心衰患者的心肌和淋巴细胞GRK2表达及活性均增高

目的:G蛋白偶联受体激酶-2(G R K2或β-ARK1)调节着心脏β肾上腺素能受体(β-A R)。在心衰(H F)患者中,这种激酶在心脏的表达升高。本文意在探讨已经被用于研究心脏β-AR的白细胞可否用于监测心肌中G R K2的水平和活性。此外,作者亦有意探讨心肌和淋巴细胞的G RK2水平是否与β-     

G蛋白耦联受体激酶与心力衰竭

本文回顾了目前所知G蛋白耦联受体激酶(GRK)在正常心脏及心力衰竭中的作用机制,并介绍其在心力衰竭基因治疗中的新近展,旨在探讨通过调节心脏GRK而产生的潜在的心力衰竭治疗策略。哺乳动物体内有7种GRK基因,GRK2和GRK5在心肌β肾上腺能受体系统有非常重要的作用。在心脏发育过程中,GRK2是唯一的关键性亚型。免疫组织化学研究表明,非心肌的心脏细胞中GRK2成分较高。GRK催化G蛋白耦联受体的磷酸化,从而使GPCR减敏。因此,GRK的磷酸化是调节其活性及蛋白稳定性的重要机制。心力衰竭时GRK表达和活性均有所增高,这并非保护性机制,而是促使心力衰竭恶化的重要因素。GRK2的靶向抑制可能是挽救衰竭心肌非常有前景的治疗途径。     

胆碱能受体和肾上腺素能受体磷酸化的调节作用机制研究

目的：研究受体激活剂或抑制剂影响G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）介导的胆碱能m2受体和β2肾上腺素能受体膜蛋白（β2-AR）磷酸化的调节机制。探讨兴奋剂使m2受体和β2-AR受体活化,引发受体磷酸化级联反应,进而影响蛋白激酶催化受体磷酸化的起始机制。方法：制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒草碱乙酰胆碱m2受体;分别将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-P^32]ATP与受体激活剂或抑制剂共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果。结果：m2受体激活剂氨甲酰胆碱明显增强m2受体的磷酸化,而m2受体抑制剂阿托品或肝素（GRK2抑制剂）完全阻断了m2受体的磷酸化。m2受体的磷酸化是依赖激活剂如氨甲酰胆碱作用发生的,呈明显的剂量依赖关系;β2-AR的激活剂特布他林增强肾上腺素能受体的磷酸化,而肝素可完全阻断β2-AR的磷酸化;并且证实氨甲酰胆碱对mAChR2,特布他林对β2-AR磷酸化的增强作用是选择性的作用结果;HEL299细胞磷酸化实验结果也显示氨甲酰胆碱可以增强HEL299细胞m2受体的磷酸化,阿托品可以抑制HEL299细胞m2受体的磷酸化。结论：实验证实氨甲酰胆碱、特布他林和阿托品等一些m2受体和β2-AR的激活剂及抑制剂对M2受体和β2-AR磷酸化的调节作用。提示激活剂增强m2受体和β2-AR的磷酸化可能是这些受体活化一个重要部分,由此开始加速受体敏感性下调,受体耐受性增强。     

TNF-α对大鼠肺微血管内皮细胞β-受体及其相关GRKs的影响

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肺微血管内皮细胞(PMVEC)β-受体(β-AR)和β-AR 相关的G蛋白偶联受体激酶(GRKs)的影响及山莨菪碱的干预作用.方法采用放射性配基结合法观察TNF-α作用后大鼠PMVEC β-AR最大结合容量Bmax的变化;采用Western blot观察与β-AR相关的GRKs在蛋白水平的表达及TNF-α的影响.结果大鼠 PMVEC β-AR的最大结合容量Bmax为(5.58±0.31)fmol/105细胞;TNF-α组β-AR的Bmax显著低于对照组,TNF-α 山莨菪碱组β-AR的Bmax与对照组比较无显著差异;大鼠 PMVEC GRK2蛋白表达为阳性,但GRK3、GRK5和GRK6表达为阴性;TNF-α组和TNF-α 山莨菪碱组GRK2蛋白表达较正常对照组显著增高.结论大鼠PMVEC表达GRK2,但不表达GRK3、GRK5和GRK6;TNF-α诱导的GRK2表达增高可促进β-AR的磷酸化,从而促进β-AR与G蛋白失偶联和β-AR的内化,这可能是TNF-α致大鼠PMVEC β-AR下调的主要机制;山莨菪碱不是通过抑制GRK2表达增加,而是通过其它机制抑制TNF-α引起的β-AR下调.     

重组腺病毒转染心衰大鼠心肌细胞cAMP水平变化

目的测定重组腺病毒Ad5-ADRbeta2-EGFP转染体外培养心衰大鼠心肌细胞48h后环磷酸腺苷（cAMP）的水平变化。方法重组腺病毒Ad5-ADRbeta2-EGFP转染心衰大鼠心肌细胞,培养48h后,检测心肌细胞β2-AR蛋白表达和cAMP的水平。结果①心肌细胞β2-AR蛋白表达测定：心衰组与对照组（假手术组）相比没有明显差异（P〉0．05）,心衰＋β2组与心衰组、对照组相比均明显升高（P〈0．05）。②心肌细胞cAMP水平：心衰组与对照组（假手术组）相比明显减少（P〈0．01）,心衰＋β2组与心衰组相比明显升高（P〈0．01）,心衰＋ISO组与心衰组相比明显升高（P〈0．01）,心衰＋ISO＋β2组与心衰组相比明显升高（P〈0．01）,心衰＋ISO＋β2组与心衰＋β2组、心衰＋ISO组相比没有明显差异（P〉0．05）。结论重组腺病毒Ad5-ADRbeta2-EGFP转染体外培养心衰大鼠心肌细胞后,β2-AR蛋白表达上调,同时伴有基础cAMP逆转恢复正常水平,其可能与β2-AR活性的内在活化有关。     

慢性心衰患者体外循环前后心肌β受体系统的改变

目的：研究慢性心衰２心肌β受体系统的改变及体外循环（ＣＰＢ）对其影响。方法：采用放射免疫分析法测定１２例慢性心衰患者及１２例无慢性心衰患者ＣＰＢ前后心肌β受体密度及腺苷酸环化酶（ＡＣ）活性。结果：（１）慢性心衰患者受体密度及异丙肾上腺素介导的ＡＣ最大活性（ＩＳＯ－ＡＣ）均较无慢性心衰明显降低。（２）所有患者ＣＰＢ前后β受体密度及基础腺苷酸环化酶活性均无明显改变，但ＣＰＢ后ＩＳＯ－ＡＣ均较术前显著降     

选择性β肾上腺素受体激动剂对人滑膜细胞增殖能力的影响

目的：观察β-肾上腺素受体( AR)激动药对人成纤维样滑膜细胞( FLS)增殖的作用,探讨β-AR信号对人FLS功能的影响。方法组织块培养法培养人FLS;使用肿瘤坏死因子α( TNF-α)作为刺激剂,MTT法分别检测β1-AR选择性激动剂多巴酚丁胺和β2-AR选择性激动剂沙丁胺醇对人FLS增殖作用的影响,并计算增殖抑制率;使用沙丁胺醇+β2-AR选择性拮抗剂ICI 118551观察其对FLS增殖功能的影响;Western blot法检测人FLSβ-AR、G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)和β抑制蛋白2(β-arrestin2)胞膜蛋白的表达水平。结果 TNF-α可以显著促进人FLS的增殖;β2-AR激动剂沙丁胺醇能明显抑制FLS的增殖,其拮抗剂ICI 118551能显著拮抗沙丁胺醇的作用;β1-AR选择性激动剂多巴酚丁胺对FLS的增殖无显著影响;TNF-α和沙丁胺醇均能显著降低β2-AR胞膜表达,上调 GRK2、β-arrestin2的胞膜表达。结论β2-AR信号的激活可以抑制FLS增殖;TNF-α和沙丁胺醇可以使GRK2、β-arrestin2的胞膜表达增加,β2-AR胸膜表达下降。     

48周龄自发性高血压大鼠心脏β肾上腺素受体及其亚型的改变

目的观察48周龄自发性高血压大鼠（SHR）心脏β肾上腺素受体（β-AR）及其亚型的改变。方法：放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验。结果：SHR心脏β-AR密度较同龄Wistar大鼠上调27％，且为β1与β2-AR同等程度上调；β-AR及其亚型介导的高体左心房正性变力效应较Wistar大鼠无显著性差异。结论：SHR虽心脏β-AR数量增加，但β-AR的功能效应并无改变。     

美喘清、地塞米松对小儿支气管哮喘β受体和cAMP的影响

目的　研究美喘清、地塞米松对支气管哮喘小儿β受体和cAMP水平的影响。方法　采用放射配基受体结合分析方法，对支气管哮喘急性发作期患儿应用单一口服美喘清以及美瑞清和静注地塞米松联合治疗前后外周血淋巴细胞β－AR和血浆cAMP水平及临床治疗效果进行了观察。结果美喘清组：β－AR治疗前为3911．9±306．9site／cell，治疗后为2672．8±343．7site／cell（P＜0．01）；cAMP治疗前为18．9±1．gpm／mL，治疗后为19.6±1．5pm／mL（P＞0．05）；美喘清＋地塞米松组：β－AR治疗前为4018．8±344．5site／cell，治疗后为2227．9±208．2site／cell（P＜0．01）；cAMP治疗前为17．4±1．5pm／mL，治疗后为21．3±2．1pm／mL（P＞0．05）。结论美喘清在体内激活了β-AR，对哮喘急性发作期治疗有效，而联合用药时，静注地塞米松未见明显加强美喘清激活β-AR的作用。     

β阻滞剂治疗充血性心力衰竭的研究进展

越来越多的临床研究结果表明，以往被列为心衰禁忌的β受体阻滞剂，现在已可用于治疗充血性心力衰竭（ＣＨＦ），它能使ＣＨＦ患者扩大的心脏缩小，血流动力学、运动耐量和临床症状等明显改善，甚至降低病死率和再住院率［１，２］。现就其研究进展综述如下：１　ＣＨＦ时肾上腺素能神经及心脏β受体的变化ＣＨＦ时交感神经系统过度激活，血浆中去甲肾上腺素（ＮＥ）等儿茶酚胺物质浓度增高，其增高的程度与心衰的严重程度一致。ＣＨＦ早期，平滑肌、肾脏等器官的交感神经尚未被激活时，心脏的交感神经活性即升高了４～５倍［３］。未治疗的…     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。