强啡肽对大鼠脊髓损伤的作用及其受体机制

目的 探明强啡肽（Dyn）在继发性脊髓损伤中的作用及其受体机制。方法观察鞘内注射DynA（1-13）或联合注射Kappa阿片受体拮抗剂卡匹帕明（nor-BNI）或兴奋性氨基酸（EAA）的NMDA受体拮抗剂MK-801后运动功能和脊髓前角神经元酶组织化学的变化。结果注射30nmol DynA（1-13）3d时,Rivlin斜板临界角变化增大,前角神经元酸性磷酸酶（ACP）活性增强;14d时,Rivlin斜板临界角变化未恢复,ACP活性轻度增强。鞘内联合注射100n mol nor-BNI、100n mol MK-801后3d,Rivlin斜板临界角增大和ACP活性增强,但在14d时Rivlin斜板临界角变化明显恢复、ACP活性接近正常,与Dyn组的差异有显著性;nor-BNI组与MK-801组的差异无显著性。结论Dyn鞘内注射可损害大鼠运动功能和脊髓组织,而nor-BNI或MK-801能对抗其损害作用。Dyn的病理作用是通过Kappa阿片受体和NMDA受体两种途径介导的。     

nor－BNI拮抗不同剂量强啡肽A_（1－13）及A_（2－17）鞘内注射致瘫

利用ＳＤ大鼠，观察了预先鞘内注射阿片肽Ｋ受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ拮抗不同剂量ＤｙｎＡ＿（１－１３）及ＤｙｎＡ＿（２－１７）蛛网膜下腔注射致瘫的结果。结果表明：ｎｏｒ－ＢＮＩ能对抗低剂量，而不能对抗高剂量ＤｙｎＡ＿（１－１３）所致瘫痪；ＤｙｎＡ＿（２－１７）不作用于阿片受体，其鞘内注射仍能引起双后肢瘫痪，ｎｏｒ－ＢＮＩ对其无拮抗作用。结果提示：强啡肽Ａ在脊髓继发性损伤中的作用除经由阿片肽Ｋ受体介导外，尚存在非阿片样介导途径，强啡肽Ａ的致瘫机理是阿片样和非阿片样联合作用的结果。     

NMDA受体对烫伤应激大鼠海马糖皮质激素受体基因表达的影响

目的：观察烫伤应激后海马糖皮质激素受体（GR）基因表达的变化，探讨N－甲基－D－天冬氨酸（N－methyl-D-aspartate,NMDA）受体在这种变化中的作用。方法：利用RT－PCR技术，检测烫伤前腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK－801及激动剂NMDA对烫伤应激后2h GR mRNA水平的影响。结果：烫伤应激后2h海马GR mRNA水平明显降低（P＜0．01）；应激前腹腔注射MK－801使烫伤后降低的GR mRNA水平明显恢复（P＜0．01），注射NMDA使其进一步降低（P＜0．05），注射生理盐水无明显变化。结论：NMDA受体介导了烫伤应激导致的海马GR转录水平基因表达的下降。     

Nor—BNI在对抗强啡肽A所致大鼠脊髓损伤中的作用和意义

给ＳＤ大鼠预先鞘内注射阿片肽Ｋ受体拮抗剂Ｎｏｒ－ＢＮＩ，拮抗不同剂量ＤｙｎＡ－１３鞘内所致瘫痪的大鼠实验结果表明，Ｎｏｒ－ＢＮＩ能对抗低剂量，而不能对抗高剂量ＤｙｎＡ１－１３所致瘫痪。研究提示：强啡肽Ａ在脊髓继发损伤中的作用除经由阿片肽Ｋ受体解导外，还可能在非阿片解导途径。     

兴奋性氨基酸及其受体阻滞剂在脑缺血性大鼠海马损伤中的作用

目的：通过制作大鼠脑缺血模型和运用兴奋性氨基酸NMDA型受体阻滞剂MK－801,观察海马兴奋性氨基酸（EAA）的变化及其所致细胞结构改变。方法：采用Pulsinelli氏改良方法,分别测定大鼠海马在脑缺血不同时期EAA的改变及MK－801对EAA所致结构变化的影响。提示脑缺血时EAA明显升高,且缺血时间越长释放越多,经过MK－801治疗细胞损伤明显减少,结论：大鼠脑缺血后EAA明显升高;MK－801能阻止EAA对脑的损伤,起保护作用。     

nor—BNI拮抗不同剂量强啡肽A1—13及A2—17鞘内注射致瘫结果的比较及意义

利用ＳＤ大鼠，观察了预先鞘内注射阿片肽Ｋ受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ拮抗不同剂量ＤｙｎＡ１－１３及Ｄｙｎ Ａ２－１７蛛网膜下腔注射致瘫的结果。结果表明：ｎｏｒ－ＢＮＩ能对抗低剂量，而不能对抗高剂量Ｄｙｎ Ａ１－１３所致瘫痪；Ｄｙｎ Ａ２－１７不作用于阿片受体，其鞘内注射仍能引起双后肢瘫痪，ｎｏｒ－ＢＮＩ对其无拮抗作用。结果显示：强啡肽Ａ在脊髓继发性损伤中的作用除经由阿片肽Ｋ体介导外，尚存在非阿片样介导     

Nor－BNI在对抗强啡肽A所致大鼠脊髓损伤中的作用和意义

给ＳＤ大鼠预先鞘内注射阿片肽Ｋ受体拮抗剂Ｎｏｒ－ＢＮＩ，拮抗不同剂量ＤｙｎＡ＿（１－１３）鞘内注射所致瘫痪的大鼠实验结果表明，Ｎｏｒ－ＢＮＩ能对抗低剂量，而不能对抗高剂量ＤｙｎＡ＿（１－１３）所致瘫痪。研究提示：强啡肽Ａ在脊髓继发性损伤中的作用除经由阿片肽Ｋ受体解导外，还可能存在非阿片样解导途径。     

原代培养神经细胞膜经N—甲基—D—D天冬氨酸和MK—801作用后原子力微镜观察

目的：对比观察正常培养皮层神经元在N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）及其受体拮抗剂－MK－801作用下膜表面三维构像形态的改变。方法：利用分辨率为0．1－0．01nm的原子力显微镜（AFM）对原代培养大鼠皮层神经细胞膜表面进行纳米尺度的扫描观测。结果：正常神经元膜表面光滑，起伏均匀，隆起的颗粒状蛋白密集，间隔规律。NMDA损伤后神经元破碎，崩解，膜失去连续性，NMDA＋MK－801作用下神经元膜皱折增加，边缘粗糙，起伏程度介于前两者之间，结论：（1）AFM具有分辨率高，制样简单特点，（2）AFM能细微地分辨损伤保护作用后引起的细胞膜表面三维形态改变。（3）NMDA作用后膜结构开始解体，膜蛋白颗粒聚集增大，脂质凹陷加深，间距增宽，表面粗糙度增加。     

应用NMDA受体拮抗剂MK-801治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的：研究N－甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂MK－801对大鼠局灶性脑缺血模型的治疗作用和治疗时窗,为临床治疗提供依据。方法：采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制成局灶性脑缺血模型。以[^3H]噻吩环己哌啶（[^3H]TPC）为配基,采用宏观和微观放射自显影术观察不同时间缺血组和给药组NMDA受体通道的活性变化。结果：缺血前及缺血2h内给予MK－801（0.8mg/kg体重）可有效拮抗NMDA受体的过度激活。而缺血3h后给药则无此作用。结论：MK－801对局灶性脑缺血的治疗时窗在3h以前。     

强啡肽A1—13在新生鼠缺氧缺血性脑损伤中作用机制的实验研究

目的：探讨强啡肽A1－13在新生鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用机制。方法：将7d新生鼠左侧颈总动脉结扎并在低氧环境下制成缺氧缺血性脑损务模型，伤后即刻向小及延髓池注射强啡肽A1－13抗血清或阿片κ受体拮抗剂nor-BNI，给药后不同时间比较其对幼鼠一般状况，脑含水量，乳酸含量和细胞凋亡的影响。结果：给予强啡肽A－13抗血清或nor-BNI均可改善幼鼠伤后的一般状况，降低伤后48h左侧脑含水量和乳酸含量，而以前者作为更为明显；强啡肽抗A1－13血清可显著减轻皮层，海马细胞凋亡，nor-BNI此作用较弱。结论：强啡肽A1－13对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的影响，除通过阿片途径外，尚可能通过其它非阿片途径共同作用而实现。     

草果知母汤在阻断点燃模型形成过程中对NMDA受体及其mRNA的影响

观察抗癫痫中药草果知母汤在阻断戊四唑点燃模型形成过程中 ,对兴奋性氨基酸类神经递质Glu的受体NMDA结合力及其NMDAR1mRNA的影响。以NMDA的竞争性拮抗剂MK 80 1为对照 ,用配基受体法、原位杂交法检测相应指标的变化。结果显示 :与模型组相比 ,中药组大鼠海马NMDAR1mRNA的含量明显降低 ,差别有显著性意义 (P <0 0 5) ,MK 80 1组无明显变化 ;与模型组相比 ,中药组NMDA受体结合力明显降低 ,但差别无显著性意义 ,MK 80 1组皮层NMDA结合力明显降低 ,差别有极显著性意义 (P <0 0 1)。说明中药草果知母汤主要通过降低NMDAR1mRNA的表达来降低NMDA受体的含量。     

脊髓NMDA受体对心包内注射缓激肽诱发大鼠心脏-躯体运动反射的调节作用

目的：观察鞘内注射N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体激动剂NMDA及拮抗剂5-甲基-二氢-丙环庚烯-亚胺马来酸（MK801）对心包内注射缓激肽（BK）诱发大鼠心脏-躯体运动反射 (CMR) 的影响,探讨脊髓水平的谷氨酸受体亚型-NMDA对心脏伤害性感受的调节作用。方法：26只雄性SD大鼠随机分为BK组(n=8)、BK+NMDA组(n=6)、BK+MK801组(n=6)及BK+MK801+NMDA组(n=6),观察大鼠心包内注射BK诱发的CMR及鞘内注射药物后CMR的变化,CMR以背斜方肌肌电（EMG）反应为观测指标。结果：心包内间隔40 min 重复4次注射BK诱发的CMR无明显改变（P>0.05）;鞘内注射NMDA后EMG由基础对照的100%增加到（149.86±8.54）%,射前后EMG比较差异有统计学意义（P<0.05）;鞘内注射MK801后EMG由基础对照的100%减少到（96.22±2.31）%,但注射前后EMG比较差异无统计学意义（P>0.05）;鞘内联合注射MK801和NMDA,EMG由基础对照的100%增加到（103.09±4.13）%,但注射前后EMG比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：心包内注     

脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸受体在结肠炎大鼠内脏高敏感性中的作用

目的：通过观察大鼠结肠炎不同时期脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）的表达,探讨突触后NMDAR在内脏高敏感性中的作用。方法：成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠70只,随机分为实验组和对照组。实验组大鼠用三硝基苯磺酸（TNBS）灌肠诱导结肠炎。对照组大鼠用生理盐水灌肠。分别在灌肠后3,7,14和28d记录结肠球囊扩张下大鼠腹壁肌电活动;应用荧光免疫组织化学法观察脊髓背角NMDAR1和NMDAR2A/B的表达。结果：TNBS灌肠后3,7和14d,实验组大鼠腹肌收缩次数明显多于对照组（P<0.05）;TNBS灌肠后28d,实验组中仍有部分大鼠（2/7）腹肌收缩明显增多。TNBS灌肠后7d和14d,脊髓背角NMDAR1和NMDAR2A/B阳性细胞数明显多于对照组（P<0.05）;TNBS灌肠后28d,部分大鼠（4/7）脊髓背角深层仍有多量的NMDAR1和NMDAR2A/B阳性细胞,其计数明显多于对照组（P<0.05）。结论：NMDAR在内脏伤害性信息转导中起作用;结肠炎恢复后脊髓背角NMDAR1和NMDAR2A/B的同步上调是导致内脏敏感性持续增高的原因。     

神经生长因子对大鼠脊髓损伤后N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和神经元一氧化氮生成的影响

目的 :探讨神经生长因子 (NGF)对脊髓损伤保护作用的机制 ,为其临床应用提供理论依据。方法 :采用Allen s法以 1 0g× 2 5cm力致伤大鼠T8脊髓 ,插蛛网膜下腔导管于术后 2h、4h、8h、1 2h、2 4h注入NGF溶液 (60 μg/ 2 0 μl)或生理盐水组。采用原位杂交法检测N 甲基 D 天门冬氨酸受体 1 (NMDAR1 )和神经元型一氧化氮合成酶 (nNOS)在脊髓中的表达。结果 :与正常组比较 ,大鼠伤后脊髓前角运动神经元出现NMDAR1和nNOSmRNA的异常表达 ,NGF组与生理盐水组相比较 ,NMDAR1和nNOSmRNA异常表达减少 (P <0 0 1 )。结论 :NGF能通过抑制脊髓损伤后NMDAR1和一氧化氮 (NO)的产生 ,从而保护了损伤的神经组织。     

吗啡戒断大鼠脊髓和脑干以及前脑皮层胶质细胞源性神经营养 …

观察吗啡依赖或戒断时大鼠脊髓,脑干和皮层胶质细胞源性神经营养因子（ｇｉａｌｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）以及受体ＧＤＮＦＲ－α和ＧＤＮＦＲ－β基因的表达以及毒蕈碱乙酰胆碱受体（ｍＡｃｈ）、Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗或一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂处理后对它们合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,以β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ作为内标检测ＧＤＮＦ,ＧＤＮ     

局灶性脑缺血大鼠体内与体外结合[^3H]MK—801放射自显影的差别和意义

目的：比较体内与体外两种结合[^3H]MK－801的方式放射自显影在反映局灶性脑缺血大鼠脑内N－甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体状态上的差别和意义。方法：线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉,制成局灶性脑缺血模型。以[^3H]MK－801为配基,分别进行体内与体外受体结合实验,然后做放射自显影。结果：体内结合实验中,缺血1h、2h、4h组缺血侧损伤区纹状体、皮层[^3H]MK-801结合位点密度显著高于非缺血侧（P＜0．05）。体外结合实验中,缺血侧半脑[^3H]MK-801结合位点分布与非缺血侧无显著性差别（P＞0．05）。结论：体内受体结合实验可反映局灶性脑缺血大鼠脑内NMDA受体活性的变化,体外受体结合实验仅反映脑内存在的受体的总数量。     

Spinal cord protection: effect of N-methyl-D-aspartate receptor antagonist MK-801 for spinal cord ischemia in a rabbit model

Excitatory amino acids (glutamate, aspartate) play an important role in the ischemic cascade leading to cell death. The N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor is an excitatory amino acid (EAA) receptor, and NMDA receptor antagonists have been shown to exert a neuroprotective effect in central nervous system ischemia. The purpose of this study was to investigate the effects of noncompetitive NMDA receptor antagonists MK-801 and to observe the changes in EAAs after spinal cord ischemia in a rabbit model. Spinal cord ischemia was induced by clamping the infrarenal abdominal aorta for 24 min. Group 1 (n = 6) received no pharmacologic infusion. Group 2 (n = 5) was administered an intra-aortic hypothermic MK-801 (1 mg/kg) solution and group 3 (n = 6) was administered an intra-aortic normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution immediately after clamping of the abdominal aorta. We evaluated the neurological function at 12, 24 and 48 hrs after spinal cord ischemia. A histopathologic study was carried out 72 hrs after spinal cord ischemia, and the results for groups 1 and 3 were compared. The glutamate and aspartate levels in the blood plasma were compared at pre-ischemia and at 12, 24, and 48 hrs among the groups. The perfusion of a normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution significantly reduced the neurological dysfunction and the neuronal damage. There was a significant increase in aspartate at 24 and 48 hrs in group 1, but no such increase in glutamate occurred in groups 1 and 3. In conclusion, these data provide the evidence that therapeutic intervention with MK-801 (2 mg/kg) in the early period of spinal cord ischemia is beneficial in reducing neurological dysfunction and neuronal damage.     

NMDA受体与NOS在大鼠脊髓中间外侧柱的定位和生后发育

目的 探讨N-甲基-天冬氨酸受体（NMDAR1和NMDAR2A/B亚基）、一氧化氮合酶（NOS）及还原型辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶（NADPH-d）活性在大鼠脊髓中间外侧柱（IML）的定位与生后发育特征。方法 在甲醛固定的脊髓切片上,进行ABC法免疫染色和NADPH-d组织化学反应与半定量分析。结果 MMDAR1,NMDAR2A/B,NOS I和NADPH-d反应产物丰富地分布于IML,主要定位于神经元胞体、树突和轴突样纤维终末。在生后早期发育中它们具有明显的动态变化,生后7d(P7）有微弱或中等的表达,随后逐渐上调,P21或P28达到高峰,然后保持于此水平于成体动物。结论 NMDA受体-NO通路可能是脊髓交感节前神经元一条重要的细胞内信号途径,并参与神经元生后发育成熟的调控过程。