PTX腹腔注射致SD鼠点燃癫痫模型

目的：观察不同剂量印防已毒（PTX）致SD鼠慢性点燃癫痫模型及药物对该模型的影响,方法：采用TPX腹腔注射制作SD鼠慢性点燃模型,并将其分为对照组,癫痫I组（PTX,1．5mg.kg^-1.d^-1),癫痫II组（TPX,2mg^-1.d^-1)和苯巴比妥钠干预组,观察发作情况,并做脑电图记录,结果：注药第20d时,对照组无癫痫发作,癫痫I组71％SD鼠（10／14）完全点燃;癫痫II组4只死亡,2只Ⅳ级,2只Ⅴ级;苯巴比妥钠干预组17％SD鼠（1／6）完全点燃,完全点燃的SD鼠在脑电图上出现典型尖波,棘波发放,结论：在该实验中,PTX腹腔注射致SD鼠点燃癫痫模型的较好剂量是1．5mg/kg^-1.d^-1,苯巴比妥钠可阻止该模型的形成。     

点燃癫痫模型中脑组织兴奋性氨基酸的变化

目的 :了解兴奋性氨基酸在点燃癫痫模型中的改变及其作用。方法 :采用印防己毒腹腔注射制作SD鼠慢性点燃模型 ,并将其分为对照组、癫痫发作组、癫痫发作间期组和苯巴比妥钠干预组。用高效液相色谱仪测定颞区脑组织天门冬氨酸和谷氨酸浓度。结果 :癫痫发作组、癫痫发作间期组和苯巴比妥钠干预组SD鼠颞区脑组织天门冬氨酸浓度 [分别是 (0 97± 0 2 9) μmol·g- 1 ,(1 10± 0 5 4 ) μmol·g- 1 ,(1 0 7± 0 4 1) μmol·g- 1 ]较对照组SD鼠颞区脑组织天门冬氨酸浓度 [(0 6 5± 0 17) μmol·g- 1 ]明显增高 ;三组SD鼠颞区脑组织谷氨酸浓度 [分别是 (9 5 4± 2 6 3) μmol·g- 1 ,(9 5 5± 2 35 ) μmol·g- 1 ,(8 93± 1 89) μmol·g- 1 ]较对照组SD鼠颞区脑组织谷氨酸浓度 [(6 2 1± 2 0 9) μmol·g- 1 ]明显增高。结论 :在该模型中 ,兴奋性氨基酸明显增高 ,可能参与癫痫的发生 ;用苯巴比妥钠可以阻止癫痫的发生 ,但不能阻断兴奋性氨基酸增高。     

P2Y6受体在慢性癫痫发作大鼠海马组织中的表达及对Ca~(2+)的影响

目的:建立慢性癫痫发作SD大鼠模型并检测海马组织P2Y6受体表达改变,研究P2Y6受体-Ca2+信号通路改变。方法:采用氯化锂和匹罗卡品腹腔注射建立SD大鼠慢性癫痫发作模型(EPI组)并检测其脑电图,以腹腔注射生理盐水SD大鼠为对照(CON组)。采用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot检测EPI组和CON组SD大鼠海马组织P2Y6受体mRNA和蛋白质表达并比较其差异。采用Fura-2/AM检测EPI组和CON组SD大鼠新鲜海马组织细胞内Ca2+浓度并对比其差异。结果:CON组正常SD大鼠脑电图波形主要以α波为主,并伴有低幅度的β波及少量的δ波,几乎未捕捉到棘波发放;EPI组SD大鼠的脑电图出现较为规律的棘波发放,其频率多集中于28Hz,波幅不高于200μV。EPI组慢性癫痫发作SD大鼠海马组织P2Y6受体表达、mRNA、蛋白质和细胞内Ca2+显著高于CON组正常SD大鼠(均P<0.05)。结论:P2Y6受体在慢性癫痫发作大鼠海马组织表达显著升高,激活下游信号传导通路导致细胞内Ca2+水平升高,可能在慢性癫痫发作的发病机制中具有重要作用。     

宁痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑神经元超微结构的影响

[目的]观察中药复方宁痫冲剂对戊四唑(PTZ)致痫大鼠大脑神经元超微结构的影响。[方法]SD大鼠40只,随机分为5组,即正常组、模型组,宁痫冲剂高、低刺量组(10、5 g·kg-1·d-1)和苯巴比妥组(60 mg·kg-1·d-1);除正常组外,其他组动物均以PTZ诱导复制慢性癫痫模型,造模同时给药,连续4周,待未次点燃测试后1 h,各组随机抽取2只大鼠,采用透射电镜法观察海马CA3区、额叶皮质神经元超微结构。[结果]模型组海马、额叶皮质神经元超微结构损伤显著:核膜边界不清或内陷,核质不均匀,异染色质增多、积聚成块、边集,胞质中线粒体肿胀、嵴断裂甚至空化,粗面内质网池扩张、核糖体脱落,游离核糖体解聚,甚至见胞浆空化;宁痈冲剂组海马、额叶皮质神经元损伤程度均明显减轻,其中低剂量组较高剂量组损伤更为轻浅,与苯巴比妥组相比未见显著性差异。[结论]戊四唑诱导慢性癫痫发作可致大鼠海马、额叶皮质神经元超微结构明显损伤,中药复方宁痫冲剂具有良好的抗损伤作用。     

艾灸督脉改变AD转基因小鼠事件相关电位P300的分析研究

目的:通过艾灸督脉分析AD转基因小鼠事件相关电位P300的变化.方法:AD转基因小鼠随机分为模型组、艾灸组、西药I组、西药II组,选取同龄同背景C57BL/6J雄性小鼠作为正常组,每组10只.艾灸组小鼠隔附子饼灸"百会",温和灸"天门(风府)""大椎",每次20 min,1次/d,治疗2 w;西药I组用雷帕霉素腹腔注射给药,2 mg·kg-1·d-1,1次/d,治疗2 w;西药II组在艾灸组治疗同时予以3-甲基腺嘌呤(3-MA)腹腔注射给药,1.5 mg·kg-1·d-1,1次/d,治疗2 w;正常组和模型组动物常规饲养2 w,不作特殊处理.在实验前后分别测定各组P300,将测定结果进行比较.结果:治疗前正常组与模型组、艾灸组、西药I组、西药II组的N2潜伏期、P3潜伏期、P3波幅相比较差异均有统计学意义(P<0.05),AD小鼠的N2潜伏期、P3潜伏期较正常小鼠延长,P3波幅降低;艾灸组与西药I组在治疗后N2潜伏期较治疗前无明显变化(P>0.05),P3潜伏期与治疗前缩短,P3波幅升高(P<0.05);艾灸组与西药I组在治疗后比较P3潜伏期、P3波幅无差异(P>0.05);西药II组治疗前后比较N2潜伏期、P3潜伏期、P3波幅均无差异(P>0.05).结论:阿尔茨海默病小鼠认知功能与P300的特征相一致;艾灸督脉能提高缩短AD小鼠P3潜伏期、升高P3波幅,是治疗AD的有效方法.     

3种癫痫模型的制备及应用分析

目的:探讨不同癫痫模型的制备及其在癫痫研究方面的应用.方法:选择成年雄性SD大鼠60只随机分为杏仁核慢点燃组、杏仁核快点燃组、注射匹罗卡品组,每组20只动物,观察各组大鼠的点燃率,模型大鼠癫痫发作级别及癫痫行为Racinel评分,同时观察模型大鼠癫痫发作时的脑电图.结果:成功获得各组癫痫模型动物,各组Racinel评分差异有统计学意义(P＜0.05),其中慢点燃组动物持续时间较长,快点燃组出现典型癫痫行为较早,匹罗卡品组动物存活时间长.结论:与杏仁核电点燃模型相比,匹罗卡品点燃癫痫动物成功率高,癫痫行为保持时间较久,能更好的为临床所应用,但匹罗卡品所致癫痫大鼠痫性发作持续时间变异较大,这可能为临床筛药带来了一定的不便.     

阻断颞叶海马区血供癫痫大鼠模型的制备

目的:探讨一种新型的颞叶癫痫模型的制备。方法:选择成年雄性SD大鼠60只随机分为注射匹罗卡品组(对照组)、新型模型组(实验组)、假手术组,每组20只动物,观察各组大鼠的成功率,模型大鼠癫痫发作级别及癫痫行为Racinel评分,同时观察模型大鼠癫痫发作时的脑电图。结果:成功获得各组癫痫模型动物,各组大鼠Racinel评分差异无统计学意义(P>0.05),但是新型模型组在制备成功率、存活率上均明显优于对照组(P<0.05)。结论:与传统的匹罗卡品点燃模型相比,新型制备组癫痫动物成功率高,癫痫行为保持时间较久,能更好的为临床和基础研究所应用。     

化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力与海马中nNOS表达的关系

目的 :观察印防己毒 (Picrotoxin ,PTX)化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力及其与大鼠海马中nNOS表达变化的关系 ,为进一步研究癫痫患者的记忆损害的治疗提供线索。方法 :4 4只雄性SD大鼠随机分为点燃组和对照组 ,分别用PTX和生理盐水腹腔注射 ,根据点燃情况点燃组再分为全面发作 (A)、频繁发作 (B)和部分发作 (C)和迷宫对照 (D)组 ,对照组再分为迷宫训练组 (E)和对照组 (F)。然后进行水迷宫行为测试评价其学习记忆能力。用免疫组化测定各组大鼠海马中nNOS表达变化。结果 :癫痫大鼠在水迷宫测定中 ,除B组第 1天的成绩较对照组差外 ,其余各组及B组在第 2、3、4、5天中寻找平台的潜伏期时间与对照组相比没有显著性差异。点燃各组对平台空间位置的记忆的能力较对照组要差 ,差异有显著性。大鼠海马中 ,A、B、C、E组nNOS神经元表达增加 ,D组表达减少。结论 :PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力下降 ,发作频繁者 ,学习记忆受损明显 ,与发作的严重程度无关。水迷宫训练可使化学点燃癫痫大鼠海马中nNOS表达增高 ,对记忆损害有保护作用。     

戊四氮点燃大鼠海马星形胶质细胞巢蛋白的表达

目的：观察戊四氮点燃大鼠海马各区巢蛋白(nestin)的表达,以探讨其与癫痫发病机制的关系。方法：将20只成年雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用戊四氮点燃大鼠模型,观察大鼠痫性发作行为和脑电图表现,用免疫组织化学方法观察海马各区星形细胞活化标志巢蛋白表达的变化。结果：实验组大鼠于4周后均达到点燃状态,而对照组行为正常。2组脑电图背境电活动以a节律为主,实验组Ⅳ或Ⅴ级痫性发作时脑电图均出现典型的高波幅棘慢波、尖慢波。实验组海马各区nestin阳性星形细胞较对照组明显增多。结论：戊四氮点燃引起海马内nestin阳性星性细胞明显增加,提示癫痫脑组织内存在星形细胞增生和活化,这可能是癫痫脑组织胶质化及点燃维持的病理基础。     

石菖蒲水煎剂对癫痫大鼠脑部神经发生及认知功能的影响

目的：探讨石菖蒲水煎剂对癫痫大鼠脑部神经发生的影响和对癫痫认知障碍的治疗作用。方法：SD大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和石菖蒲灌胃组,每组10只。癫痫模型组和石菖蒲灌胃组采用印防己碱（PTX）建立癫痫动物模型,采用5一溴脱氧尿苷嘧啶（-brolTlO-2-deoxyuridine,BrdU）腹腔注射标记内源性神经干细胞（NSC）。正常对照组、癫痫模型组予生理盐水灌胃,石菖蒲灌胃组予石菖蒲水煎剂10mg／（kg·d）灌胃,共30天。治疗前后进行鼠癫痫发作Racine评级、皮层脑电图检测、脑内BrdU阳性细胞免疫组化检测和Morris水迷宫检测。结果：Morris水迷宫检测显示,癫痫模型组逃避潜伏时间长于石菖蒲灌胃组和正常对照组（P〈0．05）;癫痫模型组目标象限内的游泳时间占整个游泳时间的百分率明显低于石菖蒲灌胃组和正常对照组（P〈0．05）。石菖蒲灌胃组大鼠Ⅲ～Ⅴ级癫痫发作频率、皮层脑电图频率、波幅降低、Brdu阳性细胞数升高,与癫痫模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：大鼠发生癫痫后,启动自我保护机制,石菖蒲干预后明显增强了保护机制。     

SC1001钠盐对马桑内酯所致家兔海马点燃性癫痫发作的影响

Healthy rabbits weighing 1.7-2.4 kg were used. According to Sawyer's atlas the stainless steel cannula and recording electrode were implanted into the left hippocampus of each animal. The kindling experiments were started one week after the surgical operation. For kindling, all animals received injection of 2 microliters of diluted solution containing 0.55 or 0.32 microgram of coriaria lactone (CL) every second day, through the single stainless steel cannula previously implanted in the hippocampus. Hippocampal EEG of all the animals was recorded by telemetric method and the behavior of them was observed at the same time. Eighteen fully kindled rabbits were separated into three groups. The SC1001 Na group of six rabbits was treated with SC1001 Na (100 mg/kg, i.m.), the PB Na group (six rabbits) received phenobarbital Na (30 mg/kg, i.m.), and the control group of six was treated with placebo (normal saline, i.m., in the same volume as that of the SC1001 Na injection); injections were administered once a day for two courses of treatment (one course of treatment was 1 week). The results of the experiment indicated that SC1001 Na (100 mg/kg) had certain effects on hippocampal kindled seizures induced by CL, but its curative effects were not more notable than those of PB Na (30 mg/kg).     

不同剂量青霉素致SD大鼠癫痫的实验研究

目的:建立不同剂量青霉素诱导的急性癫痫大鼠模型并观察其行为和脑电图变化。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、青霉素模型Ⅰ组和青霉素模型Ⅱ组,每组8只。对照组注射生理盐水,模型Ⅰ、Ⅱ组分别于大鼠腹腔按500万U.kg-1、700万U.kg-1注射青霉素,观察并比较大鼠行为变化和脑电图记录。结果:两个剂量青霉素组均能成功诱发大鼠癫痫,癫痫大鼠的行为以强直和阵挛为主,同时其脑电图上具有明显的痫样放电。结论:500万U.kg-1、700万U.kg-1的青霉素诱导的急性癫痫大鼠模型是一种稳定而可靠的动物模型。     

小剂量地塞米松对颞叶癫痫雄性大鼠脑电图的影响

目的：探讨小剂量地塞米松对颞叶癫病雄性大鼠顶叶皮层脑电图的影响,为糖皮质激素相关药物治疗颞叶癫痫提供依据。方法：雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、生理盐水预处理后颞叶癫痫点燃对照组（NS-control组）和小剂量地塞米松短期预处理后颞叶癫痫点燃组（Dex组）,颞叶癫痫点燃模型采用海人酸杏仁核微量注射方法建...     

Curcumin inhibits amygdaloid kindled seizures in rats

Background Curcumin can reduce the severity of seizures induced by kainate acid （KA）, but the role of curcumin in amygdaloid kindled models is still unknown. This study aimed to explore the effect of curcumin on the development of kindling in amygdaloid kindled rats. Methods With an amygdaloid kindled Sprague-Dawley （SD） rat model and an electrophysiological method, different doses of curcumin （10 mg·kg^-1·d^-1 and 30 mg·kg^-1·d^-1 as low dose groups, 100 mg·kg^-1·d^-1 and 300 mg·kg^-1·d^-1 as high dose groups） were administrated intraperitoneally during the whole kindling days, by comparison with the course of kindling, afterdischarge （AD） thresholds and the number of ADs to reach the stages of class I to V seizures in the rats between control and experimental groups. One-way or two-way ANOVA and Fisher＇s least significant difference post hoc test were used for statistical analyses. Results Curcumin （both 100 mg·kg^-1·d^-1 and 300 mg·kg^-1·d^-1 ） significantly inhibited the behavioral seizure development in the （19.80±2.25） and （21.70±2.21） stimulations respectively required to reach the kindled state. Rats treated with 100mg·kg^-1·d^-1 curcumin 30 minutes before kindling stimulation showed an obvious increase in the stimulation current intensity required to evoke AD from （703.3±85.9） μA to （960.0±116.5） μA during the progression to class V seizures. Rats treated with 300 mg·kg^-1·d^-1 curcumin showed a significant increase in the stimulation current intensity required to evoke AD from （735.0±65.2） μA to （867.0±93.4） μA during the progression to class V seizures. Rats treated with 300mg·kg^-1·d^-1 curcumin required much more evoked ADs to reach the stage of class both IV （as （199.83±12.47） seconds） and V seizures （as （210.66±10.68） seconds）. Rats treated with 100 mg·kg^-1·d^-1 curcumin required much more evoked ADs to reach the stage of class V seizures （as （219.56±18.24） seconds）. Conclusion Our study suggests that curcumin has a potential antiepileptogenic effect on kindling-induced epileptogenesis.     

耐药性癫痫大鼠海马MRP1与GFAP的表达及托吡酯影响的研究

目的:研究多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)与胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillaracidic protein,GFAP)在马桑内酯(coriaria lactone,CL)耐药性癫痫大鼠模型海马中的表达。方法:成年雄性SD大鼠24只,随机分为对照组、模型组和治疗组。采用反复肌肉注射阈下剂量CL(1ml/kg.84h)法制备耐药性癫痫动物模型。模型组和治疗组点燃后按1ml/.kg.168h继续注射CL四次。治疗组点燃后同时给予托吡酯(topiramate,TPM)200mg/kg.d灌胃治疗30d。采用免疫组织化学方法检测海马MRP1及GFAP的表达。结果:与模型组比较,治疗组海马GFAP阳性细胞数和积分光密度值均显著减少(P<0.05),GFAP免疫反应性降低。与对照组比较,模型组和治疗组海马MRP1阳性细胞数与积分光密度值均显著增加(P<0.05),但治疗组与模型组MRP1阳性细胞数与积分光密度值无统计学差异(P>0.05)。结论:①CL诱发的耐药性癫痫模型海马有显著的星形胶质细胞增生及MRP1的表达增加,可能参与了癫痫耐药的发生;②抗癫痫药物TPM未上调星形胶质细胞MRP1的表达。     

海人酸杏仁核点燃癫痫大鼠海马和顶叶皮层脑电图改变

目的：记录和比较海人酸（KA）杏仁核点燃癫痫大鼠海马和顶叶皮层脑电图。方法：选用雄性Wistar大鼠,以右侧杏仁核外侧基底核为给药靶点,在立体定位仪下,微量注射KA建立点燃癫痫模型,在对大鼠行为学观察的同时,连续记录大鼠点燃后6 h左侧海马 和顶叶皮层脑电图。结果：大鼠点燃后脑电图依次出现多种形式的癫痫放电,以多发性棘波为主。海马和顶叶癫痫放电潜伏期,每小时放电持续时间、6 h总放电时间和波幅差异均无显著性。结论：KA杏仁核点燃大鼠脑电图改变符合颞叶癫痫特征,大鼠点燃急性早期癫痫放电在皮层间传播迅速,点燃灶对侧海马和顶叶皮层脑电图具有高度一致性,监测顶叶皮层脑电图可能更适用于对该模型的电生理学观察。     

序贯法测定大鼠腹腔注射苯巴比妥钠和丙泊酚的麻醉半数有效量

目的序贯法测定SD大鼠腹腔注射苯巴比妥钠和丙泊酚的麻醉半数有效量（ED50）,并确定两种药物的效价比。方法 36只SD大鼠,随机分为两组：苯巴比妥钠组（n=18）,丙泊酚组（n=18）。大鼠腹腔给药后立即观察大鼠的行为学表现,以大鼠前爪翻正发射消失作为麻醉终点的指标,前爪翻正反射恢复作为意识恢复的指标。用序贯增减法确定给药剂量,根据公式ED50=lg-1（ΣC/Σt）计算各组动物的ED50,在此基础上求出两药ED50的效价比。结果序贯法测定SD大鼠苯巴比妥钠的麻醉半数有效量ED50为122.415mg/kg;丙泊酚的麻醉半数有效量ED50为59.452mg/kg,两种药物ED50的效价比为0.486。结论序贯法测定药物的半数有效量简便、高效、可信。应用序贯法测定了正常大鼠通过腹腔注射苯巴比妥钠和丙泊酚的ED50,并得出苯巴比妥钠和丙泊酚的效价比是0.486。