毛樱桃总黄酮对RAW264.7细胞中炎症因子水平的影响及其机制

目的：探讨毛樱桃总黄酮（PTTTF）对脂多糖（LPS）诱导的细胞炎症模型中炎症因子的影响,阐明其作用机制。方法：通过LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7和人中性粒细胞（PMN）建立细胞炎症模型,将细胞分为对照组、模型组、地塞米松（DXM）组和不同剂量（0.4、4.0和40.0 mg·L^-1）PTTTF组。采用RT-PCR法检测RAW264.7细胞中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）mRNA表达水平;采用Western blotting法检测RAW264.7细胞中核转录因子κB（NF-κB）及信号通路关键分子细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、C-Jun氨基末端激酶1/2（JNK）和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白表达水平;采用流式细胞术检测RAW264.7细胞S期细胞百分率和PMN细胞凋亡率。结果：与对照组比较,模型组RAW264.7细胞中IL-1β、IL-6、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,S期细胞百分率明显升高（P<0.05）,PMN细胞凋亡百分率明显降低（P<0.05）。与模型组比较,4.0及40.0 mg·L^-1PTTTF组和DXM组RAW264.7细胞中IL-1β、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,S期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01）,PMN细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：PTTTF能够下调LPS诱导的细胞炎症模型中炎症因子表达水平,该作用可能与其降低S期细胞百分率,促进其凋亡,并下调NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达有关。     

血液学相关指标在ICU肿瘤患者细菌感染早期诊断中的应用

目的：测定重症加强护理病房（ICU）肿瘤患者血液学相关指标水平,探讨其在诊断ICU肿瘤患者早期细菌感染中的临床应用。方法：回顾性分析ICU中256例肿瘤患者完整临术资料,根据临床细菌感染标准分为感染组（67例）和非感染组（189例）,根据死亡情况分为存活组（193例）和死亡组（63例）,测定感染组和非感染组ICU肿瘤患者凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）和D-二聚体（DD）、降钙素原（PCT）水平及白细胞（WBC）、中性粒细胞（NEU）、淋巴细胞（LYM）计数,并计算中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）。通过受试者工作特征曲线（ROC）和ROC曲线下面积（AUC）评价上述指标诊断ICU肿瘤患者早期细菌感染以及PCT预测ICU早期细菌感染肿瘤患者死亡风险的灵敏度和特异度。结果：与非感染组比较,感染组ICU肿瘤患者PT、APTT、DD、PCT和NLR均明显升高（P<0.05或P<0.01）。与PCT<0.25 μg·L^-1组比较,0.25 μg·L^-1≤PCT<2.00 μg·L^-1、2.00 μg·L^-1≤PCT<10.00 μg·L^-1和PCT≥10.00 μg·L^-1组ICU早期细菌感染肿瘤患者DD和NLR水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）,2.00 μg·L^-1≤PCT<10.00 μg·L^-1和PCT≥10.00 μg·L^-1组ICU早期细菌感染肿瘤患者PT和APTT均明显升高（P<0.05）。PT、APTT、DD、NLR和PCT诊断ICU肿瘤患者早期细菌感染的AUC、灵敏度和特异度分别为0.636、60.8%和59.1%,0.622、64.6%和58.1%,0.672、69.6%和58.1%,0.752、74.7%和65.6%以及0.855、70.9%和83.9%,差异均有统计学意义（P<0.01）;死亡组ICU早期细菌感染肿瘤患者PCT水平明显高于生存组（P<0.05）,PCT预测ICU早期细菌感染肿瘤患者死亡风险的AUC为0.803（95% CI：0.749~0.857）,临界（Cut-off）值为6.72 μg·L^-1,灵敏度和特异度分别为63.2%和79.1%,差异有统计学意义（P<0.01）。结论：PT、APTT、DD、PCT和NLR可作为ICU肿瘤患者早期细菌感染的诊断指标,NLR灵敏度最高,PCT特异度最高,PCT可作为ICU早期细菌感染肿瘤患者死亡风险的预测指标。     

银杏叶提取物对破骨细胞分化和骨吸收的作用及其机制

目的：探讨不同浓度银杏叶提取物（GBE）对破骨胞分化和骨吸收的作用,并阐明其作用机制。方法：体外培养RAW264.7细胞,采用核因子κB受体活化因子配体（RANKL）和不同浓度GBE处理细胞,分为空白对照组（0μg·L^-1 RANKL）、RANKL组（100 μg·L^-1RANKL）和RANKL+75mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组。抗酒石酸酸性染色（TRAP）法观察各组破骨细胞的形态及数量,骨吸收陷窝面积评估GBE对破骨细胞骨吸收能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法检测RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因活化T细胞核因子c1（NFATc1）、树突状细胞特异性跨膜蛋白（DC-STAMP）、组织蛋白酶K （Cathepsin K）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、P27和细胞周期蛋白D1（Cyclin-D1）的表达水平。结果：与空白对照组比较,RANKL组破骨细胞的数量明显增加（P < 0.05）;与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组破骨细胞数量明显降低（P < 0.05）。与空白对照组比较,RANKL组骨片中骨吸收陷窝面积明显升高（P < 0.05）;与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组骨片中骨吸收陷窝面积明显降低（P < 0.05）。与空白对照组比较,75和150 mg·L^-1 GBE组RAW264.7细胞凋亡率升高（P < 0.05）,RAW264.7细胞中Bcl-2基因表达水平明显降低（P < 0.05）,Bax基因表达水平明显升高（P < 0.05）。与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组RAW264.7细胞G₀-G₁期阻滞明显缩短（P < 0.05）;RAW264.7细胞中P27基因表达水平明显降低（P < 0.05）,Cyclin-D1基因表达水平明显升高（P < 0.05）。与空白对照组比较,RANKL组RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因NFATc1、DC-STAMP、Cathepsin K和MMP-9表达水平明显升高（P < 0.05）;与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^-1 GBE和RANKL+150 mg·L^-1 GBE组RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因NFATc1、DC-STAMP、Cathepsin K和MMP-9表达水平明显降低（P < 0.05）。结论：GBE可抑制破骨细胞分化和骨吸收能力,其机制可能与促进RAW264.7细胞凋亡、缩短RANKL诱导的RAW264.7细胞的G₀-G₁期有关。     

姜黄素对肿瘤相关巨噬细胞分泌细胞因子基因表达的影响

目的：研究姜黄素对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞（Cal27细胞）上清液诱导的肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）分泌细胞因子基因表达的影响,阐明姜黄素抗OSCC的作用机制。方法：将Raw264.7细胞随机分为对照组及不同浓度（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00和40.00μmol·L^-1）姜黄素组,各组细胞加入Cal27细胞上清液共同孵育48 h,CCK-8法检测细胞活性。将Raw264.7细胞随机分为对照组及不同浓度（5、10和20μmol· L^-1）姜黄素组,各组细胞加入Cal27细胞上清液共同孵育36和48 h后,采用Real-time PCR法检测各组细胞中白细胞介素12（IL-12）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素10（IL-10）mRNA表达水平;Cal27细胞上清液孵育Raw264.7细胞48 h后,姜黄素组加入不同浓度（5、10和20μmol·L^-1）姜黄素干预48 h,采用Real-time PCR法检测各组细胞中IL-12、iNOS、TNF-α、IL-10和精氨酸酶1（Arg-1）mRNA表达水平。结果：与对照组比较,40 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞活性明显降低（P<0.01）。不同浓度姜黄素与Cal27细胞上清液共同孵育Raw264.7细胞36 h,与对照组比较,20 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,10和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS和TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,20μmol·L^-1组Raw264.7细胞中IL-10 mRNA表达水平降低（P<0.01）;不同浓度姜黄素与Cal27细胞上清液共同孵育Raw264.7细胞48 h,与对照组比较,5和20 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,5和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS、TNF-α和IL-10 mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。Cal27细胞上清液孵育Raw264.7细胞48 h后,采用不同浓度姜黄素进行干预,与对照组比较,10和20 μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平升高（P<0.01）,不同浓度姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS、TNF-α和Arg-1 mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-10 mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。结论：姜黄素可以在诱导TAMs的不同阶段调节TAMs分泌细胞因子IL-12、iNOS、TNF-α、IL-10和Arg-1 mRNA表达水平。     

食源性原花青素对SH-SY5Y细胞生长的抑制作用及其机制

目的：探讨食源性原花青素对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞生长的抑制作用,并阐明其作用机制。方法：培养SH-SY5Y细胞,将细胞分为对照组及10、20和40mg·L^-1食源性原花青素组,各组细胞中加入含不同浓度（0、10、20和40mg·L^-1）食源性原花青素的培养基,采用噻唑蓝（MTT）法检测药物作用24、48和72h时SH-SY5Y细胞增殖率,流式细胞术检测药物作用72 h时不同细胞周期SH-SY5Y细胞百分率,Annexin Ⅴ凋亡试剂盒检测药物作用72 h时SH-SY5Y细胞的凋亡率。结果：与对照组比较,各时间点10、20和40mg·L^-1食源性原花青素组SH-SY5Y细胞增殖率均降低,作用48和72h时20mg·L^-1食源性原花青素组细胞增殖率差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,作用24、48和72h时40mg·L^-1食源性原花青素组细胞增殖率差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组比较,40mg·L^-1组食源性原花青素组细胞中G₀/G₁期细胞百分率升高（P<0.01）,G₂/M期细胞百分率降低（P<0.01）。与对照组比较,10、20和40mg·L^-1食源性原花青素组细胞凋亡率均明显升高（P<0.01）。结论：食源性原花青素可抑制人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的生长,其机制主要是阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。     

妊娠妇女血清辅酶Q10水平与其新生儿出生体质量的关联性分析

目的：探讨妊娠妇女血清辅酶Q10（CoQ10）水平与新生儿体质量的关联性,阐明CoQ10对新生儿体质量的影响。方法：选取240例孕妇,应用酶联免疫吸附（ELISA）法测定孕妇血清CoQ10水平。根据新生儿体质量分为低体质量组、正常体质量组和巨大儿组,记录新生儿母亲血清CoQ10水平。根据产检妇女血清CoQ10第75百分位数分为CoQ10 ≥ 0.85μmol·L^-1组和CoQ10<0.85μmol·L^-1组,记录2组新生儿体质量。采用Spearman相关分析法分析孕妇血清CoQ10与新生儿体质量的相关性。结果：正常体质量组（0.91μmol·L^-1±0.41μmol·L^-1）和低体质量组（0.88μmol·L^-1±0.38μmol·L^-1）孕妇血清CoQ10水平高于巨大儿组（0.64μmol·^-1±0.23μmol·L^-1）,差异有统计学意义（t=7.04,P<0.05;t=7.25,P<0.05）;孕妇血清CoQ10水平与新生儿体质量呈负相关关系（r=-0.17,P=0.00）。CoQ10 ≥ 0.85μmol·L^-1组新生儿出生体质量（3209.08g±320.15g）低于CoQ10<0.85μmol·L^-1组（3823.81g±189.04g）,差异有统计学意义（P<0.05）。孕早期、孕晚期CoQ10水平和平均孕期CoQ10水平是影响新生儿体质量的因素（P<0.05或P<0.01）;孕早期、孕晚期CoQ10水平和平均孕期CoQ10水平是影响新生儿体质量的保护性因素（P<0.05）。结论：妊娠妇女血清CoQ10水平对其新生儿体质量有一定的影响。     

原花青素B1对LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7损伤的保护作用及其机制

目的：观察原花青素B1（PB1）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7损伤的保护作用，探讨其可能的作用机制。方法：体外培养的处于对数生长期的小鼠巨噬细胞RAW264.7分为对照组（细胞不进行处理）、LPS组（细胞给予2 mg·L^-1LPS）、PB1组（细胞给予10 μmol·L^-1 PB1）和PB1+LPS组（细胞给予2 mg·L^-1LPS+10 μmol·L^-1 PB1）。显微镜下观察各组细胞形态表现，流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平、细胞凋亡率和细胞表面膜分子CD16/32、CD40、CD86及Toll样受体4（TLR4）表达水平。结果：与对照组比较，LPS组细胞皱缩变圆，但PB1组和PB1+LPS组细胞形态表现变化不明显。与对照组比较，LPS组细胞中ROS水平明显升高（P<0.05）；与LPS组比较，PB1+LPS组细胞中ROS水平降低（P<0.05）。与对照组比较，LPS组细胞凋亡率升高（P<0.05）；与LPS组比较，PB1+LPS组细胞凋亡率降低（P<0.05）。与对照组比较，LPS组细胞表面膜分子CD16/32、CD40、CD86和TLR4表达水平升高（P<0.05）；与LPS组比较，PB1+LPS组细胞表面膜分子CD16/32、CD40、CD86和TLR4表达水平降低（P<0.05）。结论：LPS通过诱导细胞中ROS水平升高引起细胞损伤，PB1通过降低ROS水平，下调细胞表面膜分子CD16/32、CD40、CD86和TLR4表达对细胞发挥保护作用。     

IL-4协同雌二醇对小鼠乳腺癌细胞生长的促进作用及其机制

目的：探讨白细胞介素4（IL-4）协同雌二醇对小鼠乳腺癌4T1细胞对其生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法：体外培养4T1细胞,加入不同浓度（0、12.5、25.0、50.0和100.0 μg·L^-1） IL-4或雌二醇（0、6.25、12.50、25.00、50.00 nmol·L^-1）,作用72 h后MTT法检测乳腺癌4T1细胞增殖率。将乳腺癌4T1细胞分为对照组（不进行任何处理）、IL-4组（加入50.0 μg·L^-1 IL-4）、雌二醇组（加入12.50 nmol·L^-1雌二醇）和联合组（加入50.0 μg·L^-1 IL-4+12.50 nmol·L^-1雌二醇）,MTT法检测各组乳腺癌4T1细胞增殖率,流式细胞术检测各组不同细胞周期乳腺癌4T1细胞百分比,Western blotting法检测各组乳腺癌4T1细胞中STAT6、p-STAT6、ERα、Erk、p-Erk、P70S6K、p-P70S6K、S6和p-S6蛋白表达水平。结果：与0 μg·L^-1 IL-4组比较,25.0、50.0和100.0 μg·L^-1IL-4组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）。与0 nmol·L^-1雌二醇组比较,12.50、25.00、50.00 nmol·L^-1雌二醇组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）。与对照组比较,IL-4组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）;与对照组比较,雌二醇组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）;与IL-4组或雌二醇组比较,联合组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）。与对照组比较,IL-4组乳腺癌4T1细胞中S期和G₂/M期细胞百分比升高（P<0.05）,G₀及G₁期细胞百分比降低（P<0.05）;雌二醇组乳腺癌4T1细胞中S期细胞百分比明显升高（P<0.05）,G₀及G₁期细胞百分比降低（P<0.05）。与IL-4组或雌二醇组比较,联合组乳腺癌4T1细胞中S期和G₂/M期细胞百分比升高（P<0.05）,G₀及G₁期细胞百分比降低（P<0.05）。与对照组比较,IL-4组乳腺癌4T1细胞中ERα、p-Erk、p-P70S6K和p-S6蛋白表达水平升高,雌二醇组乳腺癌4T1细胞中p-STAT6、ERα、p-Erk、p-P70S6K、S6和p-S6蛋白表达水平升高（P<0.05）;联合组乳腺癌4T1细胞中STAT6、p-STAT6、ERα、p-Erk、p-P70S6K和p-S6蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：IL-4协同雌二醇可促进小鼠4T1乳腺癌细胞膜IL-4受体（IL-4R）和雌激素受体（ER）表达,增强乳腺癌4T1细胞中Erk1和p70S6K激酶的激活及下游分子S6蛋白的磷酸化。     

人参果多糖对人舌鳞癌CAL27细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨人参果多糖对人舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）CAL27细胞的抑制作用,阐明其潜在的作用机制。方法：采用水提醇沉法提取水溶性人参果多糖（WGBP）,高效液相色谱法（HPLC）对其单糖组成成分进行分析。将人舌鳞癌CAL27细胞分为对照组和不同浓度（1、2和5 g·L^-1）WGBP组。继续培养24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖率,流式细胞术检测各组细胞周期和细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达量。结果：WGBP主要由半乳糖和半乳糖醛酸组成,而阿拉伯糖和葡萄糖次之,再次为鼠李糖和甘露糖。与对照组比较,1、2和5 g·L^-1WGBP组CAL27细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）,且呈浓度依赖性。流式细胞术检测,与对照组比较,2和5 g·L^-1WGBP组S期CAL27细胞百分比明显降低（P<0.05或P<0.01）,G₂/M期细胞百分比明显升高（P<0.05或P<0.01）,且呈浓度依赖性。与对照组比较,1、2和5 g·L^-1WGBP组CAL27细胞凋亡率明显升高（P<0.05）,且呈浓度依赖性。Western blotting法检测,与对照组比较,1、2和5 g·L^-1WGBP组CAL27细胞中pro-Caspase-3和pro-PARP蛋白表达量明显升高。结论：WGBP能通过诱导G₂/M期阻滞和激活Caspase-3引起级联反应,诱导细胞凋亡,从而抑制人舌鳞癌CAL27细胞增殖。     

杨梅素通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡

目的：观察杨梅素与mdivi-1分别或联合作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞凋亡和线粒体分裂情况,探讨杨梅素诱导SKOV3细胞凋亡的机制。方法：体外培养SKOV3细胞,随机分为对照组、mdivi-1组、杨梅素组和联合给药组,mdivi-1组以50 μmol·L^-1 mdivi-1作用1 h后更换普通细胞培养液继续培养23 h,杨梅素组以50 g·L^-1杨梅素作用24 h,联合给药组以50 μmol·L^-1 mdivi-1作用1 h后更换含50 g·L^-1杨梅素的细胞培养液继续培养23 h。MTT法检测各组细胞存活率;Muse^®凋亡检测试剂盒检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blotting）观察细胞色素C（Cyt C）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）、动力相关蛋白1（DRP1）和分裂蛋白1（FIS1）表达水平;MitoTracker^® Red荧光探针特异性标记线粒体观察各组细胞线粒体分裂情况。结果：与对照组比较,杨梅素组细胞存活率明显降低（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合给药组细胞存活率明显升高（P<0.05）。与对照组比较,杨梅素组细胞凋亡率升高（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合用药组细胞凋亡率明显降低（P<0.05）。与对照组比较,杨梅素组细胞中Cyt C和caspase3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合用药组Cyt C和caspase3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,杨梅素组细胞线粒体分裂程度增强;与杨梅素组比较,联合用药组线粒体分裂程度下降。与对照组比较,杨梅素组细胞中DRP1和FIS1蛋白表达水平升高（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合用药组DRP1和FIS1蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论：杨梅素可通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡。     

瑞巴匹特抑制脂多糖诱导肺上皮细胞株A549表达TLR4和释放TNF-α

目的：研究瑞巴匹特对肺上皮细胞株A549 细胞TLR4表达及分泌肿瘤坏死因子（TNF-α）的影响。方法：用脂多糖(LPS)建立体外A549 细胞体外炎症损伤模型,实验分为对照组（无干预无刺激）、模型组（LPS刺激）、干预组1（LPS和10 mg/L瑞巴匹特）、干预组2（LPS和30 mg/L瑞巴匹特）、用ELISA观察A549细胞分泌TNF-α和RT-PCR及蛋白免疫印迹观察A549 细胞TLR4的表达。 结果：LPS诱导A549 细胞分泌TNF-α（与对照组比较,P＜0.01）, 在第6 h达高峰;LPS诱导A549 细胞表达TLR4（与对照组比较,P＜0.01）;瑞巴匹特可抑制LPS诱导A549 细胞分泌TNF-α和表达TLR4（与模型组比较,P＜0.05）,但2组干预组间无统计学差异（P＞0.05）。 结论：瑞巴匹特的抗炎机制可能是通过抑制TLR4的表达,从而减少炎性细胞因子的释放;瑞巴匹特有可能作为一种有价值的抗感染治疗的辅助药物。     

豁痰祛瘀方联合大剂量rt-PA溶栓治疗急性肺栓塞临床研究

目的:观察豁痰祛瘀方联合大剂量重组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rt-PA)溶栓治疗急性肺栓塞的临床疗效,并观察对中医证候积分、血气分析指标、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、D-二聚体水平的影响。方法:142例急性肺栓塞患者按抽签方式分为对照组(n=71)与观察组(n=71)。对照组患者给予大剂量rt-PA溶栓治疗,观察组在对照组基础上给予豁痰祛瘀方。比较治疗前后两组血气分析(PaCO_2、PaO_2)、临床证候积分、TNF-α、D-二聚体的水平,并评价两组患者临床疗效。结果:观察组有效率为94.37%(67/71),明显高于对照组的81.69%(58/71),差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,观察组中医证候积分为(9.36±1.55)分,对照组中医证候积分为(15.64±1.47)分,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,对照组PaCO_2、PaO_2分别为(33.52±1.26)mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa)、(75.63±1.67)mm Hg,观察组PaCO_2、PaO_2分别为(37.21±1.33)mm Hg、(80.24±1.87)mm Hg,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗后,对照组TNF-α、D-二聚体分别为(4.35±1.42)μg·L~(-1)、(486.52±121.42)μg·L~(-1),观察组分别为(2.52±0.87)μg·L~(-1)、(425.63±102.35)μg·L~(-1),两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:豁痰祛瘀方联合大剂量rt-PA溶栓治疗急性肺栓塞,可显著提高临床疗效,缓解临床症状,提高血气分析指标,降低TNF-α、D-二聚体的水平。     

清利活血养阴方治疗慢性肾小球肾炎临床研究

目的:观察中西医结合治疗慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)的临床疗效。方法:将48例确诊为CGN患者随机分为对照组(24例)、观察组(24例)。对照组给予传统肾病治疗方案,观察组在对照组治疗基础上加服清利活血养阴方。比较两组患者临床疗效、中医证候积分、肾功能[24小时尿蛋白定量(24 hour urine total protein,24h UTP)、内生肌酐清除率(endogenous creatinine clearance rate,Ccr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)]、肝功能、血常规、血脂指标及炎症因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL~(-1)β)和C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)]。结果:观察组证候积分、有效率分别为(10.50±3.94)分、91.67%,对照组分别为(14.70±4.21)分、66.67%,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后24h UTP、Scr、BUN分别为(0.68±0.31)g、(86.17±20.93)μmol·L~(-1)、(5.07±1.44)mmol·L~(-1),对照组分别为(0.93±0.32)g、(85.50±22.68)μmol·L~(-1)、(5.62±1.54)mmol·L~(-1),两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后TNF-α、IL-6、IL~(-1)β、CRP分别为(25.47±5.29)ng·L~(-1)、(7.50±1.05)ng·L~(-1)、(2.05±0.97)pg·L~(-1)、(7.13±1.10)ng·L~(-1),对照组以上指标分别为(20.14±5.18)ng·L~(-1)、(6.22±0.98)ng·L~(-1)、(1.17±0.84)pg·L~(-1)、(6.00±0.94)ng·L~(-1),两组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:清利活血养阴方加西药基础治疗慢性肾小球肾炎,能够减少尿蛋白,改善肾功能,疗效显著且安全可靠。     

益阴降糖1号方治疗气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病临床研究

目的:观察自拟益阴降糖1号方辨治气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病的临床疗效。方法:106例气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病患者按照随机数字表法分为对照组和观察组各53例。对照组患者给予厄贝沙坦片口服,观察组患者给予自拟益阴降糖1号方,15 d为1个疗程,两组均连续治疗4个疗程。比较两组患者临床疗效,检测治疗前后糖脂代谢、血液流变、肾功能指标,监测治疗前后患者血清γ-谷氨酰转肽酶(gamma glutamyl transpeptidase,GGT)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induced factor-1α,HIF-1α)水平。结果:观察组有效率为94.3%,对照组有效率为79.2%,两组比较,差异有统计学意义(χ2=5.267,P0.05)。治疗后,观察组患者糖脂代谢、血液流变、肾功能指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗后,观察组患者GGT、VEGF、HIF-1α水平分别为(24.60±17.42)IU·L~(-1)、(126.45±23.74)ng·L~(-1)、(135.35±13.17)pg·L~(-1),对照组分别为(31.26±19.33)IU·L~(-1)、(182.34±25.15)ng·L~(-1)、(187.62±16.32)pg·L~(-1),两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,观察组肾功能各指标均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,观察组血液流变学各指标均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:自拟益阴降糖1号方辨治气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病疗效满意,可显著降低患者血糖水平,调节脂质代谢,改善肾功能,其机制可能为调节血液流变学指标及GGT、VEGF、HIF-1α水平以改善肾脏微循环、调节内皮功能、减轻氧化应激损伤、降低炎性反应。     

脂多糖刺激N9小胶质细胞释放炎性因子的时间和剂量效应

目的研究脂多糖刺激N9小胶质细胞释放炎性因子的时间和剂量效应。方法不同剂量脂多糖刺激N9小胶质细胞,在不同时间点,酶联免疫吸附试验检测培养基中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,硝酸还原酶法检测培养基中一氧化氮(NO)水平,Western blot检测细胞质和细胞核中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白水平。结果刺激6、12 h后,各脂多糖组培养基中IL-1β和NO水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),刺激24 h后1 000、10 000μg.L-1脂多糖组培养基中的IL-1β和NO水平均较对照组升高(P<0.01)。刺激30 min后,各脂多糖组培养基中TNF-α水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),刺激6、24 h后,各脂多糖组培养基中TNF-α水平均较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01),且1 000μg.L-1脂多糖组TNF-α水平最高。Westernblot检测结果显示,各脂多糖组细胞质和细胞核内NF-κB蛋白水平较对照组显著增多(P<0.01),其中1 000μg.L-1脂多糖组细胞质和细胞核中NF-κB蛋白水平最高。结论 1 000μg.L-1脂多糖是激活N9小胶质细胞诱发其炎症反应的最佳剂量,脂多糖作用6 h主要促进TNF-α的释放,作用24 h后则IL-1β和NO的释放明显增加。     

三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞损伤后活性的影响

目的:检测三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响,探索三七总皂苷对内皮细胞的保护作用。方法:把体外培养的人脐静脉内皮细胞株传代培养,共分为6组,即正常组,模型组,三七总皂苷4个浓度组,用10μg·L~(-1)的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)造成细胞损伤模型,三七总皂苷组分别加入不同浓度的三七总皂苷2.5 mg·L~(-1)、5 mg·L~(-1)、10 mg·L~(-1)、20 mg·L~(-1),用CCK-8方法检测各组细胞活性。结果:CCK-8检测结果显示,人脐静脉内皮细胞在TNF-α诱导损伤后,用4个浓度的三七总皂苷干预,随着时间的延长,细胞存活率逐渐降低,组间差异具有统计学意义,其中6 h的细胞存活率最高,24 h的细胞活性最差,差异无统计学意义;和模型组相比,三七总皂苷4个浓度组细胞活性明显较高(P0.01或P0.05),其中5 mg·L~(-1)三七总皂苷组细胞活性最高,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:三七总皂苷能提高人脐静脉内皮细胞损伤后的活性。     

乳胞素联合卡铂对卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制作用和促凋亡作用

目的：探讨蛋白酶体抑制剂乳胞素（LAC）对体外卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法：体外培养卵巢癌SKOV3细胞,采用0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol·L^-1 LAC干预SKOV3细胞48 h,5μmol·L^-1 LAC干预SKOV3细胞0、24、48和72 h;将细胞分为对照组（细胞不经药物干预）、LAC组（加入5μmol·L^-1 LAC）、卡铂组（加入10、20、40及80μmol·L^-1卡铂）和LAC联合卡铂组（加入5μmol·L^-1 LAC和10、20、40、80μmol·L^-1卡铂）。采用MTT法和流式细胞术（FCM）检测各组卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制率和凋亡率。结果：MTT检测,随着LAC作用时间的延长和浓度的升高,SKOV3细胞的增殖受到明显抑制,48 h时LAC的半数抑制浓度（IC₅₀）为5.36μmol·L^-1;LAC联合卡铂组细胞的增殖抑制率较相同浓度卡铂组明显升高（P<0.05）,卡铂的IC₅₀由58.08μmol·L^-1下降至18.37μmol·L^-1。FCM检测,随着LAC作用时间的延长,SKOV3细胞凋亡率呈升高趋势;与卡铂组和LAC组比较,LAC联合卡铂组SKOV3细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。结论：LAC可有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的体外增殖且能诱导其凋亡,并可以明显增强卡铂对卵巢癌SKOV3细胞株的增殖抑制作用。     

IL-18在脓毒症及脓毒症休克中预测死亡的作用

目的:探讨脓毒症及脓毒症休克患者血浆炎症因子水平与患者死亡率的相关性。方法: 选取入住 ICU并确诊为脓毒症的患者51例（试验组）,包括25例脓毒症患者及26例脓毒症休克患者;对照组为随机选取的入住ICU的非脓毒症且病情危重的患者20例。采用酶联免疫吸附试验分别检测试验组及对照组病人的血浆炎症因子IL-6、IL-8、IL-10、IL-18、IL-1β及TNF-α的浓度水平,同时根据APACHEⅡ、SOFA评分评估病情的严重程度。结果:与对照组相比,脓毒症患者组及脓毒症休克患者组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-18浓度水平均有显著升高（P＜0.05）。比较脓毒症患者组及脓毒症休克患者组内生存者与死亡者血浆炎症因子水平发现,死亡者的IL-6、IL-8及IL-18浓度水平明显升高（P＜0.05）,其他炎症因子无明显升高（P＞0.05）。采用多变量Logistic回归分析显示IL-18是患者预后的独立影响因素。结论:IL-18对于脓毒症及脓毒症休克患者死亡的预测有十分重要的作用。     

芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症的影响

目的 观察芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响.方法 采用香烟烟熏加气管内注入脂多糖的复合因素造模法建立COPD大鼠模型,于造模第15天,空白组、模型组给予等体积中剂量颗粒辅料溶液灌胃4周,其他各药物干预组给予芪蛭皱肺颗粒小剂量、中剂量、大剂量和阳性药物（固本咳喘片）溶液灌胃4周,末次用药后取肺组织HE染色,取血清和BALF采用放免法检测IL-8和TNF-α的含量.结果 采用香烟烟熏加气管内注入脂多糖的方法成功复制了COPD大鼠模型,病理观察显示大鼠支气管及肺血管壁炎细胞浸润,分泌物明显增多,肺泡扩张.与空白组比较,模型组血清IL-8与TNF-α含量均升高（P＜0.01或＜0.05）;BALF IL-8与TNF-α含量亦均升高（P＜0.05或＜0.01）;与模型组比较,芪蛭皱肺颗粒各剂量组及固本咳喘片组血清及BALF中IL-8和TNF-α含量均降低（P＜0.05）,以芪蛭皱肺颗粒大剂量组降低更明显（P＜0.01）.结论 芪蛭皱肺颗粒有可能是通过减少炎症因子的生成和释放,从而有效调节肺炎症损伤时IL-8和TNF-α水平的升高,对大鼠模型气道炎症具有一定的干预作用.     

NF-κB抑制剂对脂多糖刺激的退变人椎间盘髓核细胞炎症因子表达的影响

目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激退变人椎间盘髓核细胞前后,核因子kappB(NF-κB)与炎症因子表达及相互关系.方法 体外培养退变的人椎间盘髓核细胞,设立对照组、LPS (500 μg/mL)刺激组、NF-κB抑制剂(BAY11-7082)+LPS(500 μg/mL)刺激组.ELISA方法检测各组细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β的含量,免疫荧光法检测各组髓核细胞内p65的表达及定位,Western blot检测TNF-α、IL-1β、NF-κB结合蛋白p65以及磷酸化p-p65的表达,Real-time PCR检测TNF-α及IL-1β的表达.结果 LPS刺激髓核细胞后,p65入核增多,p-p65表达明显增加,ELISA实验结果表明LPS刺激组细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平升高(P＜0.05),Western blot及Real-time PCR检测结果也表明其髓核细胞内炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平明显上升(P＜0.05);而与LPS刺激组相比,NF-κB抑制剂+LPS刺激组p65入核减少,p-p65表达明显降低,细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平降低(P＜0.05),Western blot及Real-time PCR检测结果也表明其髓核细胞内炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平明显下降(P＜0.05).结论 LPS能够通过激活人退变髓核细胞NF-κB信号通路,促进炎性因子TNF-α及IL-1β表达增多,抑制NF-κB信号通路后可明显减轻炎性因子的表达.