肝细胞生长因子的基础研究及其临床应用进展

肝细胞生长因子的基础研究及其临床应用进展附院内科黄重敏肝脏被部分切除或损伤后，剩余的肝细胞可以分裂繁殖，使肝组织再生。促使肝细胞的这种增殖作用受到机体内两种来源￣［１］的许多因子调节。但至今发现较为特异性的而且最受到关注的主要是肝细胞生长因子（ＨＧＦ...     

醋氨酚大鼠肝细胞损伤及其机制的研究

醋氨酚（ＡＡＰ）引起大鼠肝细胞膜损伤发生在肝细胞还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）明显下降之后，提示ＧＳＨ下降是ＡＡＰ损伤肝细胞的原因之一。同步测定培养大鼠肝细胞ＧＳＨ和胞浆自由钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ）的结果证明：加１０ｍｍｏｌ／Ｌ ＡＡＰ培养２．５小时可引起ＧＳＨ显著降低，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明显升高。二巯基苏糖醇（ＤＴＴ）５ｍｍｏｌ／Ｌ可使加ＡＡＰ后，细胞ＧＳＨ仍维持较高水平，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明     

肝细胞生长因子与三七皂苷对自体肝细胞脾内移植的影响

目的：探索促进肝化脾增量及缩短其再生周期的新途径。方法：应用肝细胞生长因子（ＰＨＧＦ）与三七皂苷（ＰＮＧＳ）于自体肝细胞脾内移植（ＩＨＡＰ）的动物模型上，分别于移植术后２周、１２周时对病理组织学、电镜形态、肝化脾匀浆谷丙转氨酶含量及脾内肝细胞增殖指数等指标进行观察分析。结果：移植术后２周，三七皂苷组脾内肝细胞水肿、变性程度较轻，肝化脾匀浆丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）含量达（９２８．０±２６８．１）Ｕ／ｇ，较对照组［（６３９．４±１３８．４）Ｕ／ｇ］明显增高（Ｐ＜０．０１）；移植术后１２周，肝细胞生长因子组脾内肝细胞生长好，数量、面积大，肝化脾匀浆ＡＬＴ含量达［（２３２４．８±４００．８）Ｕ／ｇ］，增殖指数（Ｉｐ达３．８３％±０４２％［对照组分别为（１８３９．４±３６８．４）Ｕ／ｇ、２．８９％±０．４４％］，与对照组相比差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结论：三七皂苷在早期对脾内肝细胞有一定的抗损伤保护作用，而肝细胞生长因子对加速肝化脾增量及缩短其再生周期有明显作用。     

大鼠肝再生增强因子编码区的cDNA克隆和原核表达

目的：克隆大鼠肝再生增强因子（ＡＬＲ）编码区ｃＤＮＡ并进行原核表达。方法：提取新生大鼠肝脏总ＲＮＡ为模板，以寡聚ｄＴ为引物逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，再以我们设计的ＰＣＲ引物进行ＰＣＲ扩增获取大鼠肝再生增强因子编码区双链ｃＤＮＡ；以基因重组技术构建大鼠ＡＬＲ的原核表达质粒，然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌内以ＩＰＴＧ诱导表达。结果：成功克隆出大鼠肝再生增强因子编码区ｃＤＮＡ，其序列与以前报道的完全一致；构建的大鼠ＡＬＲ原核表达重组质粒在大肠杆菌内高效表达ｒＡＬＲ融合蛋白，其表达量占菌体蛋白３０％。结论：大鼠肝再生增强因子编码区ｃＤＮＡ的克隆及其在大肠杆菌的高效表达为ＡＬＲ的深入研究奠定了基础。     

重组人肝再生增强因子对大鼠实验性肝纤维化的保护作用

初步研究表明，从哺乳动物幼仔肝、胚胎肝组织提取的肝细胞生长因子（ＨＧＦ）、肝刺激物（ＨＳＳ）有抗慢性肝损伤的作用。我们以四氯化碳（ＣＣｌ４）中毒性大鼠肝纤维化为模型，研究了重组人肝再生增强因子（ｈＡＬＲ）的抗慢性肝损伤作用，结果表明，重组ｈＡＬＲ有明...     

增殖细胞核抗原及表皮生长因子受体在大鼠肝癌与胃癌中的表达

增殖细胞核抗原及表皮生长因子受体在大鼠肝癌与胃癌中的表达［阮幼冰，武忠弼，ＳＩｖａｎｋｏｖｉｃ．中华病理学杂志，１９９４，２３（５）：２７４］运用免疫组织化学方法对化学致癌剂诱发的大鼠原发性肝细胞性肝癌细胞及前胃鳞状细胞癌的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）...     

支链氨基酸强化的胃肠外营养对大鼠肝脏再生的影响

支链氨基酸强化的胃肠外营养对大鼠肝脏再生的影响贾乾斌吴言涛严律南吴红斌杜景平谭建三李双庆支链氨基酸（Ｂｒａｎｃｈｅｄ－ｃｈａｉｎＡｍｉｎｏａｃｉｄ，ＢＣＡＡ）具有促进肝脏蛋白质合成的作用［１］，可能促进肝脏再生。我们通过动物实验观察肝切除后ＢＣＡＡ强...     

大鼠肝抑素纯化及其对再生肝细胞和肝癌细胞增殖的影响

制备大鼠肝抑素（ＨＣ）纯品，研究它对再生肝细胞和肝癌细胞体外增殖的影响。用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ阴离子交换层析法提取ＨＣ纯品，用液法检测ＨＣ样品的生物活性。结果：提取的ＨＣ纯品的ＳＤＳ电泳纯度达８９．５％， Ｍｒ １３．５ × １０３；该 ＨＣ纯品对大鼠再生肝细胞和人肝癌细胞体外增殖有明显抑制作用，抑制率分别为６３．１％（０．２ ｍｇ／Ｌ）和７７．７％（０．３ ｍｇ／Ｌ），但对人胃癌细胞增殖无抑制效应。结论：结果提示提取的ＨＣ是抑制再生肝细胞和肝癌细胞增殖的特异性因子。     

大鼠肝抑素纯化及其对再生肝细胞和肝癌细胞增殖的影响

制备大鼠肝抑素纯品，研究它对再生肝细胞和肝癌细胞体外增殖的影响。用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｏｓｅ离子交换层析法提取ＨＣ纯品，用液法检测ＨＣ样品的生物活性，结果：提取的ＨＣ纯品的ＳＤＳ电泳纯度达８９．５％，Ｍｒ１３．５×１０＾３；该ＨＣ纯品对大鼠再生肝细胞和人肝癌细胞体外增殖有明显抑制作用。     

温度、pH、酶及变性剂对人HSS生物学活性的影响

温度、ｐＨ、酶及变性剂对人ＨＳＳ生物学活性的影响黄才国彭敏姜华魏善建宋树奎大量实验证实肝细胞生长刺激因子（ＨＳＳ）在人及鼠、猪、犬等动物的乳肝和再生肝中普遍存在。本室从人胎肝细胞分离提取ＨＳＳ，并初步研究了其理化性质和生物学特性［１，２］，并观察了不...     

大鼠肝抑素提取物对肝再生过程的影响

制备大鼠肝抑素，研究它对肝再生过程的影响。应用酒精沉析和超速离心法从正常大鼠肝提取肝抑素提取物（ＨＣ），将其注入肝大部切除大鼠体内。每１２ｈ一次至９６ｈ。每１２ｈ取残余肝测重量和体积，计肝细胞分裂指数（ＭＩ），用体视法测肝细胞数，用流式细胞术测分离肝细胞含不同ＤＮＡ倍体的细胞数。结果：①再生肝重量和体积增长缓慢，至９６ｈ为对照组的７１％；②肝细胞ＭＩ明显降低，ＭＩ高峰延后并为对照组的３３％；③再生肝肝细胞数增长缓慢，至９６ｈ为对照组的６９，８％；④４倍体肝细胞ＤＮＡ合成受阻，Ｓ期和８倍肝细胞数增长现象（见于对照组）消失。结论：ＨＣ提取物具有延缓肝再生的生物活性，它主要阻滞４ｎ肝细胞合成ＤＮＡ，抑制再生肝肝细胞的增殖与分裂。     

人胎肝内两种不同的促细胞分裂因子

成熟的肝脏是代谢极旺盛的器官，但其肝细胞则处于静息期（Ｇｏ期），即细胞几乎不发生分裂增殖，然而，人胎肝正处于旺盛生长状态，其肝细胞能合成ＤＮＡ和进行有丝分裂，并迅速增殖或再生，与肝生长调控有关的因子很多，目前研究较清楚，在肝细胞分裂增殖中起主要作用的有两种因子，即肝刺激因子（ＨＳＳ）和肝细胞生长因子（ＨＧＦ）。我们认为人胎肝内同时存在这两种因子，且为两种不同的促细胞分裂剂。     

肝再生增强因子(ALR)的研究进展

1994年8月,Hagiya等从新生大鼠肝组织中分离出一种热稳定性的促肝细胞增殖因子,称为肝再生增强因子（Aug- menter of liver regeneration ALR）并完成其分子克隆。近来研究表明ALR作为一种新型的促肝细胞增殖因子,与肝细胞刺     

一氧化氮在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中的作用

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中的作用。方法：采用双重结扎、切断大鼠胆总管造成梗阻性黄疸模型。分别给不同组大鼠腹腔注Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）或Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ），７ｄ后观察肝组织匀浆ＮＯ２＾－，丙二醛（ＭＤＡ），肝功能及肝组织形态改变。结果：胆道梗阻一周后，肝组织ＮＯ２＾－和ＭＤＡ含量均升高；注射Ｌ－Ａｒｇ［３００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］组大鼠肝细胞ＮＯ２＾－含量较单纯胆     

大部分肝切除后肝细胞生长因子和增殖细胞核抗原作用的研究

为了探讨肝切除后肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在肝再生中的作用，制备大鼠肝切除后肝再生模，应用免疫印迹法免疫印迹法及免疫组织化学染色分别检测ＨＧＦ的分子形式及ＰＣＮＡ的表达，结果发现，ＨＧＦ在肝切除后残存的肝组织中的含量在１２ｈ显著增加，是正常的１４倍。增加的水平维持到２４ｈ。但ＨＧＦ的重链带低于检测水平。ＰＣＮＡ在肝切除后残存的肝组织中的表达明显升高，于术后２４ｈ高峰。阳性     

肝细胞生长因子与恶性血液病的相关研究进展

肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）是1984年日本学者Nakamura等从部分肝切除大鼠血浆中分离纯化获得一种能刺激原代培养肝细胞生长、促进肝细胞DNA合成的肝源性活性因子,Nakamura又于1989年成功地克隆了大鼠和人的肝细胞生长因子（HGF）的cDNA并进行了表达。最初认为HGF是一种刺激肝细胞增生的有丝分裂原,对肝切除或化学损伤后的肝再生起重要作用。目前已知,HGF来源于间质细胞,其受体是原癌基因c-Met（C-metprotoncogene）的产物,广泛分布于上皮细胞。HGF能刺激多种类型细胞分化、增殖、再生、运动、迁移及形态的发生,是一种多功能的细胞因子。     

肝毒净护肝作用药理实验研究

实验结果表明，肝毒净能对抗Ｄ－Ｇａｌｎ所致的大鼠急性肝损伤及ＣＣｌ４所致的小鼠慢性肝损伤，主要表现在能降低急性肝损伤大鼠的死亡率，降低大鼠、小鼠血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＡＬＰ、Ｔ－Ｂｉｌｉ的含量，减少肝细胞变性和坏死，促进肝细胞再生，具有明显的护肝作用。     

大鼠肝再生增强因子的基因克隆

目的 克隆大鼠肝再生增强因子基因编码序列,并在原核细胞表达。方法 按文献报道大鼠肝再生增强因子核苷酸序列合成引物,从2周龄大鼠肝组织提取RNA,利用RT－PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区;将PCR扩增片段亚克隆到pBV221质粒,构建原核表达重组载体,导入到大肠杆菌后热诱导表达目的蛋白。结果 从大鼠肝脏的RNA中扩增到长约400bp的肝再生增强因子cDNA编码区基因,序列分析表明与文献报道一致;重组克隆经热诱导表达出分子量约15kD大小的蛋白质,与预期值一致。结论 从2周龄大鼠肝组织中成功克隆肝再生增强因子基因,并获得了原核细胞高效表达。     

丹参素对原代培养大鼠肝细胞硫代乙酰胺损伤的影响

目的：观察丹参素对大鼠肝细胞硫代乙酰胺（ＴＡＡ）损伤的影响。方法：以体外原代培养大鼠肝细胞为模型，通过检测培养上清液中ＬＤＨ逸出量和四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）显色法了解肝细胞的存活及增殖情况，同时检测细胞内、外ＳＯＤ含量。结果：丹参素在一定范围内呈剂量依赖性地刺激肝细胞增殖，而且能阻止ＴＡＡ引起的体外培养大鼠肝细胞ＬＤＨ逸出的增加、增生指数的下降以及细胞内、外ＳＯＤ活性的降低。丹参素对ＴＡＡ引起的肝细胞损伤的保护作用高于市场销售的乳猪促肝细胞生长素（ＰＨＧＦ）。结论：丹参素具有抗ＴＡＡ肝损伤和刺激损伤后肝细胞再生的作用     

肝细胞生长刺激因子生物学活性研究

应用人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞系和大鼠 肝原代培养细胞，利用［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入的方法观察从人胎肝中提取的肝细胞生长刺激物质对肝源性细胞ＤＮＡ合成的影响。