3H—TXB_2放射免疫测定药盒

血栓素A_2(TXA_2)和前列环素(PGI_2)是花生四烯酸经环加氧酶代谢的两个主要代谢产物,TXA_2生物半衰期短(30秒),很快代谢成TXB_2,可通过测定TXB_2的含量来间接反映TXA_2的水平,作者已成功地制备了TXB_2放射免疫测定药盒。每个药盒可供测130管。可将血浆样品经乙酸乙酯提取后测定,也可直接测定,方法极为简便。本药盒测定范围为6.25pg～400pg,抗体工作滴度为1:1000,结合率42.3±3.3%,按Scatchard作图法求得抗TXB_2血清的平衡常数K值为8.029×10~9(L/M),非     

3—取代—1,2,3,9—四氢—4H—咔唑—4—酮衍生物的合成

根据新型5-HT_3受体拮抗剂Ondansetron的结构特点,本文用2-烷基取代的苯并咪唑及苯并三唑代替原来结构中的咪唑环,合成了五个衍生物Ⅵ_(a-d)及Ⅶ。起始原料为环己酮,经Fischer吲哚合成反应、氧化、乙基化、Mannich反应,与盐酸成盐及缩合等反应合成了目的物。对其中的Mannich反应条件进行了改进,使其收率提高到57.8%。     

^3H—精氨酸转化测定一氧化氮合酶活性

建立＾３Ｈ－精氨酸转化测定原生型和诱生型一氧化氮合酶的方法。方法 以二乙氨乙基（ＤＥＡＥ）纤维素柱层析和２、５－ＡＤＰ琼脂糖亲合层析法纯化牛、猪及大鼠小脑一氧化氮合酶、用＾３Ｈ－精氨酸转化法测定一氧化氮合酶活性。结果 猪、大鼠小脑组织匀浆一氧化氮合酶活性分别为６６９、６８８ｐｍｏｌ．ｍｇ＾－１．ｍｉｎ＾－１分别纯化了４４６０倍、２６４６倍。获得率分别为２．７％、２７％。纯化后的猪和大鼠小脑一氧化氮     

用生物发光法监测RBC—ATP含量及血液保存期RBC—ATP值的变化

以RBC-ATP含量作为血液保存质量的监测在国外已应用多年。我们用虫发光素酶生物发光法测定健康成年人32例RBC-ATP含量,以及血液保存期间RBC-ATP含量的变化,发现血液保存时间愈长,RBC-ATP含量下降愈显著。我们认为虫发光素酶生物发光法测定RBC-ATP含量,方法简便快速,准确可靠,实为血液保存质量监测的最佳选择。     

ATP治疗频发性室性早搏3例

ＡＴＰ治疗频发性室性早搏３例北京总参炮兵技术装备研究所门诊部张胜改本组３例均为女性，年龄４５～６２岁。其中１例为频发性、多源性室早，病程５年；另２例为多发性、间位性室早，病程１～２年。均曾服用冠心苏合丸、丹参片等治疗，但效果不作且停药后复发。治疗：Ａ...     

ATP穴位注射经络反应3例

<正> ATP(三磷酸腺苷)小剂量(20毫克)阳陵泉穴位注射引起经络反应少见报道,近三年来,我们曾遇到3例,现报告如下。例1 傅某,男,36岁,工人,1983年9月30日入院。临床诊断:坐骨神经痛。入院后行针灸治疗,配合维生素B_1 100毫克、维生素B_(12)250微克,分别阳陵泉、足三里穴交替注射,针感良好,注射后无不良反应。一周后加用ATP     

14—3—3蛋白

14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族，主要以同源／异源二聚体形式存在，通过磷酸化丝／苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的两个结构域结合。七种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有着密切的关系。14-3-3通过调节靶蛋白间的相互作用在MAPK级联放大效应等信号转导途径中发挥调控作用。     

微卡（VACCAE）联合2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗初治涂阳肺结核的临床效果

目的应用微卡(VACCAE)联合常规抗结核药物2H3R3Z3E3/4H3R3治疗初治涂阳肺结核的临床疗效。方法选取100例初始涂阳肺结核患者,随机分为对照组50例和观察组50例,两组均采用"世界银行贷款+中国结核病控制项目"的2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗,观察组在上述常规化疗药基础上联用微卡22.50μg深部肌肉注射;观察两组的痰菌阴转率、病灶吸收率、空洞闭合率、临床症状改善情况、不良反应发生率。结果治疗1个月后,观察组临床症状完全消失率显著高于对照组(P<0.05)。观察组的痰菌转阴率、病灶吸收率、空洞闭合率均优于对照组(P<0.05)。微卡注射后无严重不良反应。结论微卡联合常规抗结核药物2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗初治涂阳肺结核能够快速缓解临床症状,且疗效显著不良反应小,具有临床应用价值。     

Hypoxia-induced MTA1 promotes MC3T3 osteoblast growth but suppresses MC3T3 osteoblast differentiation

Background

Bone fracture is one of the most common physical injuries in which gene expression and the microenvironment are reprogramed to facilitate the recovery process.

Methods

By specific siRNA transfection and MTT assay, we evaluated the effects of metastasis-associated gene 1 (MTA1) in osteoblast growth. To show the role of MTA1 in osteoblast under hypoxia conditions, by overexpressing and silencing MTA1 expression, we performed mineral deposition and alkaline phosphatase activity assay to observe the differentiation status of osteoblast cells. Real-time PCR and Western blot assays were adopted to detect the expression of certain target genes.

Results

Here, we reported that hypoxia-induced MTA1 expression through hypoxia-induced factor 1 alpha (HIF-1α) and stimulated the growth of osteoblast MC3T3 cells. Silencing of MTA1 through specific siRNA suppressed MC3T3 cell growth and elicited cell differentiation and induced alkaline phosphatase activation and the upregulation of bone morphogenetic protein-2 and osteocalcin.

Conclusions

We found that MTA1 was regulated by HIF-1α in hypoxia circumstance to suppress osteoblast differentiation. These findings provide new insights for bone fracture healing and new strategies to develop potential targets to promote fracture healing.

Electronic supplementary material

The online version of this article (doi:10.1186/s40001-015-0084-x) contains supplementary material, which is available to authorized users.     

稳定表达神经营养素-3的NIH3T3细胞建立及鉴定

目的：建立稳定表达NT3的NIH3T3细胞株，通过体外共培养实验观察其对耳蜗螺旋神经节细胞生长的影响．方法：以阳离子脂质体作为载体，将携带有外源性基因NT3的重组真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3转染小鼠成纤维细胞，进行RT-PCR，Western-blot分析及免疫组化鉴定，并与耳蜗螺旋神经节细胞进行共培养实验．结果：得到抗G-418的阳性细胞克隆；RT-PCR的产物约为744 bp；Western-blot可见一清晰的蛋白条带，与NT3的蛋白分子量相符合．NT3免疫组化染色结果显示转染NT3-cDNA的NIH3T3细胞胞质呈棕黄色着色．NT3转染组细胞与耳蜗螺旋神经节细胞共培养2wk后，与对照组相比，耳蜗螺旋神经节细胞无明显减少．结论：成功建立了稳定表达NT3的NIH3T3细胞株；该细胞对耳蜗螺旋神经节细胞有很好的营养支持作用．     

EB病毒核抗原3C提高Gemin3基因的表达

  目的 探讨EB病毒核抗原(EBNA)3C对Gemin3基因表达的影响。方法 共转染EBNA3C和Gemin3基因至HEK293细胞。依靠慢病毒载体介导发卡RNA干涉敲减EBNA3C基因的表达,并经嘌呤霉素筛选获得稳定的EBNA3C低表达细胞系,采用Western blot检测EBNA3C对Gemin3蛋白表达的影响。结果 Gemin3基因的表达随着EBNA3C表达量的增加而增加,呈剂量依赖性,在EBNA3C基因敲减细胞中Gemin3的表达减少。结论EBNA3C可提高Gemin3基因表达水平。     

新生儿脐血血清rT_3及T_3/rT_3值的测定

测定300例新生儿脐血血清T_4、T_3、rT_3及T_3/rT_3值。其平均值±标准差依次为98.65±27.6ug/L,0.49±0.19ug/L,3.06±0.25ug/L;T_3/rT_3值平均为0.16。脐血T_4、rT_3值高于正常成人,而T_3及T_3/rT_3值明显低于正常成人。     

血小板生长因子在NIH3T3成纤维细胞和MT3转化细胞应答中的作用

血小板生长因子(PDGF)通过促进细胞外Ca~(2 )内流,增加细胞内Ca~(2 )浓度,但在亲代NIH3T3成纤维细胞和转化的MT3细胞中,却表现出不同的作用。在亲代NIH3T3成纤维细胞中,PDGF能够抑制舒缓激肤介导的细胞内Ca~(2 )浓度增加,未能见到细胞内Ca~(2 )波动现象;而在转化的MT3细胞中,PDGF丧失了对舒缓激肽介导的细胞内Ca~(2 )浓度增加的抑制作用,常常引起细胞内Ca~(2 )波动现象。对于DNA的合成,PDGF在两种细胞中,也表现出有时程的差异。