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1.
冷冻小动脉整体切片 (不脱钙 )是组织切片技术中的一种特殊技术方法。它可将如小鼠、大鼠的整体或大动物的局部组织器官制成切片 ,以便用于动物组织器官的研究及药物在动物体内分布的实验。切片过程中需用透明粘合胶带贴在包埋块上 ,使切下的组织片与胶带紧密粘合 ,而后可进行染色观察。目前国内在整体切片中所用的透明粘合胶带主要为进口产品 ,如 scotch80 0 ,81 0 ,6 88,85 0 ,32 5等型号的胶带。它们的共同优点是粘度强 ,透明度较好 ,但其缺点也十分突出 ,即不易干燥 ,且在进行基本的 H.E染色时 ,遇二甲苯后 ,胶带便严重卷曲 ,无法封片…  相似文献   
2.
双硒唑烷-1的动物体内抗肿瘤作用   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Eb)的动物体内抗肿瘤作用.方法:建立Lewis肺癌(1ewislung cancer,LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg和12.5 mg/kg两个剂量的Eb作为实验组,以2.0 mg/kg剂量的顺铂(DDP)作为阳性对照,以溶剂5g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射药物7 d,探讨Eb对荷瘤鼠的存活期、肿瘤的生长速度、浸润级别、细胞形态、细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:Eb能够明显抑制肿瘤生长和侵袭(高剂量Eb的肿瘤抑制率为80.31%),延长荷瘤鼠的存活期;形态学观察发现,给予Eb后肿瘤细胞核浓缩深染,分裂相细胞减少;流式细胞仪检测结果表明,Eb能够促进肿瘤细胞的凋亡.结论:新型有机硒化合物Eb在C57/BL小鼠体内能够明显抑制LLC的生长和侵袭,促进肿瘤细胞的凋亡,具有较强的抗肿瘤活性.  相似文献   
3.
脂蟾毒配基对人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预效应   总被引:14,自引:0,他引:14  
目的:观察中药蟾酥主要成分之一——脂蟾毒配基对体外培养人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预及其与细胞色素C和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活化的关系。 方法:实验于2004—09/2005—12在北京大学医学部细胞生物学系实验室完成。体外培养人胃癌BGC-823细胞系,脂蟾毒配基各组加入不同浓度的脂蟾毒配基(先用二甲基亚砜溶解,再经RPMI-1640培养液稀释至终浓度。细胞增殖及增殖抑制实验、细胞核形态观察及核DNA含量测定实验中脂蟾毒配基浓度分别为0.1,1,10μmol/L;细胞周期分布实验、细胞凋亡率实验、线粒体膜电位实验中脂蟾毒配基浓度分别为0,1,2.5,5μmol/L)。空白对照组加入RPMI-1640培养液。盐酸阿克拉霉素组加入5μmoL/L盐酸阿克拉霉素。采用酸性磷酸酶法检测细胞增殖抑制作用;细胞荧光分光光度仪观察细胞核形态及核DNA含量测定;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及其线粒体膜电位变化;Western blot检测与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。 结果:①经0.1,1,10μmol/L脂蟾毒配基分别作用24,48,72h后,细胞生长显著抑制,脂蟾毒配基对癌细胞的生长抑制百分率与剂量、时间呈正相关,其IC50分别为3.9,2.0,1.5μmol/L。②随脂蟾毒配基作用浓度和时间的延长,癌细胞核荧光强度减弱,细胞核DNA含量明显降低。③0.1,1μmol/L脂螗毒配基作用24~48h后癌细胞阻滞在S期,5μmol/L脂蟾毒配基作用72h时,细胞阻滞在G2+M期;盐酸阿克拉霉素与癌细胞作用24~48h,细胞阻滞在S期,作用72h时细胞阻滞在G2+M期。④脂蟾毒配基作用后,细胞凋亡率明显高于对照组。⑤脂蟾毒配基引起细胞线粒体膜电位下降,释放人胞质中的细胞色素C增多,促进半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白活化,抑制Bel-2蚤白表达,诱导细胞凋亡。 结论:体外实验条件下,脂蟾毒配基抑制人胃癌BGC-823细胞生长并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡作用机制与线粒体通路有关。  相似文献   
4.
目的:研究大鼠α1肾上腺素能受体在胃粘膜和粘膜下层的分布和梗阻性黄疸时密度的变化。方法:16只Wistar大鼠分成正常组与黄阻性黄疸组,每组8只。并采用光学显微镜放射自显影术。结果:大鼠胃粘膜无α1肾上腺素能受体。α1肾上腺素能受体分布在胃粘膜下层动脉平滑肌细胞表面。正常大鼠α1肾上腺素能受体密度在胃体大干胃窦,梗阻性黄疸时α1肾上腺素能受体密度明显减少。结论:由于α1肾上腺素能受体密度在胃体大于胃窦,所以交感-肾上腺素系统对胃体血流的影响大于胃窦。梗阻性黄疸α1肾上腺素能受体明显减少,可能是胃粘膜下血管对去甲肾上腺素敏感性降低的原因之  相似文献   
5.
目的研究全合成Jaspine B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,并探讨其对细胞DNA的损伤。方法酸性磷酸酶法(APA)检测细胞增殖,荧光显微镜、透射电镜(TEM)观察细胞形态结构,DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化,流式细胞技术检测凋亡率及线粒体膜电位(ΔΨm),Western blot检测凋亡相关蛋白表达,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤。结果Jaspine B抑制细胞增殖,24、48、72h IC50分别为2.61、1.07、0.77μmol·L-1,其作用在一定范围内呈浓度和时间依赖性;细胞发生凋亡形态改变,生化特征上出现DNA梯状改变;1.50μmol·L-1及3.00μmol·L-1Jaspine B作用24h,早期凋亡细胞率分别为7.60%及15.48%,相应浓度作用48h,早期凋亡细胞率分别增至21.48%及23.60%;Jaspine B可引起ΔΨm明显下降、Cyt C水平增加,促使Caspase-3酶原剪切活化;Jaspine B作用24h,细胞出现明显DNA损伤。结论全合成Jaspine B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞抑制增殖、诱导凋亡并诱发DNA损伤,凋亡经由依赖胱天蛋白酶的内在途径发生。  相似文献   
6.
[目的]了解谱蓝菌素对口腔鳞癌及口腔正常粘膜内源性脂肪酸合成活性的抑制特点。[方法]切除口腔鳞癌患者新鲜手术标本的癌组织及正常口腔粘膜组织块,将组织块剪成细块,分变蓝菌素处理组与对照组。用[U-^14C]乙酸钠示踪,液体闪烁计数^14C的参入量,以显示脂肪酸合成活性。[结果]口腔鳞癌组织块在变蓝菌素处理1h时脂肪酸合成活性约下降19%,2h下降约64%,4h下降约87%;对照组轻度上升。口腔粘膜在变蓝菌素处理后脂肪酸合成活性略下降,至4h时仅下降20%;对照组略微上升。[结论]变蓝菌素能明显抑制口腔鳞癌组织的内源性脂肪酸合成,但对口腔正常粘膜组织作用轻微,提示口腔鳞癌脂肪酸合成途径有可能成为研发抗肿瘤治疗药物的靶目标。  相似文献   
7.
目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resihufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞.采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用:吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;Westem Blot检测与细胞调亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2μmol/L;经10μmol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RC引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochrome c,CytC)增多,促进caspase-3蛋白活化,抑制Bel-2蛋白表达。诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡.其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。  相似文献   
8.
目的 探讨在外源性层黏连蛋白(LN)与其受体结合下,姜黄素对人肝癌HepG-2细胞生长、凋亡的影响。 方法 实验分为对照组、LN组(20μg/L LN)、姜黄素组(40μmol/L 姜黄素)、联合组(20μg/L LN+40μmol/L姜黄素)。采用酸性磷酸酶法(APA)、流式细胞术(FCM)和Western blotting 法等探讨在外源性LN与其受体结合下,姜黄素对人肝癌HepG-2细胞生长、细胞凋亡率、线粒体膜电位、细胞增殖相关蛋白α-蛋白激酶(α-PKC)及细胞凋亡相关蛋白人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、Caspase-3、Bcl-2和p53表达的影响。 结果 LN组与对照组相比,细胞存活率增加。姜黄素组与联合组能显著抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,并呈时间依赖性。姜黄素组与联合组作用48h时,倒置显微镜下,细胞数量明显减少,皱缩变圆,大部分细胞悬浮;中晚期凋亡和坏死细胞比率(%)分别为97.04±1.50,98.02±1.35;细胞内钙离子浓度升高;线粒体膜电位下降;增殖相关蛋白α-PKC含量减少;凋亡相关蛋白PARP出现剪切带,Caspase-3表达下调,p53表达上调,Bcl-2表达无明显变化。 结论 在外源性层黏连蛋白与其受体结合下,姜黄素与人肝癌HepG-2细胞作用后抑制生长并诱导细胞发生凋亡;显示出姜黄素抗肿瘤作用稳定,其机制可能与上调p53,下调α-PKC有关。  相似文献   
9.
目的 探讨麦胚凝集素(WGA)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长及凋亡基因表达的影响. 方法 实验分为对照组、0.035μmol/L WGA组、0.07μmol/L WGA组、0.14μmol/L WGA组和0.28μmol/L WGA组,应用酸性磷酸酶法(APA)、流式细胞术(FCM)和Western blotting 法,探讨WGA对MDA-MB-231细胞生长、细胞凋亡率、线粒体膜电位、细胞凋亡相关基因蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)、细胞色素C表达的影响. 结果 不同浓度WGA作用24、48和72h时可抑制MDA-MB-231细胞生长;与人乳腺上皮细胞HBL-100相比,WGA对MDA-MB-231细胞的抑制作用尤为显著.光镜下观察0.14μmol/L WGA组与0.28μmol/L WGA组作用24h时,细胞密度稀疏, 体积缩小;早期凋亡率分别为(28.7±3.48)%和(30.15±3.96)%; 晚期凋亡率分别为(53.66±4.21)%和(63.18±5.53)%;线粒体膜电位平均荧光强度显著降低;凋亡相关蛋白PARP呈现剪切带, 细胞色素C表达上调. 结论 WGA抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,通过干预线粒体途径诱导细胞发生凋亡.  相似文献   
10.
制成了纯钛两段式简状光面和筒状螺旋种植体,将两种种植体种植在狗的下前磨牙区,观察5个月。结果表明,在观察期间内牙龈无炎症,种植体稳固;Χ片显示种植体与牙槽骨间没有间隙;镜下可见牙龈和种植体间形成上皮附着样结构,骨组织与种植体表面大多呈骨性愈合,简内为骨组织所充满,壁孔处有骨小梁将内外骨段相连。这为临床应用提供了依据。  相似文献   
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