麦粒灸合补肺祛瘀方对肺纤维化大鼠肺功能和核因子κB信号通路的影响

目的：探讨麦粒灸合补肺祛瘀方对肺纤维化（PF）大鼠肺功能及核因子κB信号通路的影响。方法：选取60只成年SD大鼠（雌雄各半）按随机数字表法均分为空白对照组、模型组、泼尼松龙组、麦粒灸组、方药组、灸药组,每组10只。气管内注射博来霉素制备PF模型,泼尼松龙组灌胃给予泼尼松龙（5 mg/kg）、麦粒灸组进行麦粒灸、方药组给予补肺祛瘀方灌胃、灸药组同时进行麦粒灸和灌胃补肺祛瘀方（5 g/kg）空白对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。30 d后检测大鼠肺功能,对PF大鼠肺组织进行病理学检测,同时检测支气管肺泡灌洗中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）水平及肺组织中核因子κB、转化生长因子-β（TGF-β）和Smad2 mRNA水平。结果：空白对照组大鼠肺组织未见明显异常;模型组肺组织中胶原沉积明显,炎症细胞浸润,肺泡壁增厚,肺泡破坏和紊乱以及肺泡间隙部分塌陷;经泼尼松龙、麦粒灸和方药治疗后,肺组织胶原沉积明显减少,炎症和纤维化明显改善,其中泼尼松龙组改善最显著。与空白对照组比较,其余组大鼠用力肺活量（FVC）、最大通气量（MVV）和动态顺应性（Cdyn）降低,TNF-α、IL-1β、IL-6、核因子κB、TGF-β和Smad2升高（P<0.05）;与模型组比较,各治疗大鼠FVC、MVV和Cdyn升高,TNF-α、IL-1β、IL-6、核因子κB、TGF-β和Smad2降低,其中灸药组疗效好于麦粒灸组和方药组,而泼尼松龙组疗效最好（P<0.05）。结论：麦粒灸合补肺祛瘀方可以改善PF大鼠肺功能,其作用机制可能与核因子κB信号通路抑制有关。     

芪归方通过抑制miR-21而干预TGF-β1/Smad通路并减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化

目的观察芪归方对博莱霉素所致特发性肺纤维化(IPF)大鼠微小RNA-21(miR-21)表达以及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路的影响。方法博莱霉素一次性气管内注射复制大鼠特发性肺纤维化模型,随机分为芪归方低、中、高剂量组及模型组;正常对照组大鼠气管内注射生理盐水。用药7d、28 d后,Masson染色观察各组大鼠肺组织形态学的变化; real-time PCR检测肺组织中miR-21;免疫组化法分析P-Smad2和P-Smad3蛋白的表达。结果与模型组相比,芪归方用药组大鼠的肺泡炎及肺纤维化程度有明显降低,肺组织中miR-21表达下降,TGF-β1、NF-κB水平和P-Smad2和P-Smad3蛋白表达水平也明显下降。结论芪归方抗肺纤维化的作用可能与抑制miR-21的表达,从而干预TGF-β1/Smad信号通路,减少细胞外基质沉积有关。     

升陷汤对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白、肺表面活性蛋白D及TGF-β1/Smads通路蛋白表达的影响

目的观察升陷汤对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肺表面活性蛋白D(SP-D)及TGF-β1/Smads通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法 SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为正常组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤高、中、低剂量组。除正常组外,其余大鼠采用气管内注射硫酸博莱霉素建立肺纤维化模型,造模后第8日起,升陷汤高、中、低剂量组分别予10.4、5.2、2.6 g/(kg·d)升陷汤灌胃,吡非尼酮组予0.72 g/(kg·d)吡非尼酮混悬液灌胃,连续28 d。记录大鼠肺脏质量和体质量,计算肺脏系数,HE染色观察大鼠肺组织病理变化,Masson染色观察大鼠肺组织纤维化程度,免疫组化检测大鼠肺组织α-SMA、SP-D的表达,Western blot检测大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2、Smad7蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺脏质量和肺脏系数明显增加,体质量明显减轻,肺组织损伤评分和肺组织胶原容积分数明显增加(P0.05),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2蛋白表达明显升高,SP-D、Smad7蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,升陷汤高、中、低剂量组大鼠肺脏质量和肺脏系数明显降低,体质量增加,肺组织损伤评分及肺组织胶原容积分数明显降低(P0.05),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2蛋白表达明显降低,SP-D、Smad7蛋白表达明显升高(P0.05)。结论升陷汤可降低肺纤维化模型大鼠肺脏质量,增加大鼠体质量,降低肺组织损伤,其机制可能与下调肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2蛋白的表达,上调SP-D、Smad7蛋白的表达相关。     

血府逐瘀汤对肺纤维化大鼠肺组织上皮间质转化的影响及其机制研究

目的:研究血府逐瘀汤对肺纤维化(PF)大鼠肺组织上皮间质转化(EMT)的影响,并探讨其可能机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.000405 g·kg~(-1)·d~(-1))和血府逐瘀汤高、中、低剂量组(14.04、7.02、3.51 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均于气管内滴注博来霉素溶液建立PF模型。造模后第2天开始灌胃给药,正常组和模型组予蒸馏水溶液(10 m L·kg~(-1)·d~(-1));各给药组灌胃相应药物,每日1次,连续28 d。末次给药24 h后,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,采用Western blot法检测大鼠肺组织中TGF-β1、Smad3的表达情况。结果:模型组大鼠肺组织E-cadherin表达显著低于正常组(P 0.01),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著高于正常组(P 0.01);与模型组比较,血府逐瘀汤高、中、低剂量组肺组织E-cadherin表达显著升高(P 0.05或P 0.01),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著降低(P 0.05或P 0.01);与地塞米松组比较,血府逐瘀汤低剂量组的E-cadherin表达显著降低(P 0.05),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著升高(P 0.05或P 0.01)。结论:血府逐瘀汤可通过干预上皮间质转化来减轻肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响

目的观察虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响。方法大鼠随机分为空白组、博来霉素组、虎杖总蒽醌组、Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组、Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组。除空白组外,其余各组大鼠切开气管注入博来霉素(BLM,10 mg/kg)建立肺纤维化大鼠模型。造模后次日虎杖总蒽醌组给予虎杖总蒽醌(400 mg/kg)灌胃,每日1次,Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组给予虎杖总蒽醌灌胃并于造模后次日尾静脉注射Smad3 siRNA质粒(3 mL/kg),Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组每天给予虎杖总蒽醌灌胃基础上于造模后次日腹腔注射Smad3抑制剂(2 mg/kg)。4周后大鼠处死,取右肺,RT-PCR检测肺组织匀浆中上皮细胞标志物(E-cad)、间皮细胞标志物(α-SMA)及信号通路相关分子Smad3、TGF-β1、CTGF的mRNA的蛋白表达变化。取左肺组织匀浆后离心,碱裂解法检测肺组织中羟脯胺酸(HYP),大鼠摘眼球取血,酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、间质胶原蛋白Ⅰ、间质胶原蛋白Ⅲ的表达。结果RT-PCR显示,虎杖总蒽醌可提高模型大鼠肺组织中E-cad水平,降低TGF-β、Smad3、a-SMA、CTGF水平,而SiRNA+虎杖总蒽醌组及Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组与虎杖总蒽醌组形成相反趋势。酶联免疫吸附法显示,虎杖总蒽醌组肺组织HYP、血清CollagenⅠ、CollagenⅢ、TNF-α、VEGF、MMP-2水平均有所降低,SiRNA+虎杖总蒽醌组与Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组与虎杖总蒽醌组形成相反趋势。结论虎杖总蒽醌可能通过阻断TGFβ1-smad信号通路来抑制肺纤维化的发生,并通过抑制TGFβ1-smad信号通路的激活及降低肺组织HYP及血清TNF-α炎症因子达到减轻肺纤维化的作用。     

槲皮素对基于TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路抗博来霉素致小鼠肺纤维化的作用及机制研究

目的:研究槲皮素对基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶P38(P38 MAPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路抑制博来霉素致小鼠肺纤维化的作用及机制。方法:85只ICR小鼠中随机取15只为假手术对照组，另64只肺纤维化模型小鼠随机分为模型对照组、醋酸泼尼松2.5 mg/kg组、槲皮素49、98 mg/kg组，每组16只。造模干预28 d后，各组灌胃相应药物或等体积生理盐水，连续4 w。用动物肺功能检测仪检测小鼠肺功能指标；检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-8及肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量；苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化；Masson染色法观察肺组织纤维化程度并进行评分；RT-qPCR法检测小鼠肺部Tgfb1、P38 Mapk、Nfkb mRNA表达；Western blot检测小鼠肺部TGF-β1、P38 MAPK、p-P38 MAPK、NF-κB蛋白相对表达。结果:与假手术对照组比较，模型对照组FVC、FEV _0.1降低，TNF-α、IL-6、IL-8、HYP含量增加，肺组织病理...     

基于NF-κB/TGF-β1/Smad3信号通路研究通腑活血方防治肠粘连作用机制

目的:观察通腑活血方对肠粘连模型大鼠盲肠组织中核转录因子-κB(NF-κB)/转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3通路中相关因子表达的影响,探讨通腑活血方防治术后肠粘连的作用机制。方法:雄性SD大鼠48只,按照随机数字法分为四组:对照组、模型组、通腑活血方组和几丁糖组,每组12只,除对照组外,其余大鼠采用Ellis法制备肠粘连模型,分别给予各组大鼠相应处理。苏木素-伊红(HE)染色观察盲肠组织病理学变化,酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western blot和RT-PCR法检测盲肠NF-κB/TGF-β1/Smad3信号通路中关键因子的蛋白和mRNA表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠组织病理学出现显著变化,血清IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),盲肠组织中IL-6、TNF-α、p-NF-κBp65、TGF-β1、Smad3 mRNA和蛋白相对表达水平升高(P<0.01),基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白相对表达水平升高(P<0.01),核转录因子-κB抑制蛋白(IκB)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达水平显著降低(P<0.01); 与模型组比较,通腑活血方组和几丁糖组大鼠血清IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.01),盲肠组织中IL-6、TNF-α、p-NF-κBp65、TGF-β1、Smad3 mRNA和蛋白相对表达水平降低(P<0.01)、MMP-9蛋白相对表达水平降低(P<0.01),IκB、TIMP-1蛋白表达水平升高(P<0.01),且盲肠组织病理学均有显著改善,其中以通腑活血方组改善更显著。结论:通腑活血方可有效防止术后肠粘连的发生,其作用机制可能是通过抑制NF-κB/TGF-β1/Smad3信号通路活化,减少炎症因子的释放,调节TIMP-1/MMP-9平衡,防止肠粘连。     

养阴益气合剂对肺纤维化大鼠TGF-β/Smad信号通路的影响

目的研究养阴益气合剂对博来霉素诱导的肺间质纤维化大鼠TGF-β/Smad信号通路的影响。方法将120只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组及养阴益气合剂低、中、高剂量组,采用气管滴注博来霉素的方法复制肺纤维化大鼠模型,造模后第二天各组予相应药物灌胃,连续给药28天。分别于第14天和28天分批处死大鼠,留取肺组织以实时荧光定量PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3及Smad7表达,留取血清以酶联免疫法检测羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)表达。结果与空白组相比,模型组TGF-β1、Smad3 mRNA及HYP表达明显升高,Smad7显著减少(P0.05)。治疗后,肺纤方中、高剂量组TGF-β1、Smad3及HYP出现显著下降,Smad7表达上调(P0.05)。结论养阴益气合剂的抗肺纤维化作用可能与抑制TGF-β/Smad通路,减少细胞外基质沉积有关。     

野菊花提取物对慢性支气管炎大鼠肺组织病理的影响及对TGF-β1/Smad3通路的调控机制

目的观察野菊花提取物对慢性支气管炎大鼠肺组织病理的影响,并探讨其对肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)/信号传导蛋白Smad3通路的调控机制。方法取60只成年健康SD大鼠,除正常组外均建模,低、中、高浓度组予以0.7、1.4、2.8 g/kg野菊花提取物灌胃,每天1次;阳性组予以50 mg/kg N-乙酰半胱氨酸灌胃,每天1次。观察干预前后血清TGF-β1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平变化,肺组织病理改变,肺组织TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果干预前,模型组血清TGF-β1、TNF-α、IL-6较正常组升高(P0.01)。干预后,模型组依然升高(P0.01),野菊花提取物组和阳性组均较干预前水平降低(P0.05),且低于模型组(P0.01);正常组肺组织无明显改变,模型组呈病理改变,野菊花提取物组和阳性组均较模型组减轻,且高浓度组与正常组最为接近;各组病变评分比较,模型组均高于正常组(P0.01),野菊花提取物组和阳性组均低于模型组(P0.01);各组肺组织TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达比较,模型组均高于正常组(P0.01),野菊花提取物组和阳性组均低于模型组(P0.01)。结论野菊花提取物可减轻慢性支气管炎大鼠的炎症反应和肺组织病理变化,推测与下调TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白有关。     

升陷乌梅汤对激素干预哮喘大鼠TGF-β1/Smad信号通路及气道重塑的影响

目的观察升陷乌梅汤对激素干预哮喘大鼠TGF-β1/Smad信号通路和气道重塑的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、哮喘组、激素组、布地奈德组、升陷乌梅汤组。除正常组外,其余各组采用卵蛋白致敏、雾化激发建立哮喘大鼠模型,并予各给药组大鼠腹腔注射糖皮质激素干预,在此基础上予升陷乌梅汤组大鼠灌胃、布地奈德组大鼠雾化吸入。观察各组大鼠肺功能及支气管病理改变,并采用Western blot及RT-qPCR法检测TGF-β1/Smad信号通路相关因子蛋白及mRNA表达的变化。结果①与正常组比较,哮喘组大鼠肺组织中胶原蛋白表达、WAi/Pbm、WAm/Pbm及WAe/Pbm升高(P0.05),信号通路因子TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白和mRNA表达及p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达均升高(P0.05),而肺功能中FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF50%及FEF75%均降低(P0.05),肺组织中Ai/Pbm以及通路因子Smad6、Smad7的蛋白和mRNA表达均降低(P0.05)。②与哮喘组比较,各给药组均可减少肺组织中WAi/Pbm、WAm/Pbm和WAe/Pbm(P0.05),降低TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达及TGF-β1、Smad2、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P0.05),并升高FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF50%和FEF75%(P0.05),增加Smad6、Smad7的mRNA表达(P0.05);且升陷乌梅汤组较激素组可进一步减少WAi/Pbm、WAm/Pbm、WAe/Pbm,降低TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白和mRNA表达及p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P0.05),并升高FEV0.1、FEV0.1/FVC、FEF75%,增加Smad6的蛋白和mRNA表达以及Smad7的mRNA表达(P0.05)。结论升陷乌梅汤可在激素干预基础上进一步阻止TGF-β1/Smad信号通路的异常激活,抑制气道重塑发展,延缓肺功能下降。     

宣肺化瘀方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smad表达的影响

目的观察宣肺化瘀方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smad2表达的影响。方法将健康雄性Wistar大鼠(SPF级)60只,随机分成6组,对照组、模型组、醋酸泼尼松(0.167 mg/kg)组及宣肺化瘀方高、中、低剂量(14.38、7.19、3.60 g/kg)组,每组10只。经鼻滴入博莱霉素7μg/g(150μL)建立肺纤维化动物模型。各给药组于造模8 h后开始分别ig醋酸泼尼松或宣肺化瘀方,每日1次。各组大鼠在造模28 d后取材。对肺组织行HE染色和天狼星红染色,光镜下观察肺泡炎和肺纤维化改变;采用碱性水解法测定肺组织中羟脯氨酸(Hyp)的量;应用免疫组织化学法测定大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad4、Smad7表达;应用Western blotting方法检测转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、Smad2、p-Smad2、Smad7的蛋白表达水平。结果模型组肺泡结构严重破坏,肺间质增生,炎细胞浸润和胶原纤维增生。与对照组比较,模型组Hyp水平、胶原阳性染色面积比值明显升高;与模型组相比,宣肺化瘀方3个剂量组和醋酸泼尼松组肺泡间隔胶原纤维表达明显减少,Hyp的量显著下降,其中,宣肺化瘀方高剂量组比低、中剂量组胶原纤维表达更少,Hyp的量更低。宣肺化瘀方组与模型组相比,TGF-βRⅡ、Smad2、p-Smad2、Smad4、α-SMA蛋白含量显著降低,而Smad7蛋白表达明显升高。结论宣肺化瘀方能有效地防治肺纤维化,其作用机制可能是通过调控TGF-β/Smad信号通路,抑制α-SMA的过度表达,进而减少胶原纤维的形成。     

苦参素抑制大鼠肺纤维化及机制研究

目的探讨苦参素(OM)对平阳霉素(BLM A5)致大鼠肺纤维化模型的保护作用和对TGF-β1/Smad3通路的影响。方法 Wistar雄性大鼠126只随机分为对照组、模型组、醋酸泼尼松组、OM30 mg/kg·d、OM 60 mg/kg·d和OM 120 mg/kg·d剂量组,于给药7、14、28 d每组分别处死7只大鼠,HE、Masson染色并做肺组织病理学评分,测定7、14、28 d时大鼠血清中透明质酸(HA)和肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量以及肺组织TGF-β1和Smad3的表达水平。结果 OM能降低大鼠肺泡炎性评分和肺纤维化评分,降低血清中HA含量,降低肺组织中HYP含量和TGF-β1、Smad3的表达水平。结论OM可以有效抑制大鼠肺纤维化,其作用机制可能与减少肺组织中TGF-β1、Smad3的表达,降低HYP和HA有关。     

黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的观察黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法 SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、泼尼松龙阳性对照(3.34 mg/kg)组、黄芩总黄酮高剂量和低剂量(50、25 mg/kg)组。大鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型后,各给药组ig给予相应药物,每天给药1次。28 d后处死动物,观察大鼠血清中总抗氧化能力(T-AOC)、还原性谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)的水平;取固定部位肺组织分别行HE、Masson染色,进行病理组织学检查;RT-PCR法检测黄芩总黄酮对大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2、Smad7、α-SMA、胶原I的mRNA表达水平。结果与模型组相比,黄芩总黄酮给药组大鼠血清中T-AOC、GSH水平均升高,MPO水平显著降低;肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻(P<0.05、0.01);TGF-β1、Smad2、α-SMA、胶原I基因表达显著降低,Smad7表达显著升高(P<0.05、0.01)。结论黄芩总黄酮对博莱霉素所致大鼠肺纤维化具有一定的治疗作用,其机制可能与抗氧化损伤、抑制炎症细胞的浸润活化及调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

当归补血汤总苷联合水蛭治疗大鼠肺纤维化

目的研究当归补血汤总苷联合水蛭对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制。方法选取120只雄性SD大鼠,18只作为正常组(生理盐水),其余102只建立肺纤维化模型。72只造模大鼠随机分为模型组(生理盐水)、当归补血汤总苷组(13 mg/kg)、水蛭组(水蛭粉,4 g/kg)、联合组(当归补血汤总苷,13 mg/kg;水蛭粉,4 g/kg),每组18只,灌胃给药。结果造模后第7、14、28天,模型组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)、肺泡灌洗液中白细胞介素-4(IL-4)和白介素-17(IL-17)表达水平、肺组织中羟脯氨酸(HYP)含有量均显著高于正常组(P0.05);当归补血汤总苷组、水蛭组和联合组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、PAI-1、IL-4、IL-17表达水平、羟脯氨酸含有量均显著低于模型组(P0.05);联合组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、PAI-1、IL-4、IL-17表达水平、HYP含有量显著低于当归补血汤总苷组、水蛭组(P0.05)。结论当归补血汤总苷联合水蛭治疗大鼠肺纤维化的效果较好,主要是通过降低肺组织中TGF-β1、PAI-1表达水平、HYP含有量所致。     

当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:研究当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad信号通路的调控作用,探讨其对DN大鼠的作用及产生该作用可能的机制。方法:采用一次性大剂量(60 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DN大鼠模型。将DN大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及当归-红芪超滤膜提取物低、中、高剂量组,之后开始灌胃给药,每天1次,8周后测空腹血糖(FBG),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),24 h尿蛋白;光镜观察肾组织结构变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量;免疫组化法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平明显升高,ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量明显升高,肾组织病理结构异常较为明显,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,当归-红芪超滤膜提取物各组均不同程度降低了DN大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平(P0.05);ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量降低(P0.05),肾组织病理结构异常得到改善,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达减少(P0.05,P0.01),TGF-β_1,Smad2/3 mRNA表达减少(P0.05,P0.01)。结论:当归-红芪超滤膜提取物可改善DN大鼠肾功能病变,延缓DN慢性病理进展,其机制可能与其抑制TGF-β_1/Smad信号通路有关。     

二氢青蒿素对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化抑制作用的实验研究

目的观察二氢青蒿素对博莱毒素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用并探讨可能机制。方法博莱霉素一次性气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,随机分为造模组(BLM组)、地塞米松组(DXM组)、二氢青蒿素组(DHT组)。正常对照组(NC组)大鼠气管内注射生理盐水。用药28d后,HE染色及Masson染色分别观察各组大鼠肺泡炎症及纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量,Real-time PCR法检测肺组织转化生长因子β-1(TGF-β1)mRNA水平,Western-blot法检测肺组织核因子κb(NF-κb)含量。结果与BLM组比较,DHT组大鼠肺泡炎及肺纤维化程度均明显降低(P0.01),肺组织羟脯氨酸含量显著减少(P0.01),肺组织TGF-β1mRNA水平明显下降(P0.01),NF-κb含量也显著减少(P0.01)。结论二氢青蒿素可通过下调NF-κb及TGF-β1表达对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化进程产生抑制作用。     

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的影响

目的:观察补肾通络方对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织病理及转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads通路蛋白的影响,揭示该方抑制肺纤维化的作用机制。方法:48只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组8只,模型组、补肾通络低、高剂量组、氢化可的松琥珀酸钠组各10只。除正常组外,各组均采用博莱霉素法诱导肺纤维化制备模型。从术后第3天开始,补肾通络高、低剂量组分别给予14. 2,7. 1 g·kg~(-1)补肾通络方药灌胃,氢化可的松琥珀酸钠组给予4. 58 g·kg-1氢化可的松琥珀酸钠溶液腹腔注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,共治疗28 d。大鼠处死后测定血清羟脯氨酸(HYP),透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN)的含量,取肺组织,采用苏木精-伊红染色法(HE)及马松(Masson)三色染色法观察肺组织病理形态变化,采用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3,Smad7等mRNA和蛋白表达变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP,HA,LN含量升高(P 0. 05,P 0. 01),肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达升高(P 0. 05,P 0. 01),Smad7蛋白和mRNA表达降低(P 0. 01);与模型组相比,补肾通络高剂量组血清HYP,HA,LN的含量下降(P 0. 05,P 0. 01)肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达降低(P 0. 05),Smad7蛋白和mRNA表达升高(P 0. 01)。结论:补肾通络方可有效改善肺纤维化的病变进程,其机制可能与调节TGF-β_1/Smads通路有关。     

贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织TGFβ-Smads 表达的影响

目的：观察贝丹益肺胶囊对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β（TGF -β1）信号通路分子 mR-NA 表达的影响,探讨其防治肺纤维化的作用及机制。方法：气管内滴入博来霉素（5mg/kg）建立大鼠肺纤维化模型。将40只 Wistar 大鼠随机分为四组（每组10只）：对照组、肺纤维化模型组、强的松组和贝丹益肺胶囊组。 HE 染色检测肺组织病理改变,原位杂交技术检测肺组织 Smad4 mRNA 表达,实时荧光定量 RT -PCR 技术检测 TGF -β1mRNA 表达。结果：胶原纤维染色显示模型组大鼠肺内胶原纤维表达显著高于对照组和贝丹益肺胶囊治疗组（P ＜0．05）。大鼠肺内 TGF -β1及 Smad4 mRNA 表达在模型组显著高于对照组（P ＜0．01）,在贝丹益肺胶囊治疗组显著低于模型组（P ＜0．05）。结论：贝丹益肺胶囊能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度,其作用机制主要是通过抑制 TGF -β1及 Smad4 mRNA 表达上调,从而干扰 TGF -β1/Smad4信号通路对靶基因的激活来实现的。     

扶脾柔肝方对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨扶脾柔肝方对肝纤维化(HF)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路的干预作用。方法将SD大鼠随机分为7组:正常对照组,模型组,秋水仙碱组(0.2 mg·kg~(-1)),扶正化瘀组(0.415 g·kg~(-1)),扶脾柔肝方低、中、高剂量组(20,40,80 g·kg~(-1))。采用大鼠背部皮下注射(sc)50%四氯化碳和灌胃(ig)30%乙醇的方法诱导HF,造模10周,成功建立大鼠HF模型,其后给予相应药物10 m L·kg~(-1),每日1次,连续4周,正常对照组、模型组给予等量生理盐水。检测大鼠血清TGF-β1;HE染色和Masson染色观察肝组织病理学变化;免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;同时,采用荧光定量PCR方法及免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中TGF-β1、Smad 3、Smad 4、Smad7 mRNA及蛋白的表达。结果模型组的HF程度较其余组明显严重,与正常对照组比较,模型组大鼠血清TGF-β1明显升高(P0.01),肝组织α-SMA蛋白及TGF-β1、Smad3、Smad4 mRNA及蛋白表达升高Smad 7表达降低(P0.01);与模型组比较,扶脾柔肝方各组大鼠血清TGF-β1明显降低(P0.05,P0.01),肝组织α-SMA蛋白及TGF-β1、Smad3、Smad4 mRNA及蛋白表达下调(P0.01),Smad 7 mRNA及蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。结论扶脾柔肝方下调HF肝组织α-SMA蛋白及TGF-β1、Smad3、Smad4 mRNA及蛋白表达水平,上调Smad7 mRNA及蛋白表达水平,可能是其抗HF作用机制之一。     

益气养阴活血方对肺纤维化大鼠TGF-β1、Smad3、MMP9及TIMP1表达的影响

目的 观察益气养阴活血方对肺纤维化大鼠的影响，探讨其改善肺纤维化的作用机制。方法 采用博来霉素气管滴注制备肺纤维化大鼠模型，将大鼠随机分为模型组、醋酸泼尼松组和益气养阴活血方高、中、低剂量组（中药高、中、低剂量组），每组8只，另取8只正常大鼠作为空白组，给药组予相应药物灌胃28 d，空白组和模型组予等体积生理盐水灌胃。末次给药后，行肺功能检测，HE和Masson染色观察肺组织病理改变，免疫组化染色检测肺组织纤连蛋白（FN）和层粘连蛋白（LN）表达，RT-PCR检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA表达，Western blot检测肺组织TGF-β1、Smad3、p-Smad3、MMP9和TIMP1蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠吸气时间和呼气时间显著缩短，每分钟通气量和呼吸频率显著增加（P<0.01），肺组织结构损伤明显，肺泡塌陷、萎缩、间隔变宽，有大量胶原纤维沉积，肺组织FN和LN表达显著升高（P<0.01）,TGF-β1、Smad3、MMP9 mRNA和TGF-β1、p...