井穴放血对急性高原缺氧脑损伤大鼠海马线粒体自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察井穴放血对急性高原缺氧脑损伤大鼠海马线粒体自噬相关蛋白表达的影响,探讨井穴放血治疗急性高原低氧脑损伤的生物学机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、低压低氧组、井穴放血干预组,后两组又按6、12、24、48、72 h分为5个亚组,每组9只。采用实验动物低压模拟舱(海拔5 000 m)制备急性高原低氧脑损伤模型。井穴放血干预组大鼠按"少商""商阳""中冲""关冲""少冲""少泽"的顺序进行放血预处理,每日1次,共7 d。采用HE染色法观察大鼠海马组织变化;ELISA法检测血清缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)含量;Western blot法检测大鼠海马组织Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白的表达情况。结果:与正常对照组比较,低压低氧组各时点海马组织有不同程度损伤,各时点血清HIF-1α、VEGF含量升高(P0.01),12、24 h时海马组织Beclin-1蛋白表达升高(P0.05),各时点海马组织LC3Ⅱ蛋白表达均升高(P0.05,P0.01)。与同时点低压低氧组比较,井穴放血干预组大鼠海马组织损伤程度较轻,各时点血清HIF-1α、VEGF含量升高(P0.01,P0.05),12 h时海马组织Beclin-1蛋白表达升高(P0.05), 24、48、72 h时海马组织LC3Ⅱ蛋白表达明显升高(P0.01)。结论:井穴放血干预可改善急性高原缺氧大鼠海马组织损伤,其机制可能与上调血清HIF-1α、VEGF含量及海马组织中线粒体自噬相关蛋白Beclin-1、LC3表达有关。     

芪丹通脉片对缺氧大鼠血管内皮生长因子的双向调节作用

目的探讨活血化瘀复方中药芪丹通脉片（QDTMT）对缺氧模型大鼠血清血管内皮生长因子（VEGF）浓度的影响及其内皮保护作用的相关分子机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、低氧＋QDTMT组（QDTMT组）、低氧＋生理盐水组（生理盐水对照组），采用低压低氧法建立大鼠缺氧模型，并对肝脏组织进行病理形态学分析；分别于缺氧1周后、缺氧2周后用ELISA试剂盒检测各组大鼠血清中VEGF含量。结果造模后，QDTMT组病理形态学损伤较轻。缺氧1周后，QDTMT组大鼠血清中VEGF含量明显高于正常对照组和生理盐水对照组；缺氧2周后，QDTMT组大鼠VEGF含量仍高于正常对照组，但明显低于生理盐水对照组。结论缺氧后QDTMT对VEGF分泌的双向调节作用，可能为其内皮保护机制之一。     

藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜PKC-β、VEGF、HIF-1α表达的影响

目的：探讨藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜蛋白激酶C（PKC-β）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和低氧诱导因子（HIF-1α）的影响。方法：SD大鼠采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔内注射的方法造模,随机分为模型组、小檗皮低剂量、中剂量和高剂量组、二甲双胍组、羟苯磺酸钙组、小檗碱组和对照组。成模后开始灌胃给药,小檗皮低剂量组、中剂量组、高剂量组分别按成人剂量的5、10、20倍给药,二甲双胍组和小檗碱组按成人剂量的10倍给药,模型组和对照组予灌服蒸馏水。所有实验大鼠于灌胃6周后处死。采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测视网膜PKC-β、VEGF和HIF-1α表达,采用免疫组织化学法检测视网膜HIF-1α蛋白表达。结果：与正常组比较,糖尿病大鼠视网膜中PKC-β、VEGF、HIF-1αmRNA和蛋白表达显著升高（P〈0.01）;与模型组比较,小檗皮高、中剂量组视网膜PKC-β、VEGF和HIF-1α mRNA表达显著降低（P〈0.01）,PKC-β、VEGF和HIF-1α蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,小檗皮低剂量组大鼠PKC、VEGF和HIF-1α表达明显降低（P〈0.05）。结论：小檗皮对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用,其作用机制可能与整体多点调控糖尿病大鼠视网膜的PKC-β、VEGF、HIF-1α表达有关。     

补肾活血方对AGEs条件下体外纯化培养大鼠视网膜Müller细胞HIF-1α介导缺氧信号通路的影响

目的观察在晚期糖基化终末产物(AGEs)条件下,补肾活血方含药血清对大鼠视网膜Müller细胞的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)缺氧信号通路的影响。方法采用SD大鼠制备补肾活血中药含药血清和空白血清,以终浓度50 mg/L的AGEs作为低AGEs条件,终浓度100 mg/L的AGEs作为高AGEs条件,将体外纯化培养的P2代视网膜Müller细胞分为6组,分别置于加入空白血清、中药含药血清、空白血清+低AGEs、空白血清+高AGEs、中药含药血清+低AGEs、中药含药血清+高AGEs的DMEM培养基中,培养48 h后酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞外液中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)含量,逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)测定各组Müller细胞HIF-1αm RNA、VEGFm RNA表达量,比较差异。结果 1.低AGEs组较正常对照组HIF-1α值有升高趋势,但差异无统计学意义(P0.05),HIF-1αm RNA值明显升高,其差异有统计学意义(P0.05),高AGEs组较正常对照组HIF-1α、HIF-1αm RNA值明显升高,其差异有统计学意义(P0.05);低、高AGEs组较正常对照组VEGF、VEGFm RNA值明显升高,其差异有统计学意义(P0.05)。2.正常中药干预组HIF-1α、VEGF、HIF-1αm RNA、VEGFm RNA值接近正常对照组,差异无统计学意义(P0.05)。3.低、高AGEs中药干预组HIF-1α、VEGF、HIF-1αm RNA、VEGFm RNA值均较对应的低、高AGEs组明显降低,其差异有统计学意义(P0.05)。结论补肾活血方含药血清可抑制视网膜Müller细胞在AGEs条件下HIF-1α介导缺氧信号通路的高表达,这可能是补肾活血方防治DR的机制之一。     

山药多糖对肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的观察山药多糖对肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,并探讨其作用机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、山药多糖组,制备肾缺血再灌注损伤大鼠模型,术前7 d,山药多糖组每日给予山药多糖(200 mg/kg)灌胃,假手术组和模型组每日给予等体积生理盐水灌胃,缺血再灌注6 h后,检测各组大鼠血尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)的含量,Western Blot法检测各组肾组织HIF-1α蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组肾组织HIF-1α、VEGF mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组和山药多糖组血清BUN、SCr含量升高(P0.01),肾组织HIF-1αmRNA、蛋白表达及VEGF mRNA表达升高(P0.01);与模型组比较,山药多糖组血清BUN、SCr含量降低(P0.01),肾组织HIF-1α蛋白、mRNA表达及VEGF mRNA表达升高(P0.01)。结论山药多糖对肾缺血再灌注损伤大鼠具有明显保护作用,其机制可能是通过上调肾组织HIF-1α表达进而诱导VEGF的表达而达到治疗作用。     

益肾活血通络法对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏缺氧诱导因子一血管内皮生长因子信号通路干预作用的实验研究

目的探讨缺氧诱导因子Or．（hypoxia-inducible factor α,HIF-α）诱导血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor α,VEGF-α）表达的作用机制及微血管损伤发生的机制及“益肾活血通络法”干预效果,为中医药治疗。肾间质纤维化提供新的依据。方法实验采用单侧输尿管梗阻（unilateral urethral obstruction,UUO）造成肾纤维化动物模型,并以益肾活血方、氯沙坦灌胃对其进行治疗性干预,分别在术后第7天、14天、21天采集肾脏标本,运用免疫组化法检测HIF-α、VEGF在肾脏中的分布、表达。结果与假手术组比较,模型组、治疗组在各时间点HIF-α、VEGF表达均显著上调（P〈0．01）;在各时间点,益肾活血方组和氯沙坦组较模型组大鼠HIF-α、VEGF表达均下调（P〈0．01）。随着干预时间的延长,模型组、治疗组HIF-α、VEGF表达都逐渐增强,但增强幅度明显下调;益肾活血方组较氯沙坦组大鼠HIF-α、VEGF下调明显,有统计学差异（P〈0．05）。结论益’肾活血方能有效地降低HIF-α及VEGF表达,改善UUO大鼠内源性低氧状态,减轻微血管损伤,发挥抗肾纤维化的作用。     

大株红景天注射液对大鼠心肌缺血预处理血管内皮生长因子的影响

目的研究大株红景天注射液对大鼠急性心肌缺血预处理后血管内皮生长因子(VEGF)表达的作用机制。方法大鼠24只随机分为对照组、模型组、缺血预处理组。模型组、缺血预处理组经尾静脉注射垂体后叶素制作大鼠急性心肌缺血模型,分别于造模前、造模1 h及治疗1周后采用双抗体夹心ELISA法测定各组大鼠胎肝激酶1(FLK-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF基因及蛋白表达情况。结果缺血预处理组在造模1 h及治疗1周后FLK-1及FLK-1mRNA、HIF-1α及HIF-1αmRNA、VEGF及VEGF mRNA的表达明显增高,与对照组、模型组及同组缺血预处理前比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论大株红景天注射液可促使急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管内皮新生,减轻血管内皮炎症反应及损伤程度,对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

五子衍宗汤加味治疗非增殖期糖尿病视网膜病变临床研究

<正>糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的并发症。在缺氧时,低氧诱导因子-1α(HIF-1α)可以诱导血管内皮生长因子（VEGF）促进血管生成,使机体的代谢适应缺氧的环境,但是糖尿病患者HIF-1α上调,VEGF的作用被减小,     

疏肝通窍方对急性高眼压大鼠视网膜神经损害的干预作用及对低氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察疏肝通窍方对急性高眼压大鼠视网膜神经损害的干预作用及对低氧诱导因子-1α表达的影响并探讨其作用机制。方法 60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组20只。模型组和干预组采用前房灌注加压法制备急性高眼压大鼠模型。干预组给予疏肝通窍方灌胃,对照组和模型组给予同等剂量生理盐水灌胃,分别于造模后第3日和第7日各组处死大鼠10只,比较各组眼压变化,HE染色观察视网膜形态学变化,TUNEL法检测视网膜细胞凋亡,ELISA法检测血清脂质过氧化物丙二醛(MDA)、抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,RT-PCR和免疫组织化学法检测视网膜低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达。结果造模前各组大鼠眼压水平比较,差别不大(P 0.05)。造模后模型组眼压高于对照组同期,干预组眼压则低于模型组同期(均P 0.05)。对照组视网膜组织染色均匀,结构完整清晰,神经节细胞排列规则;模型组视网膜组织水肿,随时间水肿加重,各层结构紊乱,神经节细胞排列疏松,数量减少,明显萎缩变薄;干预组视网膜肿胀减轻,神经节细胞数量较模型组增加,视网膜萎缩程度减轻。造模前各组大鼠细胞凋亡指数比较,差别不大(P 0.05)。造模后,模型组视网膜细胞凋亡指数高于对照组同期,干预组视网膜细胞凋亡指数低于模型组同期,但高于对照组同期(均P 0.05)。模型组第3天、第7天血清MDA高于对照组,SOD和GSH-Px低于对照组。而干预组第3日、第7日血清MDA水平与模型组比较则降低,SOD和GSH-Px则升高(P 0.05)。模型组第3日、第7日HIF-1αm RNA水平高于对照组,而干预组第3日、第7日HIF-1αmRNA水平则低于模型组同期,但高于对照组(均P 0.05)。模型组第3日、第7日视网膜可见HIF-1α棕黄色颗粒表达,模型组第3日、第7日HIF-1α蛋白IOD值高于对照组,干预组第3日、第7日HIF-1α弱于模型组,第3日、第7日HIF-1α蛋白IOD值低于模型组(均P 0.05)。结论疏肝通窍方可保护急性高眼压大鼠视网膜组织,减轻损害程度,其机制可能与抑制机体氧化应激和降低视网膜HIF-1α表达有关。     

针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠HIF-1α/NLRP3炎性信号的影响

目的：观察“醒脑开窍”针法对脑缺血再灌注损伤大鼠缺氧诱导因子1α (HIF-1α)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响，探讨针刺抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法：将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组及非穴位针刺组，每组18只。采用改良Longa线栓法建立急性局灶性脑缺血大鼠模型，缺血2 h后进行再灌注建立脑缺血再灌注大鼠模型。再灌注后即刻，针刺组采用“醒脑开窍”针法进行干预，穴取双侧“内关”及“水沟”，非穴位针刺组在非穴点行针刺干预，留针30 min。各组大鼠于再灌注后24 h取材。Zea-Longa神经功能缺损评分法对大鼠脑神经功能损伤程度进行评估，TTC染色法观察大鼠脑梗死体积百分比，HE染色法观察大鼠右侧大脑皮层组织形态，Western blot法检测大鼠右侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3蛋白表达情况。结果：与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比升高（P<0.01）,HIF-1α、NLRP3蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较，针刺组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比降低（P<0.01）,HIF-1α、...     

补阳还五汤对SD大鼠脊髓损伤后HIF-1α、VEGF表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对SD大鼠脊髓损伤后脊髓损伤节段HIF-1α、VEGF蛋白含量的影响。方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、BYHWT组、模型组,每组18只;假手术组单纯去除T10椎板,不损伤脊髓,模型组及BYHWT组均采用Allen’s垂直打击法制备T10节段SCI大鼠模型,评价各组大鼠于造模前、造模后1 d及1周后的行为学BBB功能评分,于造模后1周取材,通过HE染色观察脊髓组织形态学改变,通过ELISA、免疫印迹检测HIF-1α、VEGF蛋白表达情况。结果:BYHWT组BBB评分高于模型组,损伤节段组织中HIF-1α、VEGF含量明显高于假手术组、模型组(P0.01)。结论:补阳还五汤能促进脊髓损伤后SD大鼠脊髓损伤节段HIF-1α、VEGF表达,改善局部缺血缺氧环境,减轻因脊髓损伤缺血缺氧时对脊髓造成的损伤,从而促进神经功能恢复。     

加味通幽汤对食管癌Eca-109细胞mTOR/HIF-1α通路及肿瘤缺氧相关因子的影响

目的研究加味通幽汤对食管癌Eca-109细胞雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通路及肿瘤缺氧相关因子的影响及干预机制。方法采用加味通幽汤、生理盐水分别灌胃大鼠14 d制备含药和对照血清。实验分为常氧组、缺氧组、常氧含药血清组和缺氧含药血清组,常氧组加入10%对照大鼠血清培养;缺氧组加入10%对照大鼠血清、10%CoCl 2缺氧诱导液培养;常氧含药血清组加入10%含药大鼠血清培养;缺氧含药血清组加入10%含药大鼠血清、10%CoCl 2缺氧诱导液培养。Western blot法检测各组中mTOR、HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮细胞钙黏连蛋白(VE-cadherin)表达情况;实时荧光定量RT-PCR法检测各组中mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin mRNA表达情况;免疫荧光法分析各组中VE-cadherin与HIF-1α共表达情况。结果Western blot分析显示,缺氧组细胞中mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin蛋白表达水平均显著高于常氧组(P均<0.05),缺氧含药血清组mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin蛋白表达水平均显著低于缺氧组(P均<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测显示,缺氧组细胞中mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin mRNA相对表达水平显著高于常氧组(P均<0.05),缺氧含药血清组mTOR、HIF-1α、VEGF、OPN、VE-cadherin mRNA相对表达水平显著低于缺氧组(P均<0.05)。免疫荧光结果显示,缺氧组HIF-1α与VE-cadherin荧光强度较常氧组明显增强,缺氧含药血清组HIF-1α与VE-cadherin荧光强度较缺氧组均显著降低。结论加味通幽汤可显著抑制缺氧微环境下食管癌Eca109细胞mTOR/HIF-1α通路及肿瘤缺氧相关因子VEGF、OPN和VE-cadherin蛋白和mRNA表达。     

藏药三果汤散对高原红细胞增多症模型大鼠氧化应激损伤的作用机制研究

目的:观察藏药三果汤散对高原红细胞增多症模型大鼠抗氧化等指标表达的影响,探究三果汤散干预高原红细胞增多症模型大鼠的氧化应激作用机制。方法:雄性SD大鼠48只,每组8只,随机分为平原组,高原模型组,阳性对照组,三果汤高、中、低剂量组。将模型组和给药组置于5000米高原环境模拟舱内,40 d后测定大鼠血常规、血流变、SOD、MDA、EPO、ROS、HIF-1α等指标,探究三果汤散干预高原红细胞增多症大鼠氧化应激的作用机制。结果:与高原模型组相比,三果汤高剂量组和中剂量组的RBC、HGB和HCT显著降低,血液黏稠度也有显著改善,三果汤散高剂量组大鼠脑组织HIF-1α蛋白含量降低。与平原对照组相比,高原模型组大鼠血清SOD活性显著降低,MDA含量显著升高,脑组织HIF-1α蛋白含量显著升高,EPO浓度显著升高,EPO mRNA表达明显升高(P 0. 05)。结论:三果汤散具有明显的抗缺氧作用,能降低耗氧量、清除氧自由基、降低脂质过氧化反应、抑制缺氧造成的血流变改变、改善机体的能量代谢,这可能是其治疗高原红细胞增多症模型大鼠氧化应激损伤的作用机制。     

芪明颗粒防治早期放射性视网膜病变的机制研究

目的通过观察芪明颗粒作用于早期放射性视网膜病变(RR)模型动物内质网应激反应相关蛋白(CHOP)及HIF-1α-VEGF信号通路,探讨中医药防治放射性视网膜早期病变相关机制。方法建立RR大鼠模型,将75只SD大鼠随机分为3组:模型组,中药组,正常组,每组25只。放射3个月后开始连续灌胃。用药1个月、3个月后,通过HE染色观察视网膜形态学改变;免疫组织化学染色法检测视网膜CHOP蛋白及HIF-1α、VEGF表达情况。结果用药1个月后,CHOP蛋白表达、HIF-1α、VEGF表达:与模型组比较,中药组均少于模型组,CHOP蛋白表达(t=2.563,P=0.028)、HIF-1α(t=7.873,P=0.000)、VEGF表达(t=4.072,P=0.002),均有统计学意义(P0.05);用药3个月后,视网膜组织水肿显著减轻,细胞排列及形态改善,CHOP蛋白表达、HIF-1α、VEGF表达:中药组均少于模型组,CHOP蛋白表达(t=9.513,P=0.000)、HIF-1α(t=7.412,P=0.000)、VEGF表达(t=11.986,P=0.000),均有统计学意义(P0.05)。中药组CHOP蛋白及HIF-1α、VEGF表达下调接近正常组织水平。结论芪明颗粒通过干预内质网应激相关CHOP蛋白表达,降低HIF-1α表达,抑制视网膜VEGF表达,进而改善视网膜组织缺血缺氧及血管新生从而干预早期放射性视网膜病变。     

大鼠酒精性肝病形成中肝脏HIF-1α VEGF mRNA表达的变化

目的：观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其下游分子VEGF基因在酒精性肝病大鼠肝组织中的表达,分析它们与酒精性肝病发生发展的关系。方法：以白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃14周建立酒精性肝病动物模型,常规HE和Masson染色动态观察4、8、14周时肝组织脂肪变程度和炎症程度的变化;XOD法检测血清SOD活性,TBA法检测血清MDA含量;ELISA法检测肝组织中TNF-α含量;RT-PCR技术动态检测肝组织HIF-1α及其下游分子VEGF mRNA的表达。结果：随着饮酒时间的延长大鼠血清MDA含量和肝组织TNF-α水平、HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达逐渐增加,血清SOD活性逐渐降低,同时肝组织脂肪变程度和炎症程度逐渐加重;在造模4周,血清MDA和SOD水平、肝组织TNF-α含量、HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达与正常组差异无显著性（P〉0.05）;在造模8周MDA和TNF-α含量较正常组明显增高、SOD活性较正常组明显降低（P〈0.01、P〈0.05）,HIF-α、VEGF mRNA表达较正常组有增高趋势,但差异无显著性;至造模14周时MDA和TNF-α含量、HIF-1α和VEGF mRNA表达均较正常组及模型4周组显著增高（P〈0.01、P〈0.05）,SOD活性则明显降低;相关性分析显示,HIF-1αmRNA表达水平与肝组织脂肪变程度、炎症程度、VEGFmRNA表达、TNF-α含量及血清MDA水平均呈明显的正相关,而与血清SOD活性呈明显的负相关（P〈0.01、P〈0.05）。结论：HIF-1α及其下游因子VEGF参与酒精性肝病的发生发展。     

加减驻景方含药血清对CoCl_2诱导ARPE-19细胞表达VEGF及HIF-1α的影响

目的探讨加减驻景方含药血清对二氯化钴(CoCl_2)诱导后人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞系)中血管内皮生长因子(VEGF)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达的影响。方法 1.体外培养ARPE-19细胞,取对数生长良好的细胞用于实验,分为正常组,缺氧模型组,阳性对照组、含药血清组,并设立不同时间点。2.酶联免疫吸附试验(ELISA)观察CoCl_2诱导后不同时间、各组细胞上清液中HIF-1α的表达。3.蛋白质印迹法(Western blot)观察CoCl_2诱导后不同时间、各组细胞中VEGF、HIF-1α的表达情况。结果缺氧损伤后可诱导ARPE-19细胞中VEGF、HIF-1α蛋白的表达增加;与正常组比较,缺氧模型组VEGF及HIF-1α的表达高于正常组,差异具有统计学意义(P0.05);含药血清组与模型组比较,VEGF及HIF-1α的表达低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论加减驻景方含药血清对缺氧损伤后ARPE-19细胞中VEGF、HIF-1α蛋白的表达有抑制作用。     

高压氧干预对大鼠脊髓继发性损伤中HIF-1α及VEGF表达的影响

目的观察大鼠脊髓损伤及高压氧干预后不同时期受损脊髓组织内血管内皮生长因子(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,探讨高压氧干预对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护机制。方法将成年SD大鼠80只采用改良Allen’s方法制作脊髓损伤模型,然后将大鼠随机分为2组,损伤组不给予干预措施,干预组辅助以高压氧干预。2组分别于损伤后1,3,7,14 d随机抽取6只大鼠,采用BBB方法评价大鼠后肢运动功能,手术取出受损节段脊髓组织,采用荧光定量PCR法及Western-Blot法检测HIF-1α及VEGF的表达情况。结果 2组大鼠损伤后均表现为双下肢全瘫,BBB评分0~1分;干预组损伤后7,14d BBB评分明显高于损伤组(P均0.05),损伤后3,7,14 d HIF-1αmRNA和蛋白的表达均明显低于损伤组(P均0.05),术后7,14 d VEGF mRNA和蛋白的表达均显著高于损伤组(P均0.05)。结论高压氧干预能够抑制HIF-1α的表达,且不依赖HIF-1α的作用实现VEGF的高表达,延长VEGF高表达的时间,从而发挥神经保护作用。     

大鼠预缺氧模型的制备

目的 制备简单易行的大鼠预缺氧模型,并观察其对脑组织低氧诱导因子-1（HIF-1）α蛋白及mRNA表达的影响.方法 雄性SD大鼠12只,随机分为缺氧组和对照组.缺氧组在固定体积的容器中缓慢输入混合气体,调节氧气和氮气的流入速度,使测氧仪监测到的O2浓度始终保持在12%,然后放入大鼠,每天4 h;对照组大鼠在相同容器中通入空气,每天4 h.7 d后进行免疫组化和RT-PCR测定脑组织HIF-1α蛋白及mRNA表达.结果 缺氧组较对照组脑组织中HIF-1α蛋白和mRNA表达增多（P〈0.01）.结论 此模型简单易行,达到预缺氧的要求.     

红景天对低氧条件下内皮细胞HIF-1α、HIF-1β和VEGF表达的影响

目的:观察红景天对低氧条件下人脐静脉内皮细胞表达低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、低氧诱导因子-1β(HIF-1β)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:采用XTT比色法检测红景天不同干预时间、浓度对细胞增殖的影响,以确定最佳干预条件;采用SYBRGreenI荧光染料实时定量PCR法检测mRNA表达水平;WesternBlot法检测蛋白表达水平。细胞分3组:正常氧对照组,低氧对照组,红景天干预组。结果:红景天干预的最佳条件为24h、10μg/mL。与正常氧相比,低氧条件下内皮细胞HIF-1α、HIF-1β和VEGF蛋白表达均升高(P<0.01);红景天促进了低氧条件下内皮细胞HIF-1α和VEGF的基因和蛋白表达(P<0.01),而对HIF-1β的基因和蛋白表达没有影响。结论:红景天促进低氧条件下内皮细胞HIF-1α及VEGF的表达可能是红景天抗缺氧和促血管新生作用的机制之一。     

地龙降压胶囊对慢性间歇低氧高血压模型大鼠心肌缺氧的影响

目的:观察地龙降压胶囊对慢性间歇低氧高血压大鼠的影响。方法:40只SD雄性大鼠随机分成5组,分为空白对照组、慢性间歇低氧组、慢性间歇低氧+地龙降压胶囊低剂量组、慢性间歇低氧+地龙降压胶囊中剂量组、慢性间歇低氧+地龙降压胶囊高剂量组。慢性间歇低氧大鼠在低压氧舱内,每天8h给予间歇低氧循环干预2周,同时使用地龙降压胶囊进行干预后检测相关酶的含量,免疫组化和Western blot分别检测心肌组织和心肌细胞低氧诱导因子HIF-1α的表达情况。结果:地龙降压胶囊对慢性间歇低氧诱发的大鼠血压升高有明显改善作用,心肌组织和心肌细胞HIF-1α的表达以及乳酸脱氢酶(LDH)含量比间歇低氧大鼠组显著降低。结论:地龙降压胶囊可能通过改善组织缺氧而防止慢性间歇低氧诱发的大鼠血压升高。