隐孢子虫病实验与临床研究——Ⅱ.不同动物隐孢子虫感染观察

BALb/c小鼠66只、Wistar大鼠38只、豚鼠10只和家兔6只分别给予皮下注射醋酸可的松,每周2只.连续给药3周后开始用金胺—酚染色、改良耐酸染色和沙黄—美蓝染色法检查动物粪便中隐孢子虫卵囊.小鼠隐孢子虫卵囊阳性率为71.21%(47/66);大鼠则为34.21%(13/38).小鼠粪便中卵囊数量明显多于大鼠.小鼠粪便中隐孢子虫卵囊可分为大型囊(7.47μ×5.90μ)和小型囊(4.6μ×4.33μ)两种.豚鼠与家兔均未能检出隐孢子虫卵囊.小鼠口服或皮下注射地塞米松均未能诱发隐孢子虫感染.提示小鼠皮下注射醋酸可的松可能是一种较好的建立隐孢子虫感染动物模型的方法     

儿童隐孢子虫感染的调查研究

采用金胺-酚染色法及改良抗酸染色法染色,对青岛地区969例儿童粪便进行了隐孢子虫感染检查,共发现阳性者26例,感染率为2.7%,其中一乡村为7.9%.隐孢子虫感染率性别间、学龄前儿童与小学生间无显著差异,但乡村与城市间有极显著差异.人际传播为主要途径.     

广州家禽、家畜批发市场六种动物隐孢子虫感染情况的调查

目的调查广州家禽、家畜批发市场兔、鸭(含雏鸭)、羊、鸡、狗、鸽6种动物的隐孢子虫感染情况。方法取上述动物的粪便292份，用金胺-酚-改良抗酸复染法染色，镜检卵囊。结果检查的6种动物均发现有隐孢子虫感染，自然感染率分别为：64．1％，54．3％(45．0％)，21．7％，20．6％，20．0％，14．6％。结论广州家禽、家畜批发市场6种动物存在隐孢子虫感染。     

潍坊地区动物稳孢子虫病的流行情况调查

目的：调查潍坊地区动物稳孢子虫病的流行情况。方法：采集犊牛和其它家畜粪便标本,用金胺-酚染色法及改良抗酸复染法检查隐孢子虫卵囊。结果：犊牛的感染率为37.3%(194/520),4周龄内小牛的感染率为55.4%（102/184）。从患者和健康者家中采集的家畜粪便卵囊阳性率分别为18.03%(11/61)和3.23%(2/62),二者之间差异有显著性。结论：潍坊地区奶牛有较高的感染率,病畜可能为本质的传染源,且夏秋季为感染的高峰期。     

隐孢子虫病的病原学诊断及病例对照研究

目的为了验证接触动物、营养不良与隐孢子虫病感染有显著的统计学联系,探讨隐孢子虫病的病原学诊断方法。方法根据随机化的原则,在湖南省湘南地区用改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊,以卵囊阳性为病例,卵囊阴性者为对照。将同一粪便标本一式二份,分别用碘染色法和改良抗酸染色法进行对比测试。结果接触动物者感染隐孢子虫的aoR=374,aOR=3.14。营养不良者感染隐孢子虫的aOR=4.66,aoR=4.35。碘染色法检出卵囊41例,阳性率1．9％,改良抗染色法检出卵囊41例,阳性率1.9％,符合率为100％。结论动物是人感染隐孢子虫的最重要传染源,接触动物是隐孢子虫感染的最重要的危险因素。营养不良所致的继发性细胞免疫功能缺陷及胃肠道形态学的功能变化,是造成易感染隐孢子虫病的危险因素。碘染色法简便,可靠,是检测粪便中CSO较理想的方法。     

潍坊南部山区儿童隐孢子虫病感染的流行病学调查

目的：调查隐孢子虫病在潍坊南部山区儿童中的感染和流行情况。方法：随机抽样收集1943份儿童和部分患者家的家畜粪便样品,用金胺-酚染色法及改良抗酸复染法染色,检查隐孢子虫卵囊。结果：样本儿童隐孢子虫阳性率为2.83%,低年龄儿童感染率较高。秋季为儿童的感染高发季节,感染儿童家中饲养的家畜感染率明显高于正常儿童家中的家畜。结论：潍坊南部山区儿童隐孢子虫的感染以夏秋季为高发季节,低龄儿童感染率较高的主要原因可能与不良的卫生习惯及机体免疫功能不健全有关;病畜可能为本病的主要传染源。     

三种隐孢子虫卵囊改良抗酸染色的形态学观察

目的观察3种隐孢子虫卵囊改良抗酸染色的形态特点。方法细胞图象分析系统观察改良抗酸染色后的牛隐孢子虫(C.bovis)、安氏隐孢子虫(C.andersoni)、隐孢子虫猪基因型Ⅱ(Cryptosporidium sp.pig genotypeⅡ)三种隐孢子虫卵囊的形态特点,测定卵囊长径和短径,计算卵囊指数。结果卵囊呈玫瑰红色,圆形或卵圆形,囊壁不着色,囊内子孢子的排列不规则且多形态,可见暗黑色颗粒状残留物。三种隐孢子虫卵囊中安氏隐孢子虫卵囊明显较其他两种卵囊大,但油镜下无法区分三种隐孢子虫卵囊形态。标本中常存在有大小不等、染色均匀、无内部结构的非特异性抗酸颗粒。结论改良抗酸染色法是较好的临床隐孢子虫卵囊检测方法,但需要与非特异性抗酸颗粒鉴别。     

青岛地区人体隐孢子虫感染调查

目的 探讨隐孢子虫在青岛地区的发病情况及其致病性。方法 抽样调查青岛市腹泻病人及散居人其粪便标本，用金胺－酚染色法及改良抗酸染色法检查隐孢子虫，对该虫一者随工查其家族成员。结果 共调查３６５５人，隐孢子虫检出率为２．４％，其中腹泻病 、散居人群、阳性者家庭成员检出率分别为２．２％，１．９％和８．６％，男女检出率分别为２．５％和２．２％，成人和儿童检出率分别为０．７％和３．３％，市区和郊区分别为２．     

十堰地区恶性肿瘤患者隐孢子虫感染情况调查

目的 调查十堰地区恶性肿瘤患者的隐孢子虫感染情况及流行特点,为恶性肿瘤患者隐孢子虫感染的防治提供依据.方法 采集十堰市太和医院217例恶性肿瘤患者粪便,采用金胺酚+改良抗酸染色法检查隐孢子虫卵囊.结果 217例肿瘤患者隐孢子虫感染率为48.85%,男性患者与女性患者隐孢子虫感染率分别为49.58%和47.96%,差异无统计学意义(P>0.05);化疗、放疗、化疗+放疗患者隐孢子虫感染率分别为38.46%、37.88%和69.86%,差异有统计学意义(P<0.01);不同类别的肿瘤患者的隐孢子虫感染率分别是:呼吸系统为37.50%、消化系统为60.78%、乳腺为38.89%、其他(包括脑瘤、肾上腺瘤、甲状腺瘤等)为40.00%,差异有统计学意义(P<0.01).结论 恶性肿瘤患者易发生隐孢子虫感染,可能与其机体的免疫功能下降有关.     

隐孢子虫感染和隐孢子虫肠炎

隐孢子虫(Cryptosporidium)是一种肠道寄生性原虫,以往认为仅能引起动物腹泻,近年来发现隐孢子虫是能感染人的动物病(Zoonosis)或人畜共患病的病原体。 重庆医科大学附一院传染科罗明仪、王其南等为了解隐孢子虫在本地区的感染情况,用粪便三步检查法(第一步用2%碘液染色,寻找可疑隐孢子虫卵囊,一份粪标本检查三次;第二步用改良的Zie-hl-Neelsen抗酸染色法进一步认定卵囊,仍为一粪三检;第三步用Sheather氏糖液飘浮法观察隐孢子虫卵囊结构,凡第二、三步同时阳性者结合临床资料,有大便次数增多及性状改变者,定为隐孢子虫肠炎;无大便次数增多者定为隐孢子虫感染)检测了免疫功能正常者和受抑制者的粪标本共250份,发     

数字图像处理技术对人源隐孢子虫卵囊形态学参数的测定

目的建立并分析人源隐孢子虫卵囊的形态学参数,明确其形态学变化特点。方法收集一名严重腹泻儿童的粪便,涂片经改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊。应用奥林巴斯(Olympus)BX50万能生物显微镜(日本)摄像系统采集1439个隐孢子虫卵囊的图像,利用计算机数字图像分析系统测定其长径(L)、短径(W)、周长、面积,用SPSS数据处理软件(12.0版本)分析,计算其卵形指数(L/W)等一系列形态学参数。结果计算机数字图像分析技术测定人源1439个隐孢子虫卵囊长径均值为4.78μm,95%可信区间为4.73～4.82;卵囊短径均值为4.35μm,95%可信区间为4.33～4.37;卵囊周长、面积和卵形指数均值分别为15.63μm、15.22μm2和1.10。计算机数字图像分析技术测定的人、狗和小鼠源隐孢子虫卵囊的形态学参数,经方差分析F值在10.7374～68.8776,P<0.01。结论利用计算机数字图像分析系统和SPSS数据处理软件,获得人源隐孢子虫卵囊长径、短径、周长、面积、卵形指数的累加和、均值、中值、最大值、最小值、标准差及95%可信区间等一系列形态学参数。获得的资料是精确的,为鉴别人源隐孢子虫提供了科学信息。     

改进的抗酸染色技术在提高麻风杆菌检出率中的应用

目的将传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行改进,提高麻风杆菌的阳性检出率。方法对商洛疗养院68例麻风病人和121例疑似病例用传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法和改进的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行实验室检测,病理切片做进一步比较。结果改进的抗酸染色法麻风杆菌阳性检出率明显高于传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法,前者阳性检出率为70.4%,后者为44.4%,差异有统计学意义(χ2=7.07,P0.05)。改进的抗酸染色法麻风杆菌切片着色率高、染色效果佳。结论改进的抗酸染色法优于传统的抗酸染色法,为麻风病的实验室诊断和筛查提供了靶方向。     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5minvs24h)。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

改良抗酸染色法检测胸腔积液中结核分枝杆菌对结核性胸膜炎的诊断

目的 评价改良抗酸染色法在结核性胸膜炎的诊断价值.方法 选取2013年10月至2015年02月于西安市胸科医院诊治的胸腔积液患者, 纳入实验组即结核性胸腔积液115例, 对照组恶性胸腔积液36例, 分别应用改良的抗酸染色法、传统的Ziehl-Neelsen染色法、BACTEC-MGIT 960培养检测, 将BACTEC-MGIT 960培养结果作为参考标准, 确定两种染色方法的灵敏度和特异性.结果 以培养结果作为参考标准, 改良染色法的灵敏度, 特异度, 阳性预测值 (PPV) , 和阴性预测值 (NPV) 分别为72.2%, 100%, 100%, 和52.9%;传统染色法分别为0, 100%, 0, 和23.8%.结论 改良抗酸染色法可明显提高结核性胸膜炎的阳性诊断率, 具有简便、快速、准确的优点, 能为结核性胸膜炎的诊断提供病原学依据, 值得临床推广应用.     

萋-尼染色导致的总挥发性有机物污染及其控制方法

目的 建立一种改良抗酸染色冷染方法,用以控制实验室总挥发性有机物(total volatile organic compound,TVOC)污染.方法 采用TVOC检测仪定量测定实验室内空气中的苯系物和TVOC污染程度;以卡介苗(bacillecalmette-guerin,BCG)为染色标本,配制含有1％ Triton X-100标本稀释液和初染液,建立不用加温助染的抗酸染色冷染法替代传统抗酸染色法.结果 传统萋-尼抗酸染色时,室内TVOC污染在12 min时间点即高达1 014 ppb(约1 mg/m3),成倍超过国家室内卫生标准(GB50325-2010)规定值(500 ppb,即0.5 mg/m3);同样条件下,用改良冷染法染色期间,室内TVOC量有所增加,但在试验期间最高值为387 ppb,保持在国家室内卫生标准容许限度以下;利用Triton X-100建立的改良抗酸冷染法具有抗酸染色特性,其对抗酸杆菌的可检测度为3×10-6～6 × 10-5 CFU/mL.结论 抗酸染色冷染法可用于替代传统萋-尼抗酸染色,从而控制实验室的TVOC污染问题.     

PCR技术、抗酸染色法在肺结核病理学诊断中应用比较

目的：比较 PCR技术、抗酸染色法在肺结核病理学诊断准确性。方法方便选择2014年3月—2015年10月该院收治的60例疑似肺结核病患者,采用超声纤维支气管镜获取肺泡液及病灶组织条后送 PCR技术、抗酸染色法。结果肺结核病43例中,PCR法83.72%优于抗酸染色法结果阳性为41.86%,差异有统计学意义(χ2=16.1250,P<0.0001)。60例患者中抗酸染色法诊断符合率58.33%,PCR法88.33%,差异有统计学意义(χ2=13.8068,P=0.0002)。结论PCR技术的检出率较高,可在肺结核早期诊断与治疗中发挥更大作用。     

鲁中南人体隐孢子虫感染情况调查

1989年至1990年,在鲁中南部分地区进行了人体隐孢子虫感染情况的调查,用改良抗酸染色法共粪检1835份,查出隐孢子虫卵囊阳性者15例,平均感染率为0.82％;其中14例为5岁以下的儿童,仅1例为成人。并对发病情况和流行因素进行了调查。     

3种不同染色方法对抗酸染色的影响

目的 评价3种不同染色方法对检出抗酸杆菌的影响. 方法 收集2012-2015年存档的结核和麻风病例60例,分别采用不同的染色方法进行抗酸染色:第1种方法为传统的Ziehl-Neelsen染色法;第2种方法是将脱蜡液由二甲苯改为松节油和汽油的混合液,且染色后不脱水,不透明,直接烘干、盖片;第3种方法是在第2种方法的基础上使用了添加表面活性剂Triton-100的染液.比较3种不同染色方法的染色效果及抗酸杆菌的检出率. 结果3种方法的检出率分别为第1种方法20％、第2种方法31.7％、第3种方法41.7％,其中第3种方法与另外2种方法比较差别均具有统计学意义(P1vs3＜0.001,P2vs3=0.031). 结论 添加表面活性剂Triton-100的染液,染色效果及抗酸杆菌的检出率明显升高,具有较高临床应用价值.     

电子支气管镜下取分泌物结核菌培养对支气管、不典型肺结核的诊断价值

目的评价BF260电子支气管镜下取分泌物用培养法对不典型肺结核的诊断价值。方法选自门诊和住院病人无痰或痰抗酸杆菌涂片检查屡为阴性的疑似肺结核患者,电子支气管镜下取分泌物培养结核杆菌。结果82例检出结核菌19株,培养阳性率为23.17%。同时做痰液培养生长2株,培养阳性率为3.66%。两者比较,差异明显,χ2=34.11,P<0.05;用支气管分泌物直接涂片检出抗酸杆菌5例,涂阳率6.10%,与培养比较,χ2=9.512,P<0.05。结论用支气管分泌物对无痰或痰抗酸杆菌涂片检查屡为阴性的肺结核患者行结核菌培养的方法,能明显提高结核菌的检出率,对临床不典型肺结核的明确诊断有重要价值。     

聚合酶链反应在胸部结核诊断中的应用

应用聚合酶链反反(Polgmerase chain reaction,PCR)技术检测胸部结核患者的痰液和胸水,并与抗酸染色方法进行对比。结果两种方法在47例患者中两种标本的阳性率分别为:77.4％、58.83％和11.43％、8.33％,两者差异具有非常显著性,P<0,01显示PCR具有较高的特异性和灵敏性,值得推广应用。