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目的 分析DNA实时荧光恒温扩增法(简称“恒温扩增法”)在结核病临床检测中的应用价值。 方法 收集2019年1—6月西安市胸科医院收治的疑似肺结核患者2421例,其中共有356例患者留取的痰液标本同时进行了BACTEC MGIT 960液体培养、利福平耐药实时荧光定量核酸检测(GeneXpert MTB/RIF法)、传统DNA实时荧光定量核酸检测(FQ-PCR法)、结核分枝杆菌RNA实时荧光恒温扩增(SAT-RNA法)、恒温扩增法检测。以MGIT 960技术检测结果为金标准,计算其他4种检测技术的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值。对恒温扩增法阳性的121份核酸样本使用熔解曲线法检测利福平ropB基因,研究恒温扩增法提取核酸应用于耐药基因检测的价值。 结果 以MGIT 960技术检测结果为金标准,恒温扩增法的敏感度(78.83%,108/137)低于GeneXpert MTB/RIF法 (95.62%,131/137),高于FQ-PCR法(74.45%,102/137)和SAT-RNA法(59.12%,81/137),差异均有统计学意义(χ 2值分别为47.437、43.654、29.467,P值均<0.001)。GeneXpert MTB/RIF法的ROC曲线下面积最大(0.910),随后依次为恒温扩增法(0.860)、FQ-PCR法(0.854)、SAT-RNA法(0.789)。恒温扩增法阳性的核酸标本用熔解曲线法检测利福平ropB耐药基因,原核酸和稀释5倍后核酸荧光检测的dt值(探测时间,detection time,1dt=1min)在26~30时,ropB基因的检出率分别为93.55%(29/31)和90.32%(28/31);dt值在15~25时,ropB基因的检出率分别为94.44%(34/36)和100.00%(36/36)。结论 通过与各种检测技术比较,恒温扩增法具有临床应用价值,并适用于基层医院的结核病诊断。 相似文献
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搜集全部2017年9月至2019年8月西安市胸科医院确诊的结核病住院患者546例作为研究对象,评价荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的临床应用价值。收集患者痰标本,每份标本量均不少于2ml。经菌种鉴定,最终纳入531例(株)为研究对象。每例患者采用同一标本进行BACTEC MGIT 960液体培养药物敏感性试验(简称“MGIT 960药敏试验”)和熔解曲线法耐药基因检测,对MGIT 960药敏试验和熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药性结果不一致者采用基因芯片法耐药基因检测对熔解曲线法结果进行验证。以MGIT 960药敏试验检测结果为参考标准,熔解曲线法检测肺结核患者痰标本MTB对链霉素耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为86.67% (39/45)、99.38% (483/486)、98.31% (522/531)和0.887;检测肺结核患者痰标本MTB对异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为69.23% (54/78)、98.68% (447/453)、94.35% (501/531)和0.751;检测肺结核患者痰标本MTB对利福平耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为87.50% (42/48)、96.89% (468/483)、96.05% (510/531)和0.778;检测肺结核患者痰标本MTB对乙胺丁醇耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为50.00% (9/18)、98.83% (507/513)、97.18% (516/531)和0.531。在熔解曲线法检测结果为耐药而MGIT 960药敏试验为敏感的30例患者中,熔解曲线法检测结果显示:对异烟肼耐药的6例均为katG 315位密码子突变;对利福平耐药的15例中,ropB 507-512、ropB 521-528、 ropB 529-533位密码子突变分别为3例、3例、9例;对链霉素耐药的3例均为rrs 513-517位点突变;对乙胺丁醇耐药的6例均为embB 306位密码子突变。基因芯片法耐药基因检测结果显示:对异烟肼耐药的6例中katG 315 (AGC→ACC)突变和katG 315 (AGC→AAC)突变各3例;对利福平耐药的15例中,ropB基因511位CTG→CCG突变、526位CAC→TAC突变和531位TCG→TGG突变各3例、3例、9例,与熔解曲线法检测结果一致。可见,荧光PCR探针熔解曲线法对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇耐药性突变位点检测具有较好的检测效能,可用于临床上对一线抗结核药品耐药情况的快速筛查。 相似文献
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目的 评价基因芯片技术与线性探针技术(GenoType MTBDRplus)快速检测MTB耐药性的临床应用价值。方法 选取西安市胸科医院2017年4月至2018年8月住院治疗的493例涂阳肺结核患者作为研究对象,收集其痰标本,痰标本量均不少于2ml。每例患者用同一份痰标本分别进行基因芯片检测、线性探针检测和BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960液体培养”),同时对培养阳性且鉴定为MTB的临床分离株进行MGIT 960液体药物敏感性试验(简称“药敏试验”)。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,分析基因芯片技术及线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性的效能。结果 454例研究对象同时具有3种药敏试验检测结果。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,基因芯片法和线性探针法检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为89.0%(65/73)、96.1%(366/381)、0.82和90.4%(66/73)、96.1%(366/381)、0.83;检测涂阳肺结核患者痰标本MTB异烟肼耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为80.2%(93/116)、96.7%(327/338)、0.80和81.9%(95/116)、97.0%(328/338)、0.82。454例涂阳肺结核患者痰标本中,453例应用2种分子生物学检测方法检测MTB利福平耐药性结果相同,符合率为99.8%;445例应用2种分子生物学方法检测MTB异烟肼耐药性结果相同,符合率为98.0%。结论 基因芯片技术和线性探针技术(GenoType MTBDRplus)检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性与MGIT 960液体药敏试验具有较高的一致性,二者均可为临床提供快速、特异的耐药检测结果。 相似文献
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目的 探讨超声电导经皮透药治疗复治空洞性肺结核的临床疗效.方法 选择西安市结核病胸部肿瘤医院2011年12月至2012年8月,经痰涂片或痰结核分枝杆菌培养确诊为复治继发性涂阳肺结核且合并空洞者183例,按照完全随机法(抽签法)分为化疗联合超声电导组(92例)、单纯化疗组(91例),两组化疗方案均为2 HRZES/6 HRE,超声电导组在全身化疗的基础上加用超声电导经皮透药治疗(采用超声电导仪及超声电导凝胶贴片进行药物靶位透入,凝胶贴片含有异烟肼注射液0.1g),观察治疗后1、3、6个月3个时间点各组患者的症状改善情况、痰菌阴转率、结核病灶治疗有效率、结核空洞治疗有效率、并发症及不良反应.结果 超声电导组2例患者因经济原因未完成疗程退组,单纯化疗组1例患者因出现严重肝损伤退组,共计3例患者观察期未满1个月.超声电导组治疗后1、3和6个月时痰菌阴转率分别为50.00%(45/90)、66.67%(60/90)和83.33%(75/90),显著高于单纯化疗组(31.11%,28/90;40.00%,36/90;52.22%,47/90),差异有统计学意义(x2值分别为6.660、12.857、19.943,P值均≤0.01);结核空洞超声电导组治疗有效率为40.00%(36/90)、50.00%(45/90)和83.33%(75/90),显著高于单纯化疗组(15.56%,14/90; 31.11%,28/90;50.00%,45/90),两组差异有统计学意义(x2值分别为13.460、8.149、22.540,P值均<0.01);超声电导组与单纯化疗组不良反应发生率(分别为10.00%,9/90;14.44%,13/90),差异无统计学意义(x2=0.829,P=0.363).结论 超声电导经皮透药治疗复治空洞性肺结核可以提高患者的痰菌阴转率及空洞治疗有效率,是一种结核病治疗的新型给药途径. 相似文献
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目的:探讨脑脊液(CSF)中腺苷脱氨酶(ADA)水平检测在结核性脑膜炎(TBM)早期诊断中的价值。方法:收集以头痛、发热、精神状态改变和脑膜刺激征为特征的疑似TBM患者65例为研究对象。根据确诊结果将所有患者分为TBM组(45例)和非TBM组(20例)。所有患者在住院后2周内进行腰椎穿刺术,留取CSF,检测并比较两组患者CSF中ADA水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估ADA对TBM的早期诊断价值。结果:TBM组CSF中ADA水平在3~26 U/L,中位数(四分位数间距)为8(6,10)U/L。非TBM组CSF中ADA水平在0~5 U/L,中位数(四分位数间距)为1(0,2.75)U/L。TBM组患者CSF中ADA水平高于非TBM组(Z=-6.176,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,当CSF中ADA水平为4.5 U/L时,其诊断TBM的曲线下面积(AUC)为0.98,敏感度为93.33%,特异度为90.00%。结论:TBM患者CSF中ADA水平升高,在TBM早期诊断中具有较高的敏感性和特异性。 相似文献
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目的 分析本院结核分枝杆菌的耐药情况及趋势,为耐药结核病的预防及治疗提供参考依据。方法 对2015-2018年本院门诊、住院病人,共9050例结核分枝杆菌的一线和二线抗结核药物耐药情况进行回顾性分析。结果:四年中,本院结核菌培养的阳性率有所上升,但是总体耐药率基本不变(平均35.03%)。单耐药的耐药率有所下降(〖XC小五号.EPS;P〗=13.76,P=0.003),而耐多药和一线4种耐药的耐药率有所上升(耐多药〖XC小五号.EPS;P〗=19.84,P<0.001;一线4种耐药〖XC小五号.EPS;P〗=18.97,P<0.001)。异烟肼、链霉素、乙胺丁醇、利福平、阿米卡星和丙硫异烟胺的耐药率都有所上升(分别为〖XC小五号.EPS;P〗=12.57,P=0.006;〖XC小五号.EPS;P〗=17.02,P=0.001;〖XC小五号.EPS;P〗=13.68,P=0.003;〖XC小五号.EPS;P〗=25.60,P<0.001;〖XC小五号.EPS;P〗=12.82,P=0.005;〖XC小五号.EPS;P〗=11.19,P=0.011)。结论 单耐药减少,但耐多药和任意药物的耐药率增加,显示结核菌耐药形势严峻,应加强合理治疗和管理患者,并加快新药研发。 相似文献
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结核病病原学研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
近年来 ,结核病疫情在世界范围内有回升趋势 ,是危害人类健康的主要传染病。结核病特点 :临床疗效差、慢性迁延不愈、易复发、恶化。随着细胞免疫学、分子生物学及分析微生物学的发展 ,对结核病病原学的研究有了新的发现 ,认为结核病难治的主要原因之一为结核分支杆菌的变异 ,包括 :耐药性变异、毒力变异、L型变异及休眠菌形成等。现简述如下。1 结核分支杆菌基因研究进展1 .1 结核分支杆菌基因组 1 998年全国第一个结核分支杆菌标准株 H3 7Rv的全基因图谱完成是结核病研究的重要进展 [1 ] 。 H3 7Rv基因组包含 441 1 5 2 9个碱基对 ,… 相似文献
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目的 分析结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测恶性肿瘤并发结核病患者的应用价值。方法 选取西安市胸科医院2016年1—12月期间收治确诊的恶性肿瘤并发结核病的患者102例、恶性肿瘤患者64例、单纯结核病患者80例。抽取研究对象外周血并分离出外周血单个核细胞(PBMC),分析T-SPOT.TB检测不同人群的结果。同时分析T-SPOT.TB检测恶性肿瘤并发结核病患者的敏感度和特异度,及其与抗酸染色和(或)病理检查结果的一致性。结果 T-SPOT.TB检测恶性肿瘤并发结核病组阳性率为85.29%(87/102),检测恶性肿瘤组的阳性率为26.56%(17/64),差异有统计学意义(χ 2=57.97,P<0.01);检测单纯结核病组的阳性率为91.25%(73/80),与恶性肿瘤并发结核病组比较,差异无统计学意义(χ 2=1.50,P=0.221);进一步比较A、B抗原反应点数,恶性肿瘤并发结核病组与单纯结核病组患者A抗原阳性斑点数的中位数(四分位数:Q1,Q3)分别为56.50(30.25,83.25)个和45.50(32.00,75.00)个;B抗原阳性斑点数的中位数(四分位数:Q1,Q3)分别为63.50(43.25,98.00)个和55.00(24.00,101.50)个,两组比较差异均未见统计学意义(Z值分别为-0.66和-0.30,P值分别为 0.539和0.796)。T-SPOT.TB 检测恶性肿瘤并发结核病患者的敏感度和特异度分别为85.29%(87/102)和73.44%(47/64);与抗酸染色和(或)病理检查比较,T-SPOT.TB检测的Kappa值为0.61。 结论 T-SPOT.TB检测对恶性肿瘤并发结核病患者有较好的检测效能,可用于辅助诊断。 相似文献
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目的 探讨应用结核抗体IgG检测试剂盒辅助诊断结核病的价值。方法 选择2013年1月至2016年12月在西安市胸科医院明确诊断为结核病的患者795例(TB组)、非结核分枝杆菌病的患者36例(NTM组),及除外TB与NTM的其他肺部疾患的患者185例(对照组)。回顾性分析所有患者采用结核抗体检测的结果,以临床诊断及结核分枝杆菌培养结果为标准计算结核抗体检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等,TB组与NTM组、对照组阳性率的比较采用卡方检验,评价结核抗体检测的应用价值。结果 以临床诊断为标准,结核抗体IgG检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、漏诊率、误诊率、患病率、准确度、约登指数分别为42.01%(334/795)、82.81%(183/221)、89.78%(334/372)、28.42%(183/644)、57.99%(461/795)、17.19%(38/221)、78.25%(795/1016)、50.89%(517/1016)、0.25;以结核分枝杆菌培养结果为标准,结核抗体检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、漏诊率、误诊率、患病率、准确度、约登指数分别为51.12%(160/313)、69.84%(491/703)、43.01%(160/372)、76.24%(491/644)、48.88%(153/313)、30.16%(212/703)、30.81%(313/1016)、64.07%(651/1016)、0.21。TB组、NTM组、菌阳肺结核、菌阴肺结核、结核性脑膜炎、结核性胸膜炎和(或)腹膜炎、结核性心包炎的结核抗体检测的阳性率分别为42.01%(334/795)、61.11%(22/36)、50.00%(80/160)、41.99%(97/231)、46.43%(13/28)、38.76%(138/356)、30.00%(6/20),各类结核病结核抗体检测阳性率差异无统计学意义(χ 2=7.14,P=0.128)。而TB组(42.01%,334/795)、NTM组(61.11%,22/36)、对照组(8.65%,16/185)中以NTM组结核抗体检测阳性率最高,三组差异有统计学意义(χ 2=81.63,P=0.000)。 结论 应用结核分枝杆菌抗体IgG检测的敏感度、准确度均较低,漏诊率、误诊率均较高,不建议临床继续应用。 相似文献