survivin、P53蛋白在非小细胞肺癌的表达及其相关性研究

目的 :研究survivin、P5 3蛋白在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织的表达及其生物学意义 ,并探讨其相关性。　方法 :用免疫组化 (S P法 )染色技术对 95例NSCLC组织石蜡标本进行survivin、P5 3蛋白表达的检测和分析。　结果 :survivin、P5 3在肺癌细胞中阳性表达率 (6 2 .1 %、5 5 .8% )明显高于癌旁的正常肺组织 (1 4 %、7% ) (P <0 .0 1 )。survivin的表达与肿瘤病理分级、组织学分型、淋巴结转移、TNM分期无明显相关 (P >0 .0 5 ) ;P5 3表达与淋巴结转移相关 (P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤病理分级、组织学分型、TNM分期无明显相关 (P >0 .0 5 ) ;此外 ,survivin与P5 3蛋白的表达呈显著正相关 (r =0 .5 72 ,P <0 .0 1 )。　结论 :凋亡抑制蛋白survivin与突变型P5 3蛋白在NSCLC的发生发展中可能起协同作用 ,也提示抑癌基因p5 3(野生型 )可能对survivin的表达起负反馈调节作用。survivin和P5 3蛋白可作为靶点用于NSCLC靶向治疗的研究     

MCT1、CD147、CD44蛋白在非小细胞肺癌中的表达相关性及意义

目的:探讨单羧酸转运蛋白1(Monocarboxylate transporters 1,MCT1)、CD147、CD44蛋白在非小细胞肺癌(Non-smallcell lung cancer,NSCLC)表达相关性及其在NSCLC发生发展、预后中的意义。方法:取经病理确诊的50例NSCLC患者癌组织(肺癌组)、远癌组织(距肿瘤边缘大于5 cm,远癌组)和21例肺良性病变组织(对照组)。采用免疫组化方法检测MCT1、CD147、CD44蛋白表达。结果:(1)肺癌组中MCT1、CD147、CD44蛋白的阳性表达均明显高于远癌组和对照组(P<0.05);(2)MCT1在肺癌细胞膜中表达与CD147、CD44蛋白表达(χ2=7.284,P=0.007;χ2=6.522,P=0.011)均存在相关性;(3)MCT1、CD147、CD44蛋白的表达与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤大小、PTNM分期均无关,但与肿瘤的组织类型(χ2=12.888,P=0.039;χ2=3.997,P=0.043;χ2=3.982,P=0.000;χ2=7.670,P=0.035)、淋巴转移(χ2=13.406,P=0.021;χ2=13.406,P=0.021;χ2=11.809,P=0.039;χ2=12.493,P=0.000)显著相关,另外MCT1(细胞膜)蛋白表达还与肿瘤分化程度(χ2=7.135,P=0.013)及吸烟史(χ2=6.623,P=0.010)显著相关,CD44与肿瘤的分化程度显著相关(χ2=5.486,P=0.000)。结论:在NSCLC患者组织中MCT1、CD147、CD44蛋白表达均高于癌周组织及肺良性病变组织,统计结果显示3者在NSCLC细胞膜表达具有显著相关性。MCT1、CD147、CD44可能参与肿瘤的发生、发展及远处淋巴结转移,它们可能作为检测NSCLC和预后评价指标。     

PCR—SSCP法检测非小细胞肺癌中FADD基因突变的研究

目的：检测Fas相关死亡结构域蛋白（Fas—associated death domain protein，FADD）基因在人非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）中的突变情况，以探讨该基因在肺癌发生发展中的作用及机制。方法：采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（polymerase chain reaction and single—strand conformation polymorphism，PCR—SSCP）检测74例NSCLC原发灶癌组织及13例癌旁正常肺组织中FADD基因突变情况。结果：74例NSCLC组织中检出5例发生FADD基因突变，FADD基因突变与癌的淋巴结转移呈显著正相关（ri=0．378，P=0．001），与其它临床病理特征无关。结论：NSCLC中存在着FADD基因突变。FADD基因突变在NSCLC的发生发展中可能起着重要作用。     

磷酸化Akt蛋白表达在非小细胞肺癌中的临床意义

目的　探讨磷酸化Akt(p Akt)蛋白表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理参数及预后的关系。方法　应用免疫组织化学SP法检测2 0例正常肺组织和10 2例NSCLC患者癌组织中p Akt蛋白的表达,NSCLC患者随访时间为3～6 0个月。结果　NSCLC癌组织中p Akt蛋白表达的阳性率为4 1 2 % (42 / 10 2 ) ,而正常肺组织为阴性。p Akt蛋白阳性与肿瘤组织分化程度、临床分期以及有无淋巴结和远处转移相关。p Akt蛋白阳性表达者5年生存率和中位生存时间显著低于阴性者(分别为14 2 9%和33 33% ;14个月和32个月,Logrank检验χ2 =14 2 4 ,P =0 0 0 0 2 )。结论p Akt蛋白表达与NSCLC发展有关,是预测NSCLC患者不良预后的独立危险因素     

非小细胞肺癌Bax蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

①目的　探讨非小细胞肺癌Bax蛋白表达与细胞凋亡和增殖的关系。②方法　采用免疫组化SABC法 ,检测 4 3例非小细胞肺癌及 2 0例癌旁正常肺组织石蜡包埋标本Bax蛋白及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达 ;以PCNA标记细胞增殖指数 (MI)检测其增殖活性 ;用TUNEL法检测细胞凋亡 ,并计算细胞凋亡指数 (AI)。③结果肺癌组织Bax蛋白的表达显著低于癌旁正常肺组织 (χ2 =5 .6 5 3,P <0 .0 5 ) ;肺癌组织中AI和MI均明显高于癌旁正常肺细胞 (t′ =8.2 79、9.6 2 0 ,P <0 .0 0 1) ;Bax蛋白表达阳性的肺癌组织细胞AI明显高于Bax表达阴性细胞 (t=2 .6 17,P <0 .0 5 )。④结论　肺癌组织Bax蛋白表达下调 ,细胞增殖及凋亡均较活跃 ;Bax蛋白的过度表达具有促进肺癌细胞凋亡作用     

Survivin在非小细胞肺癌组织中的表达与细胞凋亡和增殖的关系

目的　探讨Survivin在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达与细胞凋亡和增殖的关系。方法　免疫组织化学S -P法检测 10例正常肺组织和 5 7例NSCLC组织中Survivin及增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ;原位末端标记法 (TUNEL)标记凋亡细胞。结果　Survivin蛋白在正常肺组织中不表达。 5 7例NSCLC组织中Survivin蛋白阳性表达率为 5 9.6 % (34/ 5 7) ;Survivin阳性组平均凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)显著低于阴性组 (P <0 .0 5 ) ,Survivin表达与AI呈负相关 (r=- 0 .4 2 0 ,P <0 .0 1) ;Survivin阳性组平均增殖指数 (proliferativeindex ,PI)显著高于阴性组(P <0 .0 5 ) ,Survivin表达与PI呈正相关 (r=0 .4 5 9,P <0 .0 1)。结论　Survivin在NSCLC组织中表达上调 ,可抑制肿瘤细胞凋亡、促进细胞增殖 ,在肿瘤的发生、发展中起到重要作用。     

程序性死亡受体配体1和E3泛素连接酶Cbl-b在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)和E3泛素连接酶Cbl-b蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法选取2004年7月至2009年6月河南省肿瘤医院保存的NSCLC组织标本及癌旁组织标本各165例,制作组织切片。采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达,并分析NSCLC组织中PD-L1与Cbl-b蛋白表达的关系,以及PD-L1、Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率分别为72. 73%(120/165)、38. 79%(64/165),癌旁组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率均为7. 88%(13/165); NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率显著高于癌旁组织(χ~2=5. 292、3. 076,P <0. 05)。PD-L1蛋白表达与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数、病理类型及病理分级无关(P> 0. 05)。Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者的性别及肿瘤病理类型有关(P <0. 05),与患者的年龄、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数及病理分级无关(P> 0. 05)。NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达呈直线关系(R2=0. 075,P <0. 01),其模型为y=21. 464 93+0. 532 65x。PD-L1蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位总生存期(OS)分别为45. 0、52. 0个月,PD-L1蛋白高表达与低表达NSCLC患者的中位OS比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。75例鳞状细胞癌患者中,PD-L1蛋白高表达和低表达患者的中位OS分别为45. 0、81. 0个月,PD-L1蛋白高表达的鳞状细胞癌患者的中位OS显著短于低表达患者(P <0. 05)。90例腺癌患者中,PD-L1高表达和低表达患者的中位OS分别为50. 0、39. 0个月,PD-L1高表达与低表达腺癌患者的中位OS比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。Cbl-b蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位OS分别为39. 0、54. 5个月,Cbl-b蛋白高表达患者的中位OS显著短于低表达患者(P <0. 05)。结论 Cbl-b和PD-L1蛋白在NSCLC组织中均呈高表达。PD-L1与Cbl-b蛋白表达呈直线相关。Cbl-b蛋白表达情况与NSCLC患者的性别、病理类型及OS有关。PD-L1蛋白表达与鳞状细胞癌患者的生存期有相关性,但PD-L1蛋白表达与腺癌患者的生存期无相关性。     

Fas和Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达

目的探讨Fas和Ki-67在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVison法检测Fas和Ki-67在60例NSCLC及18例癌旁正常肺组织中的表达。结果在NSCLC组织中,Fas表达率显著低于癌旁正常肺组织(χ2=6.94、14.30,P<0.05),并与NSCLC的病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(χ2=7.17~10.90,P<0.05);Ki-67表达率显著高于癌旁正常肺组织(χ2=18.80、14.20,P<0.01),并与NSCLC的病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(χ2=8.47~13.10,P<0.05)。分化程度低、已发生转移的肺癌Fas表达水平显著降低,而Ki-67表达水平显著升高。在NSCLC组织中,Fas和Ki-67表达水平呈负相关(2χ=3.93,P<0.05)。结论Fas和Ki-67表达异常与肺癌发生、发展及转移关系密切,对判断肺癌恶性程度及预后有重要参考价值。     

Survivin和NF-κB在肝细胞癌中的表达

①目的　探讨凋亡抑制因子Survivin和核因子NF κB在肝细胞癌 (HCC)组织的表达情况及与临床病理特征的关系。②方法　采用免疫组化方法检测 4 1例HCC中Survivin和NF κB蛋白的表达情况 ,以相应癌旁肝组织、肝硬化组织 (10例 )、肝血管瘤旁正常肝组织 (11例 )作对照 ,并分析其与病理特征的关系。③结果　Survivin蛋白在HCC组织阳性表达率为 4 8.8% ,在对照组中不表达 ,二者比较差异有显著性 (χ2 =37.5 3,P <0 .0 1) ;门静脉浸润者的阳性表达率显著高于无门静脉浸润者 (χ2 =5 .5 1,P <0 .0 5 ) ;肿瘤呈多发者的阳性表达率显著高于单发者(χ2 =3.98,P <0 .0 5 )。NF κB蛋白在HCC组织的阳性表达率为 6 8.3% ,显著高于对照肝组织 (χ2 =4 1.12 ,P <0 .0 1)。NF κB的表达与Suvivin的表达呈正相关 (r=0 .0 6 5 6 ,P <0 .0 5 )。④结论　Survivin、NF κB在HCC组织中的高表达参与了肝癌的发生、发展 ,可能的机制是抑制了肝细胞的凋亡。     

Fas相关死亡结构域蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其与癌细胞凋亡的关系

目的研究Fas相关死亡结构域(FADD)蛋白在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达,并探讨其与TCCB中癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化方法SP法检测68例TCCB及13例正常膀胱黏膜组织FADD蛋白表达。原位末端标记(TUNEL)法检测TCCB细胞的凋亡。结果正常膀胱黏膜FADD呈阳性表达,在TCCBⅠ级(G1)、Ⅱ级(G2)、Ⅲ级(G3)和浅表性(Tis～T1)、浸润性(T2～T4)肿瘤的阳性表达率分别为84.6%、48.3%、19.2%和65.6%、25.0%;FADD的阳性率在3组不同组织学分级的TCCB中差异有显著性意义(P<0.05),在两组不同临床分期的TCCB中差异有非常显著性意义(P<0.01),在复发组与未复发组分别为36.8%和53.3%,差异无显著性意义(P>0.05)。所有标本均可检测到细胞的凋亡,FADD蛋白表达水平与癌细胞凋亡程度呈显著正相关(rs=0.49,P<0.01)。结论FADD表达异常在TCCB的发展中可能起着重要作用,FADD表达水平与TCCB细胞凋亡密切相关。     

Expression of Survivin, p53 and its relationship with apoptosis, proliferation in hepatocellular carcinoma（HCC）

Objective:To investigate the expression of Survivin p53 and its relationship with apoptosis、proliferation in hepatocellular carcinoma(HCC). Methods:The expression of Survivin, p53 and the proliferation of tumor cells marked by proliferation cell nuclear antigen (PCNA) in 42 cases of HCC were assessed by immunohistochemical method. TUNEL was used to detect apoptosis. Results:Survivin protein was expressed in 30 of 42 cases of HCC(71.4%) and in 4 of 34 cases of adjacent cirrhosis tissues(11.8%). Expression of Survivin protein was negative in 10 cases of normal tissues. Survivin protein positive expression rate in HCC was significantly higher than adjacent cirrhosis tissues and normal tissues(P < 0.001). The increased Survivin protein expression in cancer was significantly associated with histological grade(P = 0.003), p53 protein(P = 0.013), survival time(P < 0.05) and the ratio of proliferative index to apoptotic index(P < 0.01), but was not significantly correlated with age, sex, clinical stage, tumor size, metastasis, AFP, HBs-Ag(P > 0.05).Conclusion:There is a marked increased expression of Survivin in HCC, which may play an important role in breaking the balance of proliferation and apoptosis of HCC cells. The correlation between Survivin and p53 expression in HCC indicates that cooperation between Survivin and p53 plays a certain role in occurrence and /or development of HCC.     

非小细胞肺癌Fas/FasL基因蛋白的表达及其临床意义

目的：研究Fas/FasL基因蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达及其临床意义。方法：应用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶（SP）法染色技术测定65例NSCLC组织标本Fas/FasL基因蛋白的表达水平，并分析其与病理类型、区域淋巴结转移、病理分级及TNM分期之间的关系。结果：NSCLC组织中Fas基因蛋白表达率显著低于正常肺组织（46．15％vs80.00%,P＜0．05），而FasL基因蛋白表达率显著高于正常肺组织（49．23%vs13.33%,P＜0．05）；FasL的表达与肺癌区域淋巴结转移有关，但Fas/FasL与肿瘤病理类型、病理分级及TNM分期无关。结论：Fas/FasL基因蛋白可能参与了非小细胞肺癌细胞凋亡的调节；检测FasL基因蛋白的表达有可能为临床判断NSCLC区域淋巴结转移、病变的发展以及评估预后提供依据。     

Expression of Angiopoietin-2 Gene in Non-small Cell Lung Cancer

Angiogenesispromotestumordevelopmentandmetastasis.Angiopoietin 2 (Ang 2 )hasbeenidenti fiedasanovelangiogenicfactorandoneligandoftheendothelialcell (EC) specifictyrosinekinasereceptorTie 2 .AlthoughtheAng 2overexpressionhasbeendemonstratedinsomemalignanttumorssuchascol orectalcancer ,gastriccancerand prostatecan cer[1- 3] ,itisstillnotwelldefinedinlungcancer .Thereforetheaimofthisstudywastoclarifythebio logicalandclinicalsignificanceofAng 2expressioninhumannon smallcelllungcancer (NSCLC)s…     

肝癌组织survivin的表达与凋亡,增殖和p53的关系

目的：研究肝癌survivin的表达与细胞增殖、凋亡以及053表达的关系．方法：应用免疫组化法检测原发性肝癌组织42例、癌旁肝硬化组织34例、正常肝组织10例中survivin,p53,增殖细胞核抗原（PCNA）的表达．应用TUNEL法检测细胞凋亡．结果：在42例肝癌组织中survivin阳性30例（71．4％）,显著高于癌旁肝硬化组织（11．8％）和正常肝组织（0％,P〈0．001）．肝癌中survivin蛋白的高表达与病理分级（P=0．003）,p53蛋白水平（P=0．008）、细胞增殖凋亡比（P=0．001）及患者生存时间（P=0．002）存在显著相关性,而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、门脉癌栓（局部转移）无显著相关（P〉0．05）．结论：肝癌组织survivin高表达在打破肝癌细胞的增生和凋亡之间的平衡中起着重要作用．Survivin可能抑制p53阴性肝癌细胞的凋亡,在肿瘤细胞的进一步恶性转化中发挥作用．     

非小细胞肺癌Bcl-2及Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

①目的探讨非小细胞肺癌Bcl-2、Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系。②方法采用SABC免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织Bcl-2、Bax蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平；用TUNEL法检测细胞凋亡情况。③结果肺癌组织Bcl-2蛋白的表达显著高于癌旁肺组织（x^2=4．74，P〈0．05）；肺癌组织Bax蛋白的表达显著低于癌旁肺组织（x^2=5．65，P〈0．05）；肺癌组织中细胞凋亡指数（AI）和增殖指数（MI）均明显高于癌旁正常肺组织（t=8．28、9．62，P〈0．01）；Bcl-2蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显低于表达阴性组（t=2．41，P〈0．05）；Bax蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显高于表达阴性组（t=2．62，P〈0．05）；Bcl-2、Bax蛋白的表达均与MI无关（t=0．70、0．22，P〉0．05）。④结论Bcl-2蛋白具有抑制肺癌细胞凋亡作用，而Bax蛋白具有促进肺癌细胞凋亡作用，因肺癌组织存在Bcl-2蛋白表达上调，Bax蛋白表达下调，导致细胞增殖和凋亡失衡，在肺癌发生、发展过程中可能具有重要作用。     

大鼠臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩时肌细胞凋亡的研究

目的 研究大鼠臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩与细胞凋亡的关系以及肌细胞凋亡的基因调控机制。方法 应用臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩的大鼠模型,采用流式细胞仪ＰＩ法、ＰＩ和ＡｎｎｅｘｉｎＶ双标记法、原位末端标记、ＤＮＡ凝胶电泳和电镜等多种方法有骼肌萎缩与细胞凋亡的关系。并用免疫组织化学和Ｎｏｒｇｔｈｅｒｍ－Ｂｌｏｔ方法检测凋亡相关基因Ｆａｓ、ＦＡＤＤ、Ｃａｓｐａｓｅ－８、Ｂｃｌ－２、Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ的表达。结     

miRNA-143在非小细胞肺癌组织中的表达

目的: 探讨微小RNA(miRNA)-143在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达水平及其与临床病理特征之间的关系.方法: 选取40例NSCLC组织及其癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测miRNA-143的表达水平,并分析其与临床病理特征之间的关系.结果: miRNA-143在NSCLC组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.05);miRNA-143的表达在不同年龄、性别、组织学类型、分化程度、TNM 分期间的差异均无统计学意义(P>0.05).NSCLC伴淋巴结转移的肺癌组织中miRNA-143的表达水平低于NSCLC不伴淋巴结转移的肺癌组织(P<0.05).结论: miRNA-143在NSCLC组织中表达下调,且可能与肺癌细胞的转移有关.     

非小细胞肺癌中DPC 4基因的表达及其与凋亡的关系

目的探讨DPC4基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与凋亡的关系。方法利用免疫组织化学S-P法检测52例NSCLC组织、19例相应癌旁正常肺组织中DPC4的表达,应用TUNEL技术对细胞凋亡情况进行了检测并计算凋亡指数。结果DPC4在肺癌原发灶中的阳性表达率为63.46%(33/52),与癌旁正常肺组织中的阳性表达率为89.47%(17/19)相比显著降低(P<0.05);DPC4与组织学类型、肿瘤细胞分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。DPC4阳性组凋亡指数(AI)明显高于DPC4阴性组(P<0.05)。结论DPC4的低表达可能是肺癌发生过程的早期事件,可促进肺癌的淋巴结转移,DPC4的高表达可能促进细胞的凋亡。     

非小细胞肺癌EGF及其受体的表达意义

目的:探讨配体EGF和受体EGFR与非小细胞肺癌(NSCLC)的临床生物学行为及预后的关系. 方法:采用免疫组化法观察NSCLC患者33例及非癌肺疾病患者7例组织标本中EGF和EGFR的表达. 结果:EGF和EGFR在NSCLC患者中过表达率分别为57.6%和63.6%,其中EGFR过表达与NSCLC患者的TNM分期呈显著正相关(P<0.05). EGF或/和EGFR过表达的NSCLC患者生存期短、预后差(P<0.01). 结论:EGF和EGFR在NSCLC的发展和转移方面起重要作用,可作为评估NSCLC进展及判断预后的指标.