功能训练结合利他林对脑卒中后偏瘫患者康复的影响

目的探讨功能训练结合利他林对脑卒中偏瘫患者的影响，并观察利他林对康复训练的疗效的促进作用。方法将160例伴有注意力障碍的脑卒中偏瘫患者随机分为观察组和对照组，每组各80例。观察组采用功能圳练结合口服利他林的方法，对照组采用功能训练方法。在治疗前、后分别对两组患者进行注意力障碍和功能独立性评定。结果治疗后，观察组患者注意力障碍的改善明显优于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；观察组患者治疗前、后功能独立性评定总分均数的差值明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论利他林可改善脑卒中患者的注意力障碍；功能训练结合利他林改善注意力可提高脑卒中偏瘫患者的康复效果。     

解脲支原体临床分离株生物被膜药物敏感性分析

目的 检测解脲支原体(Ureaplasma urealytium, Uu)临床分离株生物被膜的形成及其对抗菌药物的敏感性,为Uu临床治疗提供参考。方法 通过结晶紫染色半定量法检测Uu临床菌株生物被膜的形成能力;采用微量肉汤稀释法检测并分析Uu临床菌株在浮游状态与生物被膜状态下对四环素、红霉素、阿奇霉素、左氧氟沙星的敏感性。结果 在所检测的25株Uu中64%(16/25)菌株能形成生物被膜,9株不能形成生物被膜。16株Uu形成生物被膜后对四环素和左氧氟沙星的最小生物被膜药物抑制浓度(minimal biofilm inhibitory concentration, MBIC)比浮游菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)高4~8倍或以上,差异有统计学意义(P＜0.05);对红霉素和阿奇霉素MBICs增加的0~2倍,差异有统计学意义(P＜0.05)。Uu形成生物被膜后对四环素和左氧氟沙星的耐药率显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05);对红霉素和阿奇霉素的耐药率无显著性差异(P＞0.05)。9株不能形成生物被膜Uu菌株,在浮游状态和生物被膜状态培养下对所选4种抗生素体外药敏试验的MIC和MBIC的差异无统计学意义(P＞0.05);对所选4种抗生素耐药率的差异亦无统计学意义(P＞0.05)。结论 Uu临床菌株多数可形成生物被膜,生物被膜形成后降低对四环素和喹诺酮类抗菌药物的敏感性,对阿奇霉素和红霉素的敏感性影响较小。阿奇霉素和红霉素可用于Uu生物被膜临床菌株的治疗。     

建构主义学习理论应用于检验医学实验课教学改革的尝试

应用和遵循建构主义学习理论和教学设计原则,对检验医学专业<临床免疫学检验>实验教学进行教学改革尝试.实践表明,建构主义学习理论应用于教学实践,能发挥学生学习的主体性,有助于提高学生的自主学习能力和对所学知识的理解;明确合作学习的理念,学会与人合作、沟通;有利于提高学生实际操作能力、分析和解决问题的能力:有助于培养学生的创新思维能力和科研素质.     

临床分离产IMP-1型金属酶非发酵菌的耐药机制研究

从临床收集耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌共50株,进行头孢他啶和2-巯基乙醇的表型协同试验(CAZ ME),然后进行金属酶IMP-1基因的PCR检测。选取IMP-1阳性株测序,用PCR方法检测有无一类整合子基因(IntI1)。表型的检测发现有28株为协同阳性,其中铜绿假单胞菌27株,鲍曼不动杆菌1株。PCR和测序检测出其中一株铜绿假单胞菌含有IMP-1基因,同时也含有IntI1基因。首次在中国西部地区发现产IMP-1型金属酶、同时也含有一类整合子的铜绿假单胞菌,对于临床上研究细菌的耐药性传播具有重要意义。     

细菌生物被膜菌群间遗传物质的转移

细菌在环境中多以生物被膜的形式存在.细菌间的基因水平转移能使细菌在短时间内产生新的基因型菌株,改变物种特征以适应环境的变化.从生物强化策略和生物被膜的结构特点来讲,在生物被膜菌群中细菌的基因水平转移更具优势和特点.     

Identification and Distribution of the Clinical Isolates of Imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa Carrying Metallo-β-lactamase and/or Class 1 Integron Genes

To investigate the distribution of the genes of two major metallo-β-lactamases (MBL; i.e., IMP and VIM) and class 1 integrons (intI) in the clinical imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa, a total of 65 isolates,from a university hospital in Sichuan between December 2004 and April 2005 were screened for MBL genes by PCR using primers specific for blaIMP-1, blaVIM and blaVIM-2 genes. The MBL-positive isolates were further assessed for class 1 integrons by PCR using specific primers. The nucleotide sequences of several PCR products were also determined. The results revealed that the blaVIM gene was found in 81.5% (53/65) of all isolates,blaVIM-2 gene was found in only 1 isolate and the intI gene was observed in 45.3% (24/53) of blaVIM-positive isolates. One isolate carried simultaneously both blaIMP-1 and intI genes, and to the best of our knowledge this is the first report of such isolate in southwest China. These observations highlight that the genes for VIM β-lactamase and class 1 integrons were predominantly present among the imipenem-resistant P. aeruginosa tested, confirming the current widespread threat of imipenem-resistant, integron-borne P. aeruginosa.     

肿瘤抗原致敏的树突状细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的研究肿瘤细胞裂解物体外致敏的树突状细胞的抗肿瘤效应.方法经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)协同诱导小鼠骨髓树突状细胞(DC)前体为DC反复冻融制备肿瘤细胞可溶性抗原,将肿瘤细胞可溶性抗原与DC共育,获得肿瘤抗原致敏的DC,将其直接作为瘤苗对荷瘤小鼠进行免疫治疗实验.结果从每只小鼠股骨中分离的DC前体细胞经GM-CSF和IL-4协同诱导,可获得(3～5)×106个树突状细胞;用肿瘤细胞可溶性抗原致敏的DC瘤苗治疗的荷瘤小鼠,其脾淋巴细胞转化率明显高于其它实验组及对照组,其瘤体生长减缓,生存时间明显延长.结论肿瘤抗原体外致敏的DC对荷瘤小鼠具有明显的免疫治疗作用,可望成为肿瘤免疫治疗的新途径.     

铜绿假单胞菌Quorum-Sensing系统中rhlR基因的克隆表达及其免疫保护性研究

目的研究铜绿假单胞菌rhlR表达产物的分子生物学特性,以及对小鼠的免疫保护作用。方法以铜绿假单胞菌标准株PAO1的基因组DNA为模板,PCR方法扩增rhlR基因。利用pGEX4T-1载体构建rhlR-pGEX4T-1重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用免疫印迹验证。同时用纯化的重组蛋白免疫小鼠,菌落计数法检测免疫组和对照组鼠肺对铜绿假单胞菌的清除率。结果rhlR的全基因序列为726bp,经序列分析和同源性比较,与GenBank中的rhlR基因(登录号:AE004768)完全一致。大肠杆菌BL21(DE3)转化重组质粒rhlR-pGEX4T-1后,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,表达的融合蛋白质相对分子质量为54×103,其中RhlR蛋白为27×103。体内实验中,免疫小鼠肺部对铜绿假单胞菌的清除率与未经免疫的正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建的rhlR-pGEX4T-1重组质粒能够在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达出具有生物学活性的RhlR蛋白。重组蛋白对小鼠表现出一定的保护作用。     

铜绿假单胞菌生物被膜形成能力与基因型的相关性分析

目的 探讨铜绿假单胞菌（PA）临床分离株的粘附性、生物被膜形成能力及其与基因型的相关性。方法 采用改良的微量平板法对临床分离的48株PA生物被膜的形成进行定量分析；通过肠杆菌基因间重复一致序列-PCR（ERIC—PCR）技术绘制48株PA的指纹图谱，应用计算机软件建立遗传相似性系数矩阵及聚类分析树状图。结果 48株临床分离PA菌株生物被膜的形成能力不同。生物被膜形成能力不同的PA在基因型上表现出多态性，PA在17％遗传相似性系数上分为A、B、C、D、E五个基因型，生物被膜形成能力强的PA大都属于D型，其遗传相似性系数为42％。结论 绝大多数临床分离的PA株具有较强的生物被膜形成能力；生物被膜形成能力不同的PA在基因型上表现出多态性；生物被膜形成能力较强的PA在基因型上表现出一定的相似性。     

鸭疱疹病毒1型实时荧光定量PCR方法的建立

目的建立检测鸭疱疹病毒1型(鸭瘟病毒)的实时荧光定量PCR方法,为快速诊断、致病机理研究及抗病毒药物筛选等奠定基础。方法根据病毒DNA聚合酶基因的序列,设计引物和探针,采用TaqMan探针技术进行实时荧光定量PCR,用含有125bp扩增产物的pMD18-T载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,对该方法的特异性、可重复性、敏感性进行评价,同时与传统PCR方法进行比较研究。结果标准曲线表明在2.3×105~2.3×10拷贝数之间有很好的线性关系(r=0.999);实时荧光定量PCR最少可检测到23个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内及试验间变异系数分别为1.22~6.69以及2.09~8.84,说明有较好的重复性;对非鸭瘟病毒DNA无扩增,说明有很好的特异性;在对病毒DNA的检测方面,比传统PCR的敏感性高出104倍。结论成功建立了针对鸭瘟病毒的特异、敏感、重复性强且可准确定量的实时荧光定量PCR方法。