定清片对人急性髓系白血病HL-60细胞侵袭力的影响

目的:探讨我院自制中药制剂定清片对急性髓系白血病HL-60细胞侵袭力的影响。方法:制备定清片含药血清,并以不同浓度含药血清对HL-60细胞进行体外干预,Transwell实验检测定清片含药血清对细胞侵袭力的影响,应用免疫印迹法(Western Bloting,简称WB)检测MMP-2、MMP-9基因的蛋白表达量。结果:与空白对照组比较,不同浓度定清片含药血清(5%、10%、20%)作用于HL-60细胞后,不仅对细胞的侵袭能力具有明显抑制作用(P0.05),还能下调MMP-2、MMP-9基因蛋白表达水平(P0.05),且随着药物浓度的增加,其抑制力及下调蛋白表达水平作用越强。结论:定清片可抑制HL-60细胞的浸润转移能力,其作用机制可能与抑制细胞侵袭能力及下调MMP-2、MMP-9蛋白表达相关。     

苦参碱联合化疗药物对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖及侵袭力的影响

目的:探究苦参碱联合化疗药物对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖及侵袭力的影响。方法:体外培养人急性髓系白血病HL-60细胞,苦参碱单药组以1.0 g/L苦参碱干预,三氧化二砷单药组以3μmol/L三氧化二砷处理,联合组以终浓度为1.0 g/L的苦参碱+3μmol/L三氧化二砷处理,空白组以等量生理盐水处理。MTT法检测HL-60细胞增殖情况,ranswell小室实验检测HL-60侵袭力,蛋白免疫印迹法检测HL-60细胞MMPs蛋白表达情况。结果:苦参碱单药组、三氧化二砷单药组、联合组24 h PIR分别为(18.54±2.54)%,(29.54±2.62)%,(41.45±3.72)%,48 h PIR分别为(27.46±2.55)%,(38.93±3.76)%,(45.64±3.54)%,3组内HL-60的PIR均随着培养时间的增加而增加,其中联合组24 h、48 h PIR均高于同时间点的苦参碱单药组、三氧化二砷单药组,差异有统计学意义(P0.05)。空白组、苦参碱单药组、三氧化二砷单药组、联合组侵袭细胞分别为(127.64±23.93)个、(94.24±15.23)个、(81.23±12.21)个、(75.13±10.69)个,相对侵袭指数分别为(100.00±0.00)%、(73.44±0.34)%、(62.47±0.15)%、(58.54±0.36)%;MMP-2蛋白相对表达量分别为(0.91±0.05)、(0.39±0.04)、(0.23±0.04)、(0.14±0.03);MMP-9蛋白相对表达量分别为(0.62±0.05)、(0.31±0.05)、(0.27±0.04)、(0.16±0.02)。与空白组比较,苦参碱单药组、三氧化二砷单药组、联合组侵袭细胞数量显著减少,相对侵袭指数及细胞中MMP-2、MMP-9相对表达量降低,且联合组均低于苦参碱单药组、三氧化二砷单药组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:苦参碱联合三氧化二砷通过下调MMP-2、MMP-9蛋白表达有效抑制人急性髓系白血病HL-60细胞增殖及侵袭。     

山慈菇-蜂房药对抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭转移的机理研究

目的 研究山慈菇-蜂房药对对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法 噻唑蓝（MTT）法检测山慈菇-蜂房药对大鼠含药 血清对细胞活力的影响,Transwell小室法测定其侵袭力,实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）基 因的表达。结果 山慈菇-蜂房药对组MDA-MB-231细胞体外生长杀伤率为35.86 %;能明显抑制MDA-MB-231 细胞的侵袭能力（P＜ 0.01）,其抑制率为34.8 %;MMP-9 mRNA明 显降低,TIMP-1 mRNA明显升高,MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA值显著降低（P＜ 0.05,P＜ 0.01）。结论 山慈菇-蜂房药对能够抑制MDA-MB-231 细胞侵袭能力,其机制可能与 下调MMP-9mRNA表达,上调TIMP-1mRNA的表达,降低MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA比值有关。     

桔梗皂苷-D对胃癌细胞侵袭迁移能力的影响及机制研究

目的:通过研究桔梗皂苷-D(Platycodin D,PD)对MKN-45细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨PD抑制胃癌细胞侵袭转移的作用和可能机制。方法:体外培养胃癌MKN-45细胞,并加入不同浓度PD(1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L)进行处理,MTT检测细胞活性;细胞划痕实验观察细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;采用RT-q PCR检测ICAM-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2及MDM2 mRNA表达水平;Western blot检测ICAM-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2及MDM2蛋白表达水平。结果:PD呈浓度和时间依赖性抑制MKN-45细胞活性及MKN-45细胞的迁移和侵袭。PD显著下调ICAM-1、MMP-2、MMP-9及MDM2 mRNA和蛋白表达水平,上调TIMP-2 mRNA和蛋白表达水平。结论:PD能抑制胃癌MKN-45细胞的迁移和侵袭,其作用机制与下调ICAM-1、MMP-2和MMP-9表达水平以及抑制原癌基因MDM2的表达有关。     

苦参碱对人恶性黑素瘤细胞株侵袭能力及乙酰肝素酶mRNA表达的抑制作用

目的：探讨苦参碱对人恶性黑素瘤细胞株A375的侵袭能力及其乙酰肝素酶mRNA表达的影响作用。方法：A375细胞体外培养，以0．125mg／ml、0．25mg／ml和0．5mg／ml不同浓度苦参碱进行预处理48h后，采用半定量RT—PCR检测各组培养细胞HPSEmRNA表达的变化，细胞黏附实验检测细胞黏附能力的改变，Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果：和对照组比较，各浓度苦参碱处理组A375培养细胞HPSEmRNA的表达和细胞黏附侵袭能力均受到明显的抑制（P〈0．01），其抑制效应与药物的浓度呈正相关（组问比较P〈0．01）。结沦：苦参碱可能通过下调A375细胞HPSEmRNA的表达而显著抑制细胞的黏附侵袭能力，其抑制作用呈剂量依赖性。     

槲皮素对U937细胞迁移和侵袭能力及MMP-2,MMP-9表达的影响

目的:观察槲皮素(quercetin)对人急性髓系白血病(human acute myeloid leukemia)U937细胞增殖、凋亡、黏附力、迁移和侵袭能力及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响。方法:体外培养U937细胞,分别以0,10,20,40μmol·L-1槲皮素处理24,48,72 h,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测槲皮素对U937细胞增殖的抑制作用。实验随机分为空白组,槲皮素10,20,40μmol·L-1组。末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测U937细胞凋亡情况;细胞黏附实验检测U937细胞黏附力;划痕修复实验检测U937细胞迁移能力;transwell小室体外侵袭实验检测U937细胞侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测U937细胞MMP-2,MMP-9蛋白表达。结果:槲皮素可抑制U937细胞的增殖。与空白组比较,槲皮素10,20,40μmol·L-1组明显升高U937细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。与空白组比较,槲皮素10,20,40μmol·L-1组明显降低U937细胞黏附率,迁移率,侵袭细胞数及MMP-2,MMP-9蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:槲皮素可显著抑制U937细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与其抑制MMP-2和MMP-9表达有关。     

扶正抗癌方抑制PC9细胞转移的分子机制

目的:探讨扶正抗癌方抑制PC9细胞转移的分子机制。方法:台盼蓝活力检测探索扶正抗癌方对PC9细胞增殖的影响;transwell实验探索扶正抗癌方对PC9细胞侵袭和迁移的影响;基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活力检测探索扶正抗癌方对MMP-9活力的影响,Real-time quantitative PCR探索扶正抗癌方对MMP-9 mRNA表达的影响,蛋白质印迹法探索扶正抗癌方对MMP-9、磷酸化的信号转导子及转录激活子3[p-STAT3(Tyr705)]蛋白表达的影响并探讨两者的关系。结果:扶正抗癌方以浓度依赖性抑制PC9细胞的增殖、侵袭和迁移(P0.05);以浓度依赖性下调MMP-9活力、mRNA和蛋白的表达(P0.05),以时间依赖性下调p-STAT3(Tyr705)蛋白的表达(P0.05);过表达STAT3逆转了扶正抗癌方对MMP-9的下调(P0.05)。结论:扶正抗癌方通过抑制STAT3的表达下调MMP-9,进而抑制PC9细胞的转移。     

去甲斑蝥素抑制cortactin、MMP-9表达及降低前列腺癌PC-3细胞侵袭力的研究北大核心CSCD

目的观察去甲斑蝥素(NCTD)对前列腺癌PC-3细胞迁移侵袭能力以及cortactin、MMP-9mRNA及蛋白表达的影响。方法取对数生长期的PC-3细胞,分为模型组(无处理)、阳性对照组(顺铂浓度2.5μmol/L)、NCTD低、中、高剂量组(NCTD浓度分别为12.5、25、50μg/mL)。干预24 h后,划痕实验和侵袭实验检测PC-3细胞侵袭力的变化,透射电镜观察PC-3细胞的伪足形态变化,实时荧光定量PCR和Western Blot分别检测cortactin和MMP-9 mRNA与蛋白表达。结果各干预组PC-3细胞表面伪足样突起结构数量减少,随着NCTD浓度增加,伪足数量呈递减趋势。与模型组比较,各干预组细胞迁移距离、侵袭细胞数、cortactin及MMP-9 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与阳性对照组比较,NCTD中、高剂量组细胞迁移距离、侵袭细胞数降低(P<0.05),NCTD高剂量组cortactin、MMP-9 mRNA及蛋白表达下降(P<0.05)。结论NCTD可降低PC-3细胞的侵袭能力,可能与下调cortactin、MMP-9蛋白表达,抑制PC-3细胞的伪足形成有关。     

苦参碱体外诱导人肝癌细胞系Bel-7404分化及机制

目的:研究苦参碱对人肝癌细胞系体外诱导分化作用,并探讨其作用机制。方法:不同浓度苦参碱体外作用于Bel-7404细胞,噻唑蓝比色法(MTT法)绘制生长曲线,光镜下观察细胞形态变化,分别以软琼脂集落形成试验、细胞黏附试验、运动试验、侵袭试验检测细胞生物学特性变化,以流式细胞仪分析细胞周期变化。结果:0.5-1.0g/L苦参碱作用于Bel-7404细胞后,明显抑制细胞增殖,细胞形态向正常转化,克隆形成率显著降低,细胞黏附力明显上升,运动力和侵袭力则显著下降。细胞周期分析G1期细胞堆积,G2和S期细胞显著降低。结论:一定浓度的苦参碱具有抑制Bel-7404细胞生长增殖和诱导分化作用,其作用机制可能与细胞周期调节有关。     

去甲斑蝥素对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭、转移的影响及可能的分子机制。方法 MTT法检测NCTD对A431细胞生长增殖的影响,Transwell小室、细胞黏附实验、划痕实验等方法检测药物对A431细胞侵袭、黏附和迁移能力的影响,Western blot法检测药物作用后细胞中MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白水平的表达变化。结果 MTT实验显示,NCTD作用24 h,A431细胞的生长增殖能力受到明显抑制,与对照组比较,40.0μmol·L-1NCTD组的抑制率为(45.38±2.75)%(P0.05);Transwell实验、细胞黏附、划痕实验显示,经20.0,40.0μmol·L-1NCTD作用细胞24 h后,与对照组相比,用药组细胞的侵袭、黏附、迁移能力均有不同程度的下降,其抑制率呈剂量效应(P0.05,P0.01);Western blot实验表明,A431细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显下调(P0.05)。结论 NCTD能显著地抑制A431细胞的生长增殖、侵袭、黏附、迁移能力,其机制可能与其能下调VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平相关。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

咳嗽六经辨治初探

六经皆有咳嗽,寒热皆可致咳,治疗上不可拘于一理一方,当穷究其机,辨证施治,方能事半功倍。以六经辨证为纲,分析《伤寒杂病论》对咳嗽的有关论述,以期提高咳嗽的临床疗效。     

中医“治未病”理论的研究

治未病是中医学重要的防治思想,即预防疾病的发生和发展,防惠于未然的预防学思想,即未病之前,防止疾病的发生;已病之后,防止疾病的传变,强调以“预防为主”。本文从治未病的渊源;治未病思想的实质内容;“治未病”理论的应用;“治未病”临床研究进展等几方面解释治未病。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。