基因,按片段由小至大分别命名为A1~A13(GT的重复次数依次为 13~25), 扩增长度为 160~184bp, 其频率为0.003~0.197。以扩增片段长度为 170 bp的 A6 等位基因最为常见,其次为 A3 和 A4,分布符合Hardy Weinberg遗传平衡定律。该位点杂合度为 0.862,多态信息量为 0.847。结论: 新疆哈萨克族人 AGT基因3′端GT重复序列等位基因型与其他人种、民族人群不同。     

醛糖还原酶基因(AC)n二核苷酸串联重复序列不同等位基因的筛选

研究了醛糖还原酶基因转录起始点上游 - 2 1kb处的微卫星DNA标记--- (AC)n二核苷酸串联重复序列 7种等位基因 (Z + 6,Z + 4,Z + 2 ,Z ,Z 2 ,Z 4和Z 6)的筛选方法。首先自人外周血提取基因组DNA后设计一对引物进行PCR扩增 ,获得长度为 13 2～ 14 4bp的DNA片段。选取等位基因为纯合子的个体DNA标本的PCR扩增产物 ,经纯化后直接测序以确定等位基因的种类 ;并以确定的等位基因为标准 ,用尿素 /甲酰胺聚丙烯酰胺凝胶电泳银染显色法对各种等位基因进行筛选。该法操作简便、快速、准确度高 ,利于大量标本的筛选 ,也适用于其它二核苷酸重复序列等位基因的筛选。     

糖还原酶基因（AC）n二核苷酸串联重复序列不同等位基因的筛选

研究了醛糖还原酶基因转当起始点上游－２．１ｋｂ处的微卫星ＤＮＡ标记－（ＡＣ）ｎ二核苷酸串联重复序列７种等位基因（Ｚ＋６，Ｚ＋４，Ｚ＋２，Ｚ，Ｘ－２，Ｚ－４和 Ｚ－６）的筛选方法。首先自人外周血提取基因组ＤＮＡ后设计一对引物进行ＰＣＲ扩增，获得长度为１３２－１４４ｂｐ的ＤＮＡ片段。选取等位基因为纯合子的个体ＤＮＡ标本的ＰＣＲ扩增产物，经纯化后直接测序以确定等位基因的种类；并以确定的等位基因为标准，用     

亨廷顿病的基因诊断及家系分析

为了对亨廷顿病进行早期准确基因诊断，作者应用限制性片段长度多态性连锁分析和巢式聚合酶链反应直接检测ＩＴ１５基因ＣＡＧ三核苷酸重复序列的技术，对徐州和浙江两大亨 廷顿病（ＨＤ）家系，共８例患者和３９例高风险家庭成员进行了基因诊断。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影和直接ＤＮＡ测序的分析结果表明，在所分析的正常ＩＴ１５基因中，（ＣＡＧ）ｎ拷贝数大多为１６，而突变ＩＴ１５基因（ＣＡＧ）ｎ拷贝数均大于４０