情志刺激对大鼠血糖、胰岛素基因表达影响的实验研究

目的:从宏观和微观分子水平阐明情志致病的机制和药物干预作用。方法:观察各组大鼠血糖的变化情况,同时采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,检测大鼠胰腺胰岛素基因的表达,及具有理气降逆散结作用的中药复方心身5号干预作用的分子机制。结果:心理应激可促使模型组大鼠血糖持续升高,胰岛素基因mRNA的表达量降低,服用心身5号方的中药组血糖较模型组明显降低,胰岛素基因mRNA表达量显著升高。结论:证实心理应激从分子水平影响了糖尿病的发病,心身5号方具有调节作用。     

慢性应激对大鼠下丘脑神经递质的影响及中药的调节作用

目的:探讨慢性心理应激对大鼠下丘脑神经递质含量的影响及中药心舒1号的调节作用,从而阐释中医情志致病机制-气机紊乱证的生物学机制。方法:选用Wistar大鼠70只,分别采用旋转、限制、拥挤的方法模拟情志刺激造成气机紊乱证,观察应激大鼠下丘脑内去甲肾上腺素（NE）、五羟色胺（5-HT）、乙酰胆碱（Ach）含量的改变以及中药心舒1号的调节作用。结果:与正常对照组相比,三种造模组大鼠下丘脑内NE、5-HT、Ach含量显著下降,具有统计学意义（P<0.01）,旋转组与限制组之间相比5-HT的含量有差异（P<0.05）。而旋转药组、限制药组和拥剂药组大鼠下丘脑内NE、5-HT、Ach的含量有明显的上升趋势,特别是限药组神经递质升高较明显,具有统计学意义（P<0.05）。结论:慢性应激刺激可使大鼠下丘脑内神经递质的含量发生变化,从而引起神经、内分泌、免疫网络的失调,慢性应激是模拟情志刺激的过程,其所形成的中医病机为气机紊乱,提示气机紊乱与神经-内分泌-免疫网络失调密切相关,而心舒1号则对其有较好的调节作用。     

919糖浆对肝郁气滞血瘀证模型大鼠脑胃ghrelin通路的影响

目的研究肝郁气滞血瘀证模型大鼠下丘脑及胃内饥饿素(ghrelin)表达的变化以及护肝方919糖浆的干预作用。方法 40只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,919糖浆高、中、低剂量组(27、13.5、6.75 g·kg~(-1)),每组8只。除正常组外,其余各组采用夹尾急性激怒法制作肝郁气滞血瘀证模型,各组给予相应的干预措施,造模21天。其间监测各组大鼠的摄食量及体质量。实验结束后采用ELISA法测定各组大鼠血清酰基化ghrelin浓度,Western blot法测大鼠胃及下丘脑ghrelin蛋白表达,RT-PCR法检测胃中ghrelin、生长激素促分泌受体(GSHR)、5-羟色胺2b受体(5-HT_(2b)R)mRNA表达以及下丘脑ghrelin、5-羟色胺2c受体(5-HT_(2c)R)mRNA水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清酰基化ghrelin水平显著升高(P0.01),下丘脑及胃ghrelin蛋白表达增加(P0.01),胃内ghrelin、GHSR及下丘脑ghrelin mRNA表达水平显著上调(P0.01),胃内5-HT_(2b)R及下丘脑内5-HT_(2c)R mRNA水平显著下调(P0.01)。与模型组比较,919糖浆治疗组能显著逆转模型大鼠血清、胃内及下丘脑ghrelin水平的升高(P0.01),下调模型大鼠胃内GHSR mRNA水平(P0.01),上调胃内5-HT_(2b)R及下丘脑内5-HT_(2c)R mRNA水平(P0.01)。结论 ghrelin是肝郁气滞血瘀证的重要物质基础;919糖浆能通过调节模型大鼠脑胃ghrelin通路的异常表达,从而发挥其防治肝郁气滞血瘀证的作用。     

心身Ⅰ号抗应激性溃疡的实验研究

本实验依据中医学:“形神若一”和情志致病理论,以束缚水浸法模拟情志刺激制做大鼠应激性溃汤的模型,并以具有理气、降逆、散结作用的中药复方心身Ⅰ号进行治疗反证,证实该模型气机紊乱的实质是神经内分泌调节系统和微循环的紊乱,心身Ⅰ号具有调节神经内分泌系统和微循环功能,起到心(情绪、心理)身(躯体)并治的作用。     

善胃I号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响△

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响，从胃内环境角度，探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为4组，即正常对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组，每组20只，造模24周后开始给予药物干预，给药6周后，采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜NHE1蛋白的表达水平，高精度酸度计测定大鼠胃液pH值的变化。结果：善胃Ⅰ号方组NHE1蛋白的阳性表达率及胃液pH值较模型对照组及阳性药物组均明显降低（P〈0．05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白的表达，降低胃液pH值，有效维持胃内酸性环境，从而起到干预胃癌前病变发展的作用。     

中药干预应激性溃疡大鼠模型的实验研究

【目的】初步探讨应激性溃疡的中医学病理机制。【方法】采用水浸束缚造成大鼠应激性胃溃疡模型。将60只大鼠随机分为5组，即正常空白组、造模组、心身1号组、雷尼替丁组、阿普唑仑组。观察不同药物对大鼠应激性溃疡发生的干预作用。【结果】不同给药组大鼠胃黏膜溃疡指数、pH值均存在显著差异。中药组大鼠的溃疡指数低于造模组，但中药组pH值与造模组无差异。【结论】行气活血、降逆散结的中药心身1号片可以预防应激性溃疡的发生。应激性溃疡的基本病机为气机紊乱。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠下丘脑和海马雌激素受体α,β mRNA表达的影响

目的:研究中药复方经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑和海马中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)mRNA表达的影响.方法:以情志刺激多因素法复制PMS肝气郁证大鼠模型,使用中药复方经前舒颗粒进行干预治疗,采用RT-PCR法检测大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达变化.结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达量高于正常组(P＜0.05);与模型组大鼠相比,经前舒颗粒给药组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达量则显著降低(P＜0.05),与正常组无差异.结论:经前舒颗粒可下调下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达水平,这可能是其治疗PMS肝气郁证的作用机制之一.     

益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变PCNA及CyclinE蛋白表达的影响

目的:观察益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变胃粘膜PCNA、CyclinE表达的影响。方法:采用MNNG、乙醇、饥饱失常等多因素造模。造模成功后,将造模存活大鼠随机分为自然恢复组、中药高、中、低剂量组,各组大鼠作相应的处理后,免疫组化法检测各组大鼠胃粘膜组织PCNA、CyclinE表达水平。结果:各治疗组PCNA的PI及CyclinE蛋白阳性率与自然恢复组比较差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。提示:益气化瘀中药可能是下调CylinE的表达,抑制细胞增殖,而发挥对大鼠胃癌前病变的治疗作用。     

萎胃散对萎缩性胃炎模型大鼠生长激素的影响

目的:观察中药复方萎胃散对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠血清及胃粘膜生长激素(GH)的影响,探讨萎胃散对慢性萎缩性胃炎(CAG)及肠上皮化生、异型增生的阻断作用及可能机制。方法:采用甲基硝基亚硝基胍、雷尼替丁和吐温联合喂饲造成慢性萎缩性胃炎动物模型,用萎胃散和对照药物胃复春进行干预治疗,免疫组化和酶联免疫吸附法分别测定胃粘膜和血清GH水平,观察对胃粘膜萎缩和不典型增生的预防治疗作用及对GH的影响。结果:高、低剂量组及胃复春组胃粘膜GH表达较模型对照组均有增加,尤其高剂量组更为明显(P<0.05);高剂量组胃粘膜GH表达高于胃复春组和低剂量组(P<0.05);高剂量组及胃复春组血清GH水平较模型对照组均有升高,尤其高剂量组更为明显(P<0.05);高剂量组血清GH水平高于低剂量组(P<0.05)。结论:萎胃散可能通过影响CAG模型大鼠GH水平而起到治疗作用。     

经前舒颗粒对PMS肝气郁证模型大鼠下丘脑MAOA和MAOB表达水平的影响

目的 通过研究PMS肝气郁证模型大鼠下丘脑MAOA和MAOB基因的表达,探讨PMS肝气郁证的微观发病机制及中药经前舒颗粒的作用靶点.方法 束缚法制备PMS肝气郁证模型大鼠,用经前舒颗粒干预治疗,运用半定量RT-PCR和Western Blotting方法检测正常组、模型组、给药组大鼠下丘脑区MAOA、MAOB mRNA及其蛋白表达水平;通过单因素方差分析及LSD法统计数据.结果 与正常组相比,PMS肝气郁证模型组大鼠MAOA mRNA在下丘脑表达显著升高(P<0.05),蛋白表达极显著升高(P<0.01);MAOB mRNA及蛋白在下丘脑表达均无统计学差异(P>0.05);给药组与模型组相比,MAOA mRNA在下丘脑表达降低(P<0.05),蛋白表达显著降低(P<0.01);MAOB mRNA及蛋白在下丘脑表达均无统计学差异(P>0.05);给药组与正常组相比,MAOA、MAOB mRNA及蛋白在大鼠下丘脑中表达均无统计学差异(P>0.05).结论 模型组大鼠与正常组大鼠相比,下丘脑MAOA基因表达升高,通过经前舒颗粒干预后,恢复正常.说明MAOA基因与PMS肝气郁证相关,并且可能是经前舒颗粒治疗该证的作用机制之一.     

健胃愈疡颗粒对胃溃疡患者胃黏膜hTFF1mRNA表达的影响

目的　探讨健胃愈疡颗粒 (JWYY)对胃溃疡 (GU)患者胃黏膜hTFF1mRNA表达的影响 ,揭示其抗溃疡复发的分子机制。方法　将 60例胃镜下确诊的GU (中医辨证为肝郁脾虚证 )患者 ,随机分为JWYY治疗组和西药对照组 ,每组 3 0例 ;另设胃镜下无胃黏膜病变的患者 10例为正常组。两组GU患者第 1个疗程结束前后均于胃镜下取溃疡边缘组织活检标本 2块 ,迅速置液氮 -80℃保存并行RT -PCR检测。结果　JWYY能提高人胃黏膜hTFF1mRNA表达 ,两组经统计学处理无显著性差异。结论　JWYY能增强人胃黏膜hTFF1mRNA的上增性表达 ,从而提高溃疡愈合质量 ,是JWYY抗胃溃疡复发作用的部分机制     

Effect and Mechanism of Moxibustion on Acupoints Zusanli （ST 36） and Liangmen （ST 21） in the Prevention and Treatment of Stress Ulcer

目的观察艾灸足三里等穴对应激性溃疡大鼠胃粘膜细胞增殖及凋亡的影响,探讨艾灸促进胃粘膜损伤修复的细胞分子生物学机制.方法60只SD大鼠随机分为4组,即束缚对照组、模型组、艾灸足三里和梁门穴组和艾灸非穴对照点组.束缚水浸应激法制备胃溃疡模型,放射免疫方法测定胃粘膜转化生长因子(TGF-α)的含量,免疫组织化学方法检测HSP70蛋白,胃粘膜增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞凋亡指数.结果束缚水浸应激法造模后可致胃粘膜损伤指数升高,胃粘膜TGF-α含量下降;PCNA下降,HSP70蛋白增加;细胞凋亡指数增加(P＜0.01).艾灸足三里和梁门可降低胃粘膜损伤指数,增加胃粘膜TGF-α含量,促进HSP70和PCNA的表达,降低胃粘膜细胞凋亡指数,与模型组和对照组比较有显著性差异(P＜0.01).结论艾灸足三里和梁门对应激性溃疡胃粘膜具有保护作用,机制可能是促进TGF-α合成、刺激胃粘膜细胞增殖、抑制细胞凋亡,而这一过程与艾灸诱导HSP70表达有关.     

健胃愈疡颗粒对复发胃溃疡大鼠胃黏膜黏蛋白5AC mRNA的影响

目的:观察不同药物干预对胃溃疡大鼠胃黏膜组织中黏蛋白5AC(Mucin5AC,MUC5AC)mRNA表达的影响及其抗溃疡复发作用的影响.方法:采用Okabe改良法制做大鼠胃溃疡模型,应用Watanabe法复制胃溃疡复发模型.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测胃黏膜组织MUC5AC mRNA的表达.结果:(1)在灌胃后第10天健胃愈疡组、正常组、假手术组、雷尼替丁组、中西药结合组MUC5AC mRNA表达显著高于模型组(P<0.05或P<0.01);(2)在第92天诱发溃疡复发,健胃愈疡组、正常组、假手术组、模型未复发组、雷尼替丁组、中西药结合组MUC5AC mRNA表达显著高于模型复发组(P<0.05或P<0.01),健胃愈疡组、中西药结合组MUC5AC mRNA表达显著高于雷尼替丁组(P＜0.01);(3)健胃愈疡组溃疡复发率、溃疡指数均显著低于模型复发组(P＜0.01).结论:健胃愈疡颗粒可显著提高胃溃疡大鼠胃黏膜组织中MUC5AC mRNA的表达水平,起到保护胃黏膜的作用,参与胃溃疡的修复及抗溃疡复发的病理生理过程.     

健胃愈疡片对胃溃疡大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡及其相关调控基因表达的影响

目的：以胃溃疡大鼠为模型，从胃黏膜上皮细胞凋亡以及Bcl-2、Bax和MK表达方面，探讨健胃愈疡片抗胃溃疡作用的分子生物学机理。方法：Okabe乙酸法制作大鼠胃溃疡模型，观察胃组织病理学变化，检测胃黏膜上皮细胞凋亡、Bcl-2、Bax和MK mRNA表达。结果：健胃愈疡组溃疡指数（GUI）、凋亡指数（AI）明显降低，Bcl-2、Bcl-2／Bax、MK mRNA表达明显高于模型组。结论：健胃愈疡片可增加Bcl-2及MK的表达，减少胃黏膜上皮细胞凋亡，对大鼠胃溃疡有一定的治疗作用。     

健脾化瘀中药对大鼠胃溃疡愈合质量的影响

目的 观察健脾化瘀中药对大鼠消化性溃疡愈合质量的影响,进而阐明其抗胃溃疡的可能机制。方法 采用乙酸注射至大鼠胃浆膜下形成胃渍疡模型,随机分为4组,即空白组(灌服生理盐水)、模型组(灌服生理盐水)、雷尼替丁组(灌服雷尼替丁)、中药组(灌服健脾化瘀中药)。用HE染色法对大鼠愈合性胃溃疡再生黏膜进行定量观察,用放射免疫的方法检测血清及胃黏膜的表皮生长因子(EGF)的含量;用免疫组织化学法检测胃黏膜表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达。结果 中药组再生黏膜厚度高于模型组及雷尼替丁组(P<0．05或P<0．01),中药组及雷尼替丁组胃黏膜组织的EGF的含量显著高于模型组(P<0．01),中药组胃黏膜EGFR蛋白表达较模型组增加(P<0．05)。结论 健脾化瘀中药可能是通过EGFR介导来促进胃黏膜上皮细胞增生,抑制胃酸,改善胃黏膜微循环,从而提高胃溃疡愈合质量,发挥抗溃疡作用,     

安胃汤对胃溃疡大鼠胃黏膜EGF及EGFR表达的影响

目的:通过实验性乙酸大鼠胃溃疡模型,研究安胃汤免煎剂防治慢性胃溃疡机理。方法:采用免疫组织化学方法观察安胃汤免煎剂对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型愈合时胃黏膜EGF及EGFR表达的影响,并进行图像分析及统计学处理。结果:与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可显著增强胃黏膜表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)表达(P<0.05或P<0.01),安胃汤大剂量组强于雷尼替丁组(P<0.01)。结论:安胃汤可能通过增强胃黏膜EGF及EGFR表达,增强胃黏膜保护作用而发挥抗溃疡作用。     

螺旋藻多糖对胃溃疡大鼠胃黏膜的修复作用及对EGF和EGFR表达的影响

目的: 观察螺旋藻多糖(PSP) 对胃溃疡大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)表达及溃疡愈合质量的影响,探讨其治疗胃溃疡的作用机制。方法: 采用乙酸烧灼法制备实验性胃溃疡大鼠模型,给予高、低两个剂量的PSP干预治疗15 d后取材,HE染色观察胃黏膜厚度、黏膜肌层缺损度变化;免疫组化观察胃溃疡大鼠胃黏膜EGF及EGFR表达情况。结果: PSP对胃溃疡黏膜有一定的修复作用,可使溃疡细胞破损减少,胃黏膜厚度、黏膜肌层缺损度与模型组比较均有显著性差异,免疫组化可见PSP使胃溃疡大鼠胃黏膜EGF及EGFR表达上调。结论: PSP治疗胃溃疡的作用机制可能与增加EGF及EGFR蛋白表达上调促进溃疡愈合有关。     

土荆芥-水团花对胃溃疡大鼠黏膜保护作用的研究

目的:通过土荆芥-水团花对一氧化氮(NO)、表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)的影响,探讨该药对实验性大鼠胃黏膜的保护作用。方法:采用醋酸注射至大鼠浆膜下形成胃溃疡模型,用游标卡尺测量溃疡指数(UI),用硝酸还原酶法测定NO含量,用放免法检测EGF含量,用免疫组化法检测胃黏膜组织EGFR的表达。结果:雷尼替丁组、土荆芥-水团花内容物组,UI,NO及EGF明显低于溃疡生理盐水组(P<0.05);正常大鼠胃黏膜EGFR的表达为弱阳性,定位在胞浆及胞膜,雷尼替丁组、土荆芥-水团花内容物组溃疡边缘组织阳性表达的细胞较正常组和溃疡生理盐水组逐渐增多(P<0.05)。结论:土荆芥-水团花内容物通过促进NO,EGF等胃黏膜的保护因子分泌,通过上调胃黏膜上皮细胞EGFR水平,促进溃疡愈合。     

艾灸对大鼠的胃粘膜保护作用及与血清铜锌含量的关系

本实验观察到艾灸＋溃疡组大鼠溃疡面积显著小于溃疡组（P＜0．05）;溃疡组血清铜／锌比值较对照组显著增高（P＜0．01）;艾灸＋溃疡组血清铜／锌比值较溃疡组显著降低（P＜0．01）。提示：艾灸对胃粘膜具有保护作用;胃溃疡时机体出现微量元素的代谢紊乱,而艾灸可改善机体的微量元素代谢,这很可能是艾灸对胃粘膜保护作用的机理之一。     

溃疡平对阿司匹林诱导的复发胃溃疡大鼠胃黏膜组织中 VEGF和Flt-1 mRNA表达的影响

目的:以非甾体类抗炎药物阿司匹林所致胃溃疡复发大鼠为模型,探讨溃疡平抗胃溃疡复发的机制。方法:以Okeba改良法复制大鼠实验性胃溃疡,ig阿司匹林制作复发模型,采用RT-PCR法观察溃疡平5.6 g.kg-1,连续ig 14 d对胃溃疡组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的影响。结果:溃疡平组VEGF mRNA和VEGF受体(Flt-1)mRNA的表达较复发组显著增高(P<0.01)。结论:溃疡平可提高胃黏膜中VEGF和Flt-1 mRNA的表达,从而增加黏膜中微血管通透性,将胃内有害物质稀释,并且刺激黏膜中腺体和血管的生成,达到保护胃黏膜的作用。这可能是溃疡平促进胃溃疡愈合,减少其复发的重要机制之一。