Snail与Claudin-3蛋白的表达与原发性肝癌发生及预后的关联性研究

目的 本研究通过收集原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者的临床资料,并检测癌及癌旁组织中Claudin-3和Snail蛋白的表达,探讨Claudin-3和Snail蛋白与肝癌患者临床病理特征与预后的关联。方法 收集根治性切除的肝细胞癌病例患者资料,利用免疫组织化学的方法检测82例HCC组织及60例癌旁组织中Snail、Claudin-3蛋白的表达。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,应用Cox比例风险模型进行多因素回归分析。结果 肝癌组织中Snail蛋白阳性表达69.47%,高于癌旁组织,差异有统计学意义（P=0.001）;Claudin-3阳性表达47.61%,低于癌旁组织,差异有统计学意义（P=0.002）;两者的表达呈负相关（r=-0.430,P<0.01）;Snail蛋白在HCC中阳性表达明显高于癌旁组织,在病理分期、微血管侵犯相关方面差异有统计学意义（P<0.05）;在Cox多因素回归分析中,Snail、Claudin-3的表达是HCC患者生存的独立危险因素（P<0.05）。结论 Snail与Claudin-3蛋白与HCC的发生、侵袭有一定的关联性。进行HCC患者Snail、Claudin-3蛋白的联合检测,在临床实践中对HCC患者病理学特征与预后的判断具有重要的提示作用。     

TM4SF1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨四次跨膜蛋白1（TM4SF1）在乳腺癌组织中的表达情况,阐明其临床意义并初步探索其相关分子生物学机制。方法：收集190例人乳腺癌组织、110例癌旁组织和110例正常乳腺组织。免疫组织化学法检测乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中TM4SF1的表达,Western blotting法检测乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中TM4SF1的表达水平,RT-PCR法检测乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中TM4SF1mRNA的表达水平,检测不同临床病理特征乳腺癌患者乳腺癌组织中TM4SF1阳性表达率。结果：乳腺癌组织中TM4SF1阳性表达率高于癌旁组织和正常乳腺组织（P < 0.05）,癌旁组织与正常乳腺组织中TM4SF1的阳性表达率比较差异无统计学意义（P=0.531）;TM4SF1表达与患者年龄无明显关联,与肿块大小、分化程度、淋巴结转移和肿瘤分期有密切关联（P < 0.05）;基底样型乳腺癌组织中TM4SF1阳性表达率高于其他3种病理类型（P < 0.05）。Western blotting法检测,乳腺癌组织中TM4SF1表达水平高于癌旁组织和正常乳腺组织（P < 0.05）,癌旁组织与正常乳腺组织中TM4SF1表达水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。RT-PCR检测,乳腺癌组织中TM4SF1mRNA表达水平高于癌旁组织和正常乳腺组织（P < 0.01）;癌旁组织与正常乳腺组织中TM4SF1mRNA的表达水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。结论：TM4SF1在乳腺癌组织中呈高表达,TM4SF1可能通过多种机制影响乳腺癌的发生发展及远处转移,提示TM4SF1可能成为乳腺癌治疗潜在的靶点。     

Krüppel样转录因子12在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达及其意义

目的：检测Krüppel样转录因子12（KLF12）蛋白在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达,并探讨其临床价值。方法：选择120例结直肠癌手术患者作为研究对象（病例组）,收集结直肠癌组织和癌旁组织的石蜡标本,选择体检正常者100人作为对照组。免疫组织化学染色检测结直肠癌组织和癌旁肠组织中KLF12、nm23、周期素E1（CyclinE1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9蛋白的表达情况;ELISA法检测手术前和术后1个月时患者血清中KLF12水平并检测对照组受试者血清中KLF12水平。结果：结直肠癌组织中KLF12、CyclinE1、MMP-2和MMP-9蛋白阳性表达率高于癌旁组织（χ²=66.155,52.795,64.515,52.632;P<0.001）,nm23蛋白阳性表达率低于癌旁组织（χ²=13.019,P<0.001）。Spearman相关分析,结直肠癌组织中KLF12蛋白与MMP-2和MMP-9蛋白表达水平呈正相关关系（r=0.396 3,P<0.001;r=0.326 4,P<0.001）,与nm23蛋白表达水平呈负相关关系（r=-0.227 3,P=0.013）。病例组结直肠癌患者手术前血清中KLF12蛋白表达水平高于对照组,血清中KLF12蛋白表达水平受试者工作特征曲线（ROC）的最佳cut-off值为3.795 μg·L^-1,曲线下面积为0.834,其对诊断结直肠癌的敏感度和特异度分别为60.8%和94.0%。病例组结直肠癌患者手术后血清中KLF12蛋白表达水平降低,但仍高于对照组（t=2.708,P=0.007）;结直肠癌组织中KLF12蛋白表达水平与血清中KLF12蛋白表达水平呈正相关关系（r=0.406 9,P<0.001）。淋巴结转移程度为N3的（N3组）患者血清中KLF12水平最高,N0组患者最低（F=21.731,P<0.001）。结论：KLF12蛋白可能参与了结直肠癌的侵袭转移,检测患者血清中KLF12蛋白表达水平可能对判断病情和预测淋巴结转移有价值。     

核糖体蛋白L37在前列腺癌中的表达及临床意义

目的:研究人核糖体蛋白L37（RPL37）在前列腺癌中的表达及其临床意义。方法:应用real-time qPCR（RT-qPCR）和Western blot检测64例前列腺癌组织及癌旁组织中RPL37 mRNA和蛋白的表达情况,分析其与前列腺癌患者临床病理特征及生存状况之间的关系。结果 :RT-qPCR和Western blot结果表明,前列腺癌组织中RPL37 mRNA和蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.05); RPL37 mRNA的表达增高与患者血清中的PSA水平增加、高Gleason评分及肿瘤的临床分期有关(P＜0.05),与患者的年龄、淋巴结转移、精囊侵犯及手术切缘无关(P＞0.05)。生存分析表明,前列腺癌患者中RPL37 mRNA高表达组的总生存期显著低于低表达组（P=0.006）。结论:RPL37mRNA的表达增高与前列腺癌的发生、发展相关;RPL37可以初步判断前列腺癌患者的预后。     

肝细胞癌中趋化因子CXCL10及其受体CXCR3的表达及临床意义分析

目的 探索趋化因子CXCL10及其受体CXCR3基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义。方法 通过挖掘癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)中HCC数据库和国际肝癌研究所(Liver Cancer Institute,LCI)中乙肝相关肝癌数据库,分析CXCL10基因和CXCR3基因在HCC及癌旁组织中的表达以及与患者术后总生存率的关系;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)方法检测45例乙肝相关HCC患者临床样本中CXCL10基因和CXCR3基因的表达情况,并分析CXCL10和CXCR3基因表达的相关性。结果 TCGA数据库中CXCL10基因在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织(非配对样本:3.379±2.081 vs. 2.213±2.274,P<0.001;配对样本:3.159±2.267 vs. 2.213±2.274,P=0.018),LCI数据库中CXCL10基因在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织(7.625±1.683 vs. 7.287±1.328,P=0.009),TCGA和LCI数据库中CXCL10基因高表达HCC患者术后总体生存率高于CXCL10基因低表达患者(P=0.107,P=0.002)。TCGA数据库中CXCR3基因在HCC组织的表达显著高于癌旁组织(非配对样本:-0.906±1.697 vs. -1.978±1.629,P<0.001;配对样本:-1.329±1.732 vs. -1.978±1.629,P=0.037),而LCI数据库中CXCR3基因在乙肝相关HCC组织的表达显著低于癌旁组织(3.989±0.339 vs. 4.074±0.309,P=0.003),但两个数据库中HCC组织CXCR3基因高表达患者的术后总体生存率均显著高于CXCR3基因低表达患者(P=0.004,P=0.014)。TCGA数据库中CXCL10基因与CXCR3基因在HCC和癌旁组织里的表达水平均呈正相关(r=0.584,P<0.001;r=0.776,P<0.001)。临床样本检测结果显示,CXCL10基因在乙肝相关HCC和配对癌旁组织里的表达水平分别为0.479(0.223,1.094)和0.484(0.241,0.846),均显著高于正常肝组织的0.131(0.106,0.159)(P=0.010,P<0.001), CXCR3基因在HCC和配对癌旁组织里的表达水平分别为0.011(0.006,0.019)和0.016(0.011,0.021),也显著高于正常肝组织的0.002(0.001,0.004)(P=0.004,P<0.001), 但CXCL10和CXCR3基因在HCC组织中的表达水平与配对癌旁组织相比差异均无统计学意义(P=1.000,P=0.374)。结论 CXCL10在不同病因HCC组织中均呈高表达,CXCR3在乙肝相关HCC组织中呈低表达,HCC组织中CXCL10和CXCR3的高表达均利于HCC患者的术后生存。     

肝细胞肝癌中ZNF146蛋白的表达及意义

目的：探讨锌指蛋白146（ZNF146）在肝细胞肝癌（HCC）癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集40例HCC肿瘤组织和癌旁组织,采用逆转录-聚合酶链式反应和免疫组化检测HCC肿瘤组织、癌旁组织ZNF146基因mRNA和蛋白的表达,分析ZNF146表达与临床病理因素的关系。结果：HCC肿瘤组织中ZNF146 mRNA及其蛋白的表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,在不同分期及不同大小肿瘤中ZNF146表达的差异有统计学意义（P＜0.05）,肿瘤直径≥5 cm、Ⅲ/Ⅳ期肿瘤患者中ZNF146表达明显增加,而在患者年龄、性别、是否有HBsAg感染的不同组别中ZNF146表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：ZNF146在HCC组织中表达增高,可能参与与肿瘤发生和演进,ZNF146有可能是HCC潜在的生物标志物之一。     

蛋白翻译起始因子C2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义

目的：研究C2 mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌（HCC）中的表达及意义。方法：用原位杂交检测C2 mRNA在21例HCC及其癌旁组织中的表达,ABC免疫组化法检测C2蛋白60例HCC及其42例癌旁组织中的表达,Western blot检测C2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果：21例HCC及其癌旁组织中,C2 mRNA阳性率分别占23.8%（5/21）和85.7%(18/21)。60例HCC及42例癌旁组织中,C2蛋白阳性分别占27.3%(17/60)和83.3%（35/42）。27例肝硬变中,C2蛋白阳性率为77.8%(21/27)。χ^2检验：C2 mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织（P＜0.001);C2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织（P＜0.001);C2的表达与患年龄、HBsAg及AFP有明显关系（P＜0.001);碉与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无并;Western bolt与免疫组化结果一致。结论：C2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断。     

间隙连接基因Cx32在肝细胞癌中的表达意义

目的：探讨肝细胞癌（HCC）、癌旁组织及正常肝组织中细胞间隙连接Cx32mRNA与Cx32蛋白的表达及其在HCC发生中的意义和机制。方法：应用Western blot和RT-PCR分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在26例HCC组织、22例癌旁组织和9例正常肝组织中的表达。结果：Cx32蛋白在HCC中的表达明显低于正常肝组织和癌旁肝组织（P〈0.01）;Cx32mRNA在HCC、癌旁肝组织和正常肝组织均有一定水平,但三者之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：Cx32蛋白在肝癌中的表达下调可能是肝癌发生的重要环节,Cx32蛋白的减少与该基因在翻译或蛋白质的加工修饰过程中调控异常有关。     

肝细胞癌中ZHX2蛋白表达的检测

目的 检测肝细胞癌中ZHX2蛋白表达的情况。方法 采用组织芯片及免疫组织化学方法检测正常肝组织、肝硬化组织、肝细胞癌(HCC)组织及癌旁非肿瘤组织中ZHX2蛋白的表达情况。结果 在正常肝组织、肝硬化组织及癌旁非肿瘤组织中均未检测到ZHX2蛋白的表达,在HCC组织中ZHX2蛋白的表达率为19.5%。ZHX2蛋白在III～IV级HCC组织中的表达率为31.3%,明显高于I～II级组织中的表达率（16.5%）。HCC组织中ZHX2蛋白的表达与术前血清AFP呈负相关关系。结论 ZHX2有可能成为诊断HCC的新的标记物,它的检测有助于血清AFP≤20μg/L HCC的诊断。在人类HCC中可能存在着ZHX2对血清AFP的负调控。 【关键词】 肝细胞癌 ZHX2 AFP     

肝细胞肝癌中C2基因表达与HBxAg的关系

目的 研究蛋白翻译起始因子C2在肝硬化（LC），原发性肝细胞癌（HCC）中表达的意义，并探讨其与HBxAg表达的关系。方法 用免疫组化方法检测C2，HBxAg在肝硬化（n=27),HCC(n=60）中蛋白水平的表达。Western blo法检测C2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果 在27例LC中，C2蛋白阳性率为77．8％（21／27），HBxAg阳性率为74．1％（20／27） ，60例HCC及42例癌旁组织中，C3蛋白阳性率分别占27．3％（17／60）和83．3％（35／42）。在HBxAg阳性的49例HCC中，10例C2蛋白阳性，阳性率为20．4％，在HBxAg阴性11例HCC中，7例C2蛋白阳性，阳性率63．6％，C2蛋白在LC中的表达明显高于HCC(P＜0．01），C3在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织（P＜0．01）；C2在HBxAg阳性HCC中表达明显低于HBxAg阴性HCC（P＜0．05）。Western blot与免疫组化结果一致。结论 C2蛋白表达下调及HBxAg对C2的抑制作用可能与HCC发生发展有关。     

P4HA2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肝癌的发生和发展

目的 探讨脯氨酸4-羟化酶II（P4HA2）在肝癌细胞发生发展中的作用及相关机制。方法 利用GEPIA、Human Protein Atlas数据库预测P4HA2在肝癌中的表达情况,利用K-M plotter在线数据库分析P4HA2的表达情况与肝癌预后的关系,采用qRT-PCR和Western blot检测肝癌细胞和正常肝细胞中P4HA2的表达。构建慢病毒载体,用携带P4HA2 shRNA和Con shRNA的慢病毒载体分别转染肝癌SNU-449和Hep-3B细胞系,建立沉默表达P4HA2的细胞株（shP4HA2组）和对照组细胞株（NC组）。采用CCK-8、集落形成试验、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用Western blot实验检测上皮-间质转化和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果 在线数据库分析结果显示,肝癌组织中P4HA2表达高于正常肝组织（P<0.05）。同时,肝癌细胞系中P4HA2 mRNA和蛋白表达水平也高于正常肝细胞（P<0.01）。慢病毒干扰后,与NC组相比,shP4HA2组中mRNA和蛋白表达水平下降（P<0.05）。P4HA2基因表达沉默后,细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。Western blot显示,相对于NC组,shP4HA2组的E-cadherin蛋白表达上升,N-cadherin、Snail蛋白表达下降（P<0.05）,在PI3K/AKT/mTOR通路中,磷酸化的PI3K（P-PI3K）、AKT（P-AKT）和mTOR（P-mTOR）显示出较低的水平（P<0.05）。结论 P4HA2通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进肝癌的发生发展。     

HERV-HLTR相关蛋白2在肝癌中的表达及其临床意义

目的 检测肝细胞癌组织中HERV-HLTR相关蛋白2(HHLA2)的表达及其与不同病理分级、临床分期、肝功能及甲胎蛋白(AFP)的关系.方法 采用免疫组化法检测150例肝癌石蜡包埋组织标本中HHLA2的表达阳性率,并以10例患者正常肝脏组织标本作为正常对照,比较在不同的病理分级、临床分期、肝功能分级及AFP水平情况下肝癌组织中HHLA2的表达差异.结果 肝癌组织中HHLA2的阳性表达率显著高于正常对照(P＜0.05),低分化肝癌HHLA2表达阳性率最高,低分化、中分化肝癌组HHLA2表达阳性率显著高于高分化组(P＜0.05);肝癌巴塞罗那分期C期、D期患者HHLA2阳性表达率显著高于A期、B期(P＜0.05);肝功能Child-Pugh A级的患者HHLA2阳性表达率明显低于B级及C级(P＜0.01);不同年龄、不同血清AFP水平患者肝癌组织中HHLA2的表达率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肝癌细胞癌患者癌组织中HHLA2的阳性表达率明显升高,HHLA2可能在肝癌的发生、发展、转移中具有一定的作用.     

Inhibition of connective tissue growth factor overexpression decreases growth of hepatocellular carcinoma cells in vitro and in vivo

Background  We have previously found that connective tissue growth factor (CTGF) is highly expressed in a rat model of liver cancer. Here, we examined expression of CTGF in human hepatocellular carcinoma (HCC) cells and its effect on cell growth.

Methods  Real-time PCR was used to observe expression of CTGF in human HCC cell lines HepG2, SMMC-7721, MHCC-97H and LO2. siRNA for the CTGF gene was designed, synthesized and cloned into a Plk0.1-GFP-SP6 vector to construct a lentivirus-mediated shRNA/CTGF. CTGF mRNA and protein expression in HepG2 cells treated by CTGF-specific shRNA was evaluated by real-time PCR and Western blotting. 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay was utilized to evaluate the growth effect, and a colony formation assay was used for observing clonogenic growth. In vivo, tumor cell proliferation was evaluated in a nude mouse model of xenotransplantation. Statistical significance was determined by t test for comparison between two groups, or analysis of variance (ANOVA) for multiple groups.

Results  Immunohistochemical staining of CTGF was seen in 35 of 40 HCC samples (87.5%). CTGF was overexpressed 5-fold in 20 HCC tissues, compared with surrounding non-tumor liver tissue. CTGF mRNA level was 5–8-fold higher in HepG2, SMMC-7721 and MHCC-97H than in LO2 cells. This indicated that the inhibition rate of cell growth was 43% after knockdown of CTGF expression (P <0.05). Soft agar colony formation assay showed that siRNA mediated knockdown of CTGF inhibited colony formation in soft agar of HepG2 cells (P <0.05). The volume of tumors from CTGF-shRNA-expressing cells only accounted for 35% of the tumors from the scrambled control-infected HepG2 cells (P <0.05).

Conclusions  CTGF was overexpressed in human HCC cells and downregulation of CTGF inhibited HCC growth in vitro and in vivo. Knockdown of CTGF may be a potential therapeutic strategy for treatment of HCC.

     

Occludin表达与人肝细胞癌发生和发展的关系

目的: 探讨紧密连接蛋白occludin表达与人肝细胞癌发生和发展的关系。方法: 运用免疫组化技术检测occludin在人肝细胞癌中的表达,并进行苏木精-伊红(HE)染色观察细胞结构。结果: occludin主要定位于肝细胞膜,且癌旁肝组织的表达阳性率明显高于肝细胞癌(P<0.01).癌旁肝组织occludin表达++~++级强度显著高于肝细胞癌(P<0.005)。occludin在10例分化较好(Ⅰ、Ⅱ级)的肝细胞癌及其癌旁组织中的表达,其阳性率差异无显著性(P>0.05),但33例分化较差(Ⅲ、Ⅳ级)的肝细胞癌中,occludin在癌旁组织中表达的阳性率高于癌组织(P<0.05)。结论: 肝细胞癌与癌旁肝组织相比,occludin表达阳性率及其强度均明显下降,其改变在肝细胞癌的发生发展中可能起重要作用。     

miR-424通过调控ATG14的表达抑制肝癌细胞的自噬和增殖

目的 研究miR-424通过调控ATG14表达影响自噬和肝癌细胞增殖。方法 收集肝癌患者因手术切除的肝癌组织及其癌旁组织,采用 qRT-PCR 法检测肝癌组织中 miR-424-5p,ATG14 的表达。培养人肝癌细胞系 HepG2、SMMC-7721、Huh-7、MHCC97H、HCCLM3和人正常肝细胞LO2,qRT-PCR法检测上述各细胞系的miR-424-5p表达,选取表达量较高的Huh-7和表达量较低的HCCLM3肝癌细胞为研究对象,Huh-7细胞实验分组（n=3）：干扰miR-424-5p表达阴性对照组（in-NC组）,干扰miR-424-5p表达组（in-miR-424-5p组）;HCCLM3细胞实验分组（n=3）：过表达miR-424-5p组（mi-miR-424-5p组）,另设过表达miR-424-5p阴性对照组（mi-NC组）;过表达miR-424-5p阴性对照+过表达ATG14阴性对照组（mi-NC+NC组）;过表达miR-424-5p阴性对照+过表达ATG14组（mi-NC+ ATG14组）;过表达miR-424-5p +过表达ATG14阴性对照组（mi-miR-424-5p+NC组）;过表达miR-424-5p +过表达ATG14组（mi-miR-424-5p +ATG14组）。qRT-PCR法及Western blot法验证各组miR-424-5p和ATG14的转染情况。采用MTT法检测各组细胞的细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞的细胞凋亡水平,Western blot检测各组细胞的ATG14和自噬相关蛋白LC3、Beclin1和P62的表达水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-424-5p和ATG14之间的相互作用。结果 在肝癌组织和细胞中ATG14高表达,miR-424-5p低表达。与相应对照组相比,过表达miR-424-5p抑制肝癌细胞增殖和促进凋亡（P<0.05）;干扰miR-424-5p表达及过表达ATG14促进肝癌细胞增殖和抑制凋亡（P<0.05）;miR-424可能通过靶向ATG14发挥抑癌的作用。干扰miR-424-5p表达及过表达ATG14均能提高肝癌细胞自噬体标志蛋白LC3-ΙΙ/LC3-Ι、Beclin1的表达水平（P<0.05）,降低自噬受体蛋白P62的表达水平（P<0.05）;过表达miR-424-5p则降低肝癌细胞自噬体标志蛋白LC3-ΙΙ/LC3-Ι、Beclin1的表达水平（P<0.05）,提高自噬受体蛋白P62的表达水平（P<0.05）。结论 miR-424调控ATG14表达影响自噬,从而抑制肝癌细胞增殖。     

β-catenin在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）B—catenin的表达与HCC临床病理特征的关系。方法应用Envsion法检测333例HCC,168例癌旁肝组织及89例正常肝组织的β-catenin表达;RT—PCR检测37例HCC及癌旁组织,肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞株L02的β-cateninmRNA表达。结果β-catenin在HCC胞质、胞核的阳性表达率为79％／37％;在癌旁和正常肝组织中的表达率为72％／0％、70％／0％。差异均有统计学意义（P均〈0．05）。且分化好的癌细胞表达低,分化差的细胞表达高。同时,HCC和HepG2的β-cateninmRNA表达高于癌旁组织及LO2的表达。结论肝细胞癌的β-catenin过表达提示其在癌的发生过程中可能起着促癌的作用。     

肝细胞癌组织中Skp2的表达及与p27kip1、PCNA蛋白表达的关系

目的:探讨Skp2的表达在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用,及其与p27kip1(p27)和PCNA的关系。方法:收集76例HCC及癌旁组织,l0例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,l0例HCC及癌旁肝新鲜组织,采用免疫组织化学方法及免疫印迹技术检测Skp2、p27及PCNA蛋白在这些组织中的表达。结果:免疫印迹结果显示:Skp2在HCC组织中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。免疫组织化学结果显示HCC中Skp2的阳性率(24.08%)显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.001)。Skp2的表达与肝癌组织分化程度,血清AFP值及转移有关(P<0.05)。p27在正常肝组织和癌旁组织中的表达明显高于HCC组织(P<0.001)。HCC组织中PCNA蛋白的表达明显高于癌旁和正常组织(P<0.01)。HCC组织中Skp2的表达与p27呈负相关(P<0.001);与PCNA呈正相关(P<0.01)。结论:Skp2在HCC组织中表达是上调的,可能是通过作用于细胞周期调控蛋白p27,加速了对p27泛素化依赖的蛋白降解,使其表达及代谢发生异常。导致细胞周期失控并促进细胞异常增殖,从而参与了HCC的发生和发展。     

pAkt在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的研究pAkt在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其与临床病理参数、预后之间的关系。方法利用组织芯片技术和免疫组化方法检测85例HCC组织、85例癌旁组织和26例正常肝组织中pAkt的表达情况,并分析其与临床病理参数和预后的关系。结果pAkt在HCC中的表达阳性率（75.3％）高于癌旁组织（21．2％）（P〈0．01）和正常肝组织（15．4％）（P〈0．01）,pAkt在HCC癌组织的表达与患者肿瘤转移有关,差异均具有统计学意义（P=0．007）;pAkt阴性表达组（66．7％）生存率高于阳性表达组（35．9％）,差异具有统计学意义（P=0．017）。结论pAkt在HCC中过表达,在HCC的发生、发展、侵袭转移及预后中可能起重要作用。     

Sonic Hedgehog信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌中表达与意义

目的:探讨Sonic Hedgehog(SHH)信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义?方法:用RT-PCR方法检测10例HCC组织及相应癌旁组织和肝癌细胞系HepG2?Huh7中Shh?Smo mRNA的表达?采用免疫组化方法检测30例肝癌组织及10例正常肝组织中Shh?Smo蛋白的表达?结果:RT-PCR结果显示HCC组织中Shh?Smo mRNA的表达率显著高于癌旁组织(P < 0.05);Shh?Smo mRNA在Huh7中的表达强度高于HepG2,但两者间无显著性差异(P > 0.05)?免疫组化结果显示Shh?Smo蛋白在HCC组织中阳性率分别为63.3%(19/30)?76.7%(23/30);Smo蛋白的表达与肿瘤大小相关(P < 0.05)?Shh?Smo蛋白在正常肝组织中均无表达?结论:Shh和Smo在肝癌中高表达,表明SHH信号通路可能参与肝癌的发生,为肝癌防治提供新的依据?