巨刺“足三里”和“阿是穴”对急性骨骼肌钝挫伤大鼠的修复作用

目的:观察巨刺"足三里"和"阿是穴"对急性骨骼肌钝挫伤大鼠的修复作用,探讨巨刺治疗骨骼肌损伤的机制。方法:雄性SD大鼠分为正常组6只、模型组24只、巨刺组24只,模型组与巨刺组再随机分为3、5、7、14d4个亚组,每个亚组6只。采用自制打击装置建立骨骼肌钝挫伤大鼠模型。巨刺组选取健侧"足三里"以及与患侧"阿是穴"相对应的健侧部位进行电针治疗,15min/次,1次/d,分别治疗3、5、7、14d。HE染色观察损伤后7、14d各组大鼠腓肠肌的形态结构及新生肌细胞横截面积;免疫荧光检测损伤后7d各组腓肠肌结蛋白(desmin)阳性表达;免疫印迹法检测损伤后3、5d腓肠肌肌细胞生成素(myoG)和7、14d腓肠肌快肌型骨骼肌肌球蛋白重链(Fast MyHC)的相对表达量。结果:正常组大鼠腓肠肌横截面的肌细胞大小均匀,排列规则,核位于细胞边缘。损伤后7d,模型组新生肌细胞较少、排列紊乱、大小不一,间质中可见胶原纤维;巨刺组新生肌细胞增多、排列较整齐、大小均一,新生肌细胞面积显著大于模型组(P0.05)。损伤后14d,模型组仍可见排列紊乱且大小不一的新生肌细胞,间质中仍可见胶原纤维;巨刺组可见大量排列整齐且大小均一的趋于成熟的新生肌细胞,新生肌细胞面积显著大于模型组(P0.001)。免疫荧光结果显示:在正常组中,desmin表达于肌细胞膜上。损伤后7d,模型组desmin多数表达于新生肌细胞胞质内,阳性表达的细胞小且排列紊乱、大小不一,模型组desmin表达显著高于正常组(P0.001);巨刺组desmin多数表达于新生肌细胞膜上,接近正常组肌细胞状态,且新生肌细胞大小均一、排列整齐,巨刺组desmin表达量与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。免疫印迹结果显示:损伤后3、5d,与正常组比较,模型组腓肠肌myoG的表达量明显升高(P0.001);与模型组比较,巨刺组腓肠肌myoG表达量明显升高(P0.001)。损伤后7、14d,与正常组比较,模型组腓肠肌Fast MyHC的表达量明显降低(P0.001);与模型组比较,巨刺组腓肠肌Fast MyHC的表达量明显升高(P0.01)。结论:巨刺"足三里"和"阿是穴"可能通过正向调控急性骨骼肌钝挫伤大鼠腓肠肌myoG和Fast MyHC的表达,促进损伤骨骼肌的修复。     

电针对腓肠肌急性钝挫伤大鼠肌肉弹性及生肌调节因子表达的影响

目的:观察电针"阿是穴"与"昆仑"对大鼠腓肠肌急性钝挫伤后腓肠肌肌肉弹性以及生肌调节因子表达的影响,探讨局部取穴与循经取穴在软组织创伤中的作用。方法:将SD大鼠随机分为空白组(5只),模型组(15只),阿是穴组(15只)和昆仑穴组(15只)。采用自制打击器建立腓肠肌钝挫伤大鼠模型。在损伤24 h后,阿是穴组取"阿是穴"进行1次电针治疗,昆仑穴组取"昆仑"进行1次电针治疗。通过剪切波弹性成像技术检测损伤前、损伤后3 h腓肠肌杨氏模量的最大值(Emax);在损伤后3、5、7 d观察腓肠肌的Emax,HE染色法观察腓肠肌病理形态,免疫组织化学法检测腓肠肌成肌分化因子(MyoD)、肌细胞生成素(MyoG)的表达。结果:模型组大鼠腓肠肌Emax在损伤后3 h、3 d、5 d、7 d均高于损伤前的正常值(P0.05);损伤后3 d,阿是穴组Emax明显高于模型组和昆仑穴组(P0.05);损伤后7 d,阿是穴组Emax明显低于模型组(P0.05)。空白组大鼠有少量表达MyoD、MyoG的阳性细胞,模型组MyoD、MyoG阳性细胞数在损伤后7 d仍高于空白组(P0.05),在损伤后3、5 d,阿是穴组MyoD、MyoG阳性细胞数明显高于模型组(P0.05),在损伤后7 d,阿是穴组MyoG阳性细胞数明显高于模型组(P0.05),在损伤后5 d,昆仑穴组MyoG阳性细胞数明显高于模型组(P0.05);在损伤后3、5 d,阿是穴组MyoD阳性细胞数明显高于昆仑穴组(P0.05)。结论:电针"阿是穴""昆仑"穴均能上调大鼠腓肠肌钝挫伤后MyoD、MyoG的表达。其中,"阿是穴"的作用更显著,并且更有利于损伤后肌肉组织弹性的恢复。     

针刺对骨骼肌钝挫伤模型大鼠肝细胞生长因子表达的影响

目的:观察针刺对大鼠骨骼肌钝挫伤后修复过程中肝细胞生长因子(HGF)蛋白表达的影响,探讨针刺治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺治疗组、针刺对照组,后3组每组再分为即刻、24h、48h3个亚组,每组各8只。采用重物自由落体打击法造成急性骨骼肌钝挫伤模型,模型组和针刺治疗组进行造模。针刺治疗组和针刺对照组采用毫针透刺损伤腓肠肌全肌束的方法干预,并于针刺后的即刻、24h、48h分别进行腓肠肌损伤部位取材。模型组于相应时间点取材,空白组同48h组时间点取材。HE染色光镜观察大鼠腓肠肌形态学改变,Western blot方法检测各组HGF蛋白表达量。结果:HE染色光镜下,模型组及针刺治疗组各时间点可见不同程度的肌纤维损害,针刺治疗组肌纤维损害程度较模型组轻,以针刺后24h和48h显著;针刺对照组各时间点仅出现轻度损伤,48h后已基本恢复正常。与空白组相比,模型组各时间点腓肠肌HGF蛋白表达均显著升高(P0.05,P0.01),针刺对照48h组HGF蛋白表达显著升高(P0.05);与模型组各时间点相比,针刺治疗24h、48h组HGF蛋白表达显著下降(P0.01,P0.05);模型组、针刺治疗组和针刺对照组HGF蛋白表达随时间的推移呈现上升趋势。结论:骨骼肌钝挫伤可使大鼠骨骼肌HGF蛋白表达升高;针刺干预可下调急性期骨骼肌损伤局部HGF蛋白表达。     

电针对骨骼肌钝挫伤大鼠神经肌肉接头重建相关蛋白MuSK和APP表达的影响

目的:通过观察电针对急性骨骼肌钝挫伤大鼠恢复过程中肌特异性受体酪氨酸激酶(MuSK)和淀粉样前体蛋白(APP)表达的影响,初步探讨电针促进骨骼肌神经肌肉接头重建的相关机制。方法:将54只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、电针组(C组),每组18只。采用自制重物打击装置建立大鼠右侧骨骼肌急性钝挫伤模型,A组不造模。B组造模后自然恢复,C组选取左侧"足三里"和右侧"阿是穴"在造模后24 h行电针治疗,15 min/次,2 d 1次。于造模后7、28、56 d分别取材6只动物,采用HE染色观察大鼠腓肠肌组织形态结构的变化,Western Blot检测MuSK及APP的蛋白表达情况。结果:HE结果显示正常大鼠腓肠肌肌纤维排列整齐,呈粉色,肌细胞大小均匀整齐。造模后7 d,B组大鼠腓肠肌肌纤维溶解断裂、排列紊乱且有大量炎性细胞浸润; C组出现少量新生肌细胞和肌纤维形成且排列略为整齐;造模后28 d,B组大鼠新生肌细胞增多,炎性细胞减少,有部分肌纤维形成但排列仍不整齐; C组大鼠肌纤维进一步增多且排列较为整齐;造模后56 d,B组大鼠肌纤维排列逐渐整齐,炎性细胞明显减少; C组大鼠腓肠肌损伤基本愈合,形态结构基本完整。Western blot结果显示,在正常大鼠骨骼肌中Mu SK、APP蛋白的表达水平均较少;造模成功后,与A组相比各取材时间点B组大鼠骨骼肌内Mu SK、APP蛋白的表达增多且差异具有统计学意义(P 0. 05);与B组相比,C组MuSK和APP蛋白在损伤后第7天时表达升高,第28天时达到峰值,56 d时表达有所回落,且各取材时间点C组表达高于B组(P 0. 05)。结论:电针可以促进急性骨骼肌钝挫伤大鼠骨骼肌的恢复,正向调控骨骼肌修复过程中MuSK、APP的表达,从而有利于NMJ的再生。     

腓肠肌斜刺联合环孢素A对软组织钝挫伤模型兔IGF-1表达的影响

目的观察腓肠肌斜刺联合环孢素A(CsA)对软组织钝挫伤修复的影响及其作用机制。方法 30只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、CsA组、针刺组、针刺合并CsA组,每组6只。采用"重物自由落体打击法"连续20次撞击造成急性软组织钝挫伤模型。针刺组造模后24h后采用阿是穴斜刺干预,CsA组于造模前3天开始腹腔注射CsA 9.25 mg/(kg·d),针刺合并CsA组采用针刺合并CsA干预,模型组和空白组不干预。于损伤后72h采用Real-time PCR、蛋白免疫印迹法(Western blot)方法检测各组腓肠肌胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA及其蛋白表达量。结果与空白组相比,其余各组IGF-1 mRNA表达均显著降低(P0.05或P0.01),模型组、CsA组与针刺组IGF-1蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01)。与模型组相比,针刺组和针刺合并CsA组IGF-1 mRNA与蛋白表达显著升高(P0.05);与CsA组相比,针刺组与针刺合并CsA组IGF-1 mRNA及其蛋白表达均显著升高(P0.05)。结论软组织钝挫伤可使兔骨骼肌IGF-1 mRNA及其蛋白表达降低,腓肠肌斜刺联合CsA可上调急性期骨骼肌损伤局部IGF-1mRNA及其蛋白表达,促进软组织修复。     

电针联合跑台训练对大鼠骨骼肌钝挫伤的修复作用

目的:观察电针联合跑台训练对大鼠骨骼肌钝挫伤的修复作用,探讨电针联合跑台训练改善骨骼肌损伤的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、跑台组和联合组,每组12只。采用自制打击装置建立骨骼肌钝挫伤模型。电针组电针"足三里"、阿是穴,跑台组进行跑台训练,联合组同时进行电针和跑台训练,1次/d,连续至损伤后3、14d。HE染色观察损伤后14d腓肠肌新生肌细胞横截面积和直径,Western blot法检测损伤后3d腓肠肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、肌细胞生成素(myoG)和14d腓肠肌mTOR、快肌型骨骼肌肌球蛋白重链(Fast MyHC)的表达量。结果:模型组新生肌细胞横截面积和直径明显小于正常组(P0.01),各治疗组均显著大于模型组(P0.05),联合组显著大于电针组和跑台组(P0.05)。与正常组比较,损伤后3d模型组腓肠肌mTOR和myoG蛋白表达均显著升高(P0.01);与模型组比较,各治疗组腓肠肌mTOR和myoG蛋白表达均显著升高(P0.01);与电针组比较,跑台组腓肠肌mTOR和myoG蛋白表达均显著降低(P0.01);与电针组和跑台组比较,联合组腓肠肌mTOR和myoG蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01)。与正常组比较,损伤后14d模型组腓肠肌mTOR蛋白表达升高,但差异无统计学意义(P0.05),Fast MyHC蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比较,各治疗组腓肠肌mTOR及Fast MyHC蛋白表达均显著升高(P0.05,P0.01);与电针组比较,跑台组腓肠肌mTOR及Fast MyHC蛋白表达均显著降低(P0.05,P0.01);与电针组和跑台组比较,联合组腓肠肌mTOR及Fast MyHC蛋白表达均显著升高(P0.01)。结论:电针联合跑台训练能促进成肌细胞分化成熟,减轻骨骼肌损伤,该作用与增加mTOR表达量,正向调控myoG、Fast MyHC的表达有关。     

电针对腓肠肌急性钝挫伤大鼠步态及肌卫星细胞增殖分化的影响

目的：观察电针对腓肠肌急性钝挫伤大鼠痛阈、步态及肌卫星细胞增殖分化的影响，探讨电针促进骨骼肌急性损伤修复的可能机制。方法：将48只SD大鼠随机分为空白组(6只)、模型组(24只)和电针组(18只)。模型组、电针组大鼠采用自制打击器建立右侧腓肠肌急性钝挫伤模型。电针组大鼠于右侧“承山”“阳陵泉”行电针干预，予疏密波，频率2 Hz/100 Hz，每次30 min，每日1次。按取材时间分别干预3、7、14 d。造模后第1、3、7、14天，采用Von Frey法检测各组大鼠后足机械缩足反射痛阈，计算左右足痛阈差值；Cat Walk XT^TM动物步态分析仪记录大鼠站立时间及右后足最大接触面积；HE染色法观察大鼠右侧腓肠肌形态及炎性细胞数；免疫荧光法检测大鼠右侧腓肠肌配对盒基因7 (Pax7)及成肌分化因子(MyoD)阳性表达。结果：造模后右侧腓肠肌肌纤维断裂，可见大量红细胞及炎性细胞浸润；电针干预后肌纤维组织形态完整，炎性细胞浸润明显减少。与空白组比较，模型组大鼠造模后第1、3、7、14天后足机械缩足反射痛阈差值升高(P<0.05)，站立时间缩短、右后足最大接触面积减...     

消肿止痛膏对腓肠肌损伤大鼠MyoD mRNA与蛋白表达的影响

目的基于微小RNA表达机制,探讨消肿止痛膏对大鼠骨骼肌损伤后重塑和修复的影响。方法通过钝挫伤模型的方法建立大鼠腓肠肌损伤模型,观察消肿止痛膏对大鼠损伤后4、7、14、21天定量PCR检测腓肠肌MyoD mRNA与蛋白表达水平,探讨消肿止痛膏对大鼠腓肠肌钝挫伤模型的肌肉重塑与修复的作用机制。结果治疗组MyoD mRNA表达与蛋白表达水平在造模后14天、21天均显著高于空白组与模型组(P<0.05),进一步证实消肿止痛膏在骨骼肌重塑及修复过程中所起的重要作用。MyoD在损伤后7天上升,其后表达一直维持在较高水平,至损伤后21天仍可以表达出较高水平。与模型组相比较,其表达的高峰期在14天左右,其后则基本回归到一般状态。结论大鼠腓肠肌损伤后,在自然修复过程中,生肌调节因子的表达水平呈现上升-回落的趋势,其中损伤后7～14天,为其表达的高峰期。MyoD的表达水平呈现上升趋势,即使至损伤后21天,其表达仍未见明显下降趋势,可见消肿止痛软膏可以促进MyoD的表达。消肿止痛软膏可以促进MyoD的表达,可以调节骨骼肌的再生修复,提示消肿止痛膏可以通过基因调控,发挥对骨骼肌损伤后的再生修复作用。     

电针联合康复训练对急性骨骼肌损伤大鼠nestin、Cdk5和ε-nAChR蛋白表达的影响

目的:研究电针联合康复训练对急性骨骼肌损伤模型大鼠神经肌肉接头相关蛋白nestin、Cdk5和ε-nAChR表达的影响,探讨其对骨骼肌损伤修复的可能机制。方法:清洁级SD雄性大鼠随机选取6只为正常组,余下制备右下肢的腓肠肌急性钝挫伤模型成功后,随机分为模型组与干预组,每组12只。干预组大鼠先进行跑台训练,然后选取阿是穴、承山和承筋穴位进行电针干预,每日1次,连续干预6天后休息1天。模型组和干预组分别于造模后7天、14天两个时间点分别随机选取6只大鼠进行检测。HE染色观察损伤局部骨骼肌组织病理变化;采用WB法检测nestin、Cdk5和ε-nAChR蛋白表达。结果:HE染色显示,模型组大鼠骨骼肌纤维断裂、变性、坏死,14天干预组大鼠骨骼肌细胞损伤恢复较好,瘀血和水肿明显减轻。与正常组相比,模型组大鼠各时间点nestin、Cdk5蛋白表达逐渐增加,ε-nAChR蛋白表达逐渐降低(P<0.05);与模型组比较,干预组各时间点nestin、ε-nAChR蛋白表达均增加,Cdk5蛋白表达降低(P<0.05)。结论:电针联合康复训练能通过抑制骨骼肌Cdk5蛋白表达,上调nestin、ε-nAChR蛋白表达,促进神经肌肉接头修复,从而改善大鼠骨骼肌急性损伤。     

按摩对骨骼肌损伤修复过程中bFGF表达的影响

目的：本研究旨在观察大鼠急性拉伤后腓肠肌bFGF表达的时间规律,以及按摩对骨骼肌损伤修复过程中bFGF表达的影响;探讨按摩治疗骨骼肌损伤的作用机理。方法：采用自制拉伤装置造成大鼠双后肢腓肠肌急性拉伤模型,损伤后第2d进行按摩治疗,并采用免疫组化法和图像分析系统观察大鼠腓肠肌自然修复过程中及按摩后bFGF表达的变化。结果：7d时大鼠腓肠肌bFGF平均光密度值达本实验最大值;按摩治疗3d组大鼠腓肠肌bFGF表达水平较同期自然修复组明显降低,有极显著性差异;按摩治疗5d组与同期自然修复组比较显著降低,有极显著性差异。结论：急性拉伤后7d内大鼠腓肠肌bFGF阳性表达呈现上升趋势;推测按摩通过促进bFGF在损伤修复过程中对靶细胞的作用,有效缩短了修复过程,此可能为按摩促进骨骼肌损伤修复的机制之一。     

头穴透刺法对急性期脑出血大鼠脑组织Beclin1和BNIP3L蛋白表达的影响

目的通过对急性期脑出血模型大鼠进行头穴透刺法干预,观察脑组织自噬蛋白Beclin1和BNIP3L的表达情况。方法选用雄性SD大鼠90只随机分为假手术组、模型组、3-MA组、针刺组、针刺+3-MA组,每组再分为6 h、1 d和7 d 3个亚组,每个亚组各6只。脑出血模型为自体血注入法,头穴透刺选择百会穴透曲鬓穴。造模成功后各组进行神经功能评分测定,并在各自时间点取材,采用免疫化分析法观察脑组织内Beclin1和BNIP3L的表达。结果头穴透刺法可以降低急性期脑出血模型动物的神经功能评分,并随着时间递减7 d达到最低。Beclin1和BNIP3L在大鼠脑出血后6 h表达开始增多,7 d达高峰。针刺组各时间点阳性细胞数均比模型组高(P 0.05)。针刺组与针刺+3-MA组比较差异有统计学意义(P 0.05)。结论头穴透刺法能够提高Beclin1和BNIP3L蛋白的表达,促进急性期脑出血后脑组织自噬水平,减轻脑出血后的继发性损伤,达到减轻神经功能缺损的目的。     

电针“委中”穴对腰多裂肌损伤大鼠血小板衍生生长因子CC及受体α表达的影响

目的:观察电针"委中"穴对腰多裂肌损伤大鼠血小板衍生生长因子CC(PDGF-CC)、血小板衍生生长因子受体α(PDGFR-α)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响,从骨骼肌损伤后修复的角度研究电针及不同治疗周期对其的影响。方法:SD大鼠按随机数字表法分为正常组6只、模型组24只和电针组24只。其中,模型组和电针组再分1、3、5、7 d 4个亚组,每组6只,采用布比卡因致腰多裂肌损伤。电针组电针"委中"穴,每次治疗20 min,每日治疗1次,分别干预1、3、5、7 d。取大鼠左侧多裂肌用于HE染色观察多裂肌损伤变化,右侧多裂肌用于Western blot检测PDGF-CC、PDGFR-α、MMP-1的含量。结果:造模后,与正常组相比,模型组肌纤维出现大面积变形,肌间隙增大;同一时点,电针组肌纤维恢复程度优于模型组;电针5、7 d组肌纤维恢复程度优于电针1、3 d组。与同时点正常组相比,模型1、3、7 d组PDGF-CC表达降低(P0.05),模型5 d组升高(P0.05);模型5、7 d组PDGFR-α表达升高(P0.05);模型3 d组MMP-1表达降低(P0.05),模型5、7 d组表达升高(P0.05)。与各时点模型组相比,电针3、5、7 d组PDGF-CC表达升高(P0.05);电针5 d组PDGFR-α表达升高(P0.05);电针3、5 d组MMP-1表达升高(P0.05)。电针组各亚组比较,电针5 d组PDGF-CC、PDGFR-α表达高于电针1、3、7 d组(P0.05);电针5、7 d组MMP-1表达高于电针1、3 d组(P0.05)。结论:电针"委中"穴能促进损伤多裂肌的修复,并且在治疗5 d时有较好疗效,其机制可能与提高多裂肌中PDGF-CC、PDGFR-α和MMP-1的表达相关。     

头穴围刺对缺血再灌注大鼠脑组织BDNF表达的影响

目的:观察头穴围刺对缺血再灌注大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:将150只大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组按时间点分为5个亚组,每组10只大鼠。线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,针刺组给予头穴围刺,分别于针刺后1、3、7、14、21 d取各组大鼠脑组织,采用免疫组织化学方法测定BDNF的蛋白表达,采用RT-PCR技术测定BDNF-mRNA表达。结果:针刺组各时间点大鼠脑组织BDNF蛋白阳性表达及BDNF-mRNA表达均明显高于模型组(P0.05)。结论:头穴围刺可增强缺血再灌注大鼠脑组织BDNF的表达,可促进脑缺血再灌注损伤后的脑神经修复和再生。     

巨刺对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织VEGF和Ang-1蛋白表达的影响

目的观察巨刺对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织VEGF和Ang-1蛋白表达的影响,探讨巨刺治疗脑缺血再灌注损伤可能的作用机制。方法雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为空白组、假手术组、模型组、健侧针刺(即巨刺法)组、患侧针刺组。各组再分为3 d和14 d两个亚组。采用改良线栓法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型。于再灌注24 h后,健侧针刺组针刺人中、百会及电针健侧穴位;患侧针刺组针刺人中、百会及电针患侧穴位。电针选用疏密波,每次持续刺激30 min,每日1次。分别于3 d和14 d光镜下观察大鼠缺血脑组织结构;采用免疫组化法(S-ABC法)测定大脑皮质血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)蛋白表达的变化。结果针刺治疗后大鼠缺血区脑组织损伤程度明显改善,其中健侧针刺组较患侧针刺组改善明显;健侧针刺组、患侧针刺组VEGF及Ang-1的表达均较模型组增多(P0.05);而健侧针刺组的表达较患侧针刺组显著增多(P0.05)。结论巨刺能够明显改善再灌注损伤大鼠缺血区脑组织损伤程度,其机制可能与上调脑组织VEGF和Ang-1表达有关。     

冰敷和消肿散外敷对损伤骨骼肌IGF-1 mRNA表达及组织形态的影响

目的探讨冰敷和消肿散外敷对损伤骨骼肌IGF-1 mRNA表达及组织形态的影响。方法 86只SD大鼠,取6只作为空白对照组,其余80只随机分为损伤模型组、消肿散治疗组、冰敷组、冰敷消肿散联合组,并采用打击造模的方法造成急性骨骼肌损伤模型。观察损伤1 d、3 d、7 d、14 d损伤组织IGF-1的mRNA表达及组织形态的变化情况。结果各组之间损伤1 d后,无明显差异。损伤3 d、7 d、14 d后,消肿散组和冰敷消肿散联合组IGF-1的mRNA表达均高于损伤模型组(P0.05)。损伤1 d、3 d冰敷治疗组表现与损伤模型组患侧表现基本一致;消肿散和冰敷消肿散联合组组织水肿炎性细胞浸润程度稍轻于损伤模型组患侧。损伤14 d后:损伤模型组患侧腓肠肌局部血肿机化,瘢痕组织形成,横纹肌纤维再生;消肿散组损伤局部血管再生,瘢痕组织与肌管并存;冰敷治疗组肌纤维得到一定程度的修复,但肌小管和再生的横纹肌纤维排列不规则,间或有结缔组织填充;冰敷消肿散联合组水肿与炎症细胞吸收,肌管修复良好,出现排列较整齐致密的肌纤维组织,与正常组织较为接近。损伤后1 d、3 d、7 d、14 d,冰敷消肿散联合组及消肿散组损伤积分低于损伤模型组患侧(P0.05)及冰敷治疗组(P0.05)。结论消肿散能增加损伤组织IGF-1的mRNA表达,促进骨骼肌的修复。而冰敷并不能增加损伤组织IGF-1的mRNA表达。冰敷对于骨骼肌损伤的修复改善不明显,消肿散组损伤局部血管再生,能改善肌肉组织形态修复程度,冰敷消肿散联合组的肌肉修复与正常组织较为接近。     

按揉法对骨骼肌钝挫伤大鼠肌肉纤维化的影响

目的观察按揉法对SD大鼠骨骼肌钝挫伤后肌肉纤维化的影响,进而探讨其治疗的可能作用机制。方法采用经典骨骼肌钝挫伤造模方法给20只SD大鼠建立骨骼肌纤维化动物模型,把造模成功的SD大鼠按随机数字表法分为推拿治疗组、模型对照组各10只。于造模后第3天,推拿治疗组予拇指直接在患侧腓肠肌处及邻近部位按揉,模型对照组予捆绑束缚固定,不予治疗。连续干预25 d后,分别通过HE染色、Masson染色、免疫荧光双标观察两组大鼠损伤处组织形态和肌成纤维细胞的数量及凋亡情况。结果与模型对照组相比,推拿治疗组大鼠镜下损伤处再生肌纤维排列整齐、密集,损伤处结构已基本恢复,未见明显瘢痕形成,肌纤维/胶原纤维面积百分比明显增大(P 0. 01),肌成纤维细胞数量明显减少(P 0. 01),凋亡中的肌成纤维细胞明显增多(P 0. 01)。结论推拿可以减轻骨骼肌纤维化程度,促进损伤骨骼肌高质量修复。推拿对先天性肌性斜颈、慢性肌肉疾病等骨骼肌损伤疾病的治疗取效可能在于其对骨骼肌纤维化进程的延缓作用。     

野山参和园参对术后疲劳综合征大鼠骨骼肌炎症反应的影响

目的探讨野山参和园参对术后疲劳综合征鼠骨骼肌炎症反应的作用。方法 48只大鼠随机分为对照组、模型组、园参组和野山参组,每组12只。术后1、3 d,抓力试验检测骨骼肌功能;术后3 d,荧光RT-PCR法检测促炎因子mRNA水平,Western blot法检测腓肠肌炎症和萎缩相关蛋白表达,HE染色法观察骨骼肌形态。结果术后3 d与模型组比较,园参组大鼠最大抓力显著增强(P0.05),腓肠肌IL-1β、TNF-α mRNA表达及p-p38、p-NF-κB、atrogin-1、Murf-1蛋白表达显著降低(P0.05);与模型组比较,野山参组大鼠最大抓力显著增强(P0.05),腓肠肌IL-1β、TNF-α mRNA及p-p38、p-NF-κB、atrogin-1、Murf-1蛋白表达显著降低(P0.05);与园参组比较,野山参组大鼠最大抓力增强(P0.05),腓肠肌TNF-α mRNA表达及Murf-1蛋白表达显著降低(P0.05)。HE染色结果显示,对照组肌纤维束直径较宽,肌束间隙紧密;模型组肌纤维束直径较小,肌束间隙较宽;园参组和野山参组肌纤维束形态较模型组得到改善。结论野山参和园参改善了术后疲劳综合征大鼠的骨骼肌炎症反应,且野山参效果优于园参。     

电针干预对大鼠腓肠肌适应性肥大及肌卫星细胞增殖分化的影响

目的:观察不同时长电针干预对大鼠腓肠肌适应性肥大及腓肠肌中增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达及配对盒转录因子7(Pax 7)、成肌分化抗原(MyoD 1)、肌细胞生成素(MyoG)、肌球蛋白重链-Ⅰ(Myh 7)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad 3mRNA表达的影响,探讨电针诱导骨骼肌适应性肥大的相关机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、电针2周组、电针4周组和电针8周组,每组6只。除空白对照组,其余3组大鼠予以右侧"足三里"和"环跳"电针干预10min,每日1次,每周6次,分别持续干预2、4和8周。称重后计算各组大鼠腓肠肌湿重比,HE染色后测定腓肠肌肌纤维截面积及直径,免疫荧光标记法观察腓肠肌中PCNA蛋白的表达改变,实时荧光定量PCR法检测腓肠肌中Pax 7、MyoD 1、MyoG、Myh 7、TGF-β1、Smad 3mRNA相对表达量。结果:与空白对照组相比,腓肠肌中PCNA蛋白表达在电针2周组和电针4周组明显增多;大鼠腓肠肌湿重比、肌纤维截面积和直径及腓肠肌Pax 7、MyoD 1、MyoG、Myh 7、TGF-β1mRNA相对表达量随电针干预时间延长呈现先升高后降低的趋势,与空白对照组比较,Pax 7和TGF-β1mRNA相对表达量在干预2周时到达峰值(P0.01),肌湿重比、肌纤维截面积和直径及MyoD 1、MyoG、Myh 7mRNA相对表达量在干预4周时到达峰值(P0.01);腓肠肌中Smad 3mRNA相对表达量随电针干预时间延长呈现先下降后上升的趋势,在电针4周组到达低峰(P0.01)。结论:电针干预"足三里"和"环跳"诱导大鼠腓肠肌产生时序性适应性肥大的改变可能是通过上调腓肠肌中Pax 7、PCNA、TGF-β1、MyoD 1、MyoG、Myh 7的表达,并下调Smad 3的表达,促进肌卫星细胞的增殖、成肌分化和肌管的终末分化,增加电针侧腓肠肌质量、肌纤维面积和直径而实现的。     

“百会”透“曲鬓”对急性脑出血大鼠脑组织AQP-4表达影响的实验研究

目的:通过观察"百会"透"曲鬓"头针疗法对急性脑出血大鼠脑组织中AQP-4表达的影响来揭示针刺头部腧穴对脑水肿拮抗作用的相关机理。方法:选取健康雄性Wistar大鼠160只,随机分为三组:模型组、针刺组、西药组,每组50只大鼠,每组再随机分为6h、1d、2d、3d、7d五个亚组,每个亚组10只大鼠;制备脑出血模型;另设10只正常大鼠作为空白组。针刺组针刺患侧"百会"透"曲鬓"穴。运用免疫组化方法检测各组大鼠脑组织中AQP-4阳性细胞的表达。结果:各造模组大鼠术后均出现不同程度的AQP-4阳性表达上升现象。模型组大鼠术后6h即出现AQP-4阳性细胞表达增多;3d时达高峰;7d时仍高于空白组。针刺组AQP-4表达低于模型组和西药组,在1d～3d时差异明显(P0.01)。西药组与模型组比较,2d时稍有差异(P0.05)。结论:"百会"透"曲鬓"可能在脑出血急性期通过抑制内源性AQP-4表达的途径发挥拮抗脑水肿作用。     

电针对失坐骨神经大鼠腓肠肌细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察电针疗法对失坐骨神经大鼠腓肠肌细胞凋亡及相关蛋白的影响,探讨电针对失坐骨神经骨骼肌萎缩的延缓效应及其可能机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组21只。采用切断坐骨神经法制备腓肠肌萎缩大鼠模型。电针组电针患侧"足三里""承山"穴,每日1次,每次10min,各组分别在术后7、14、21d取材。TUNEL法检测腓肠肌细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-2、Bcl-2相关的X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt-C)以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达,RT-PCR法检测腓肠肌Caspase-3mRNA表达。结果:模型组各时点细胞凋亡指数均高于假手术组(P0.05),电针组的细胞凋亡指数显著低于模型组(P0.05)。模型组各时点腓肠肌Bcl-2蛋白表达较假手术组显著降低(P0.05),Bax、Cyt-C以及Caspase-3蛋白表达均明显升高(P0.05)。术后14、21d,电针组与模型组比较,Bcl-2蛋白表达显著升高(P0.05),Bax、Cyt-C及Caspase-3蛋白表达则明显降低(P0.05)。各组大鼠腓肠肌的Caspase-3mRNA表达与蛋白表达结果基本一致。结论:电针能够促进腓肠肌Bcl-2的表达并抑制Bax、Cyt-C和Caspase-3的表达,从而抑制肌细胞的凋亡,这可能是电针延缓失神经性骨骼肌萎缩的机制之一。