淫羊藿、巴戟天中药提取物对恒河猴M0、M1型单核衍生巨噬细胞基因表达的影响

【目的】探讨中药淫羊藿、巴戟天提取物(中药注射液喘可治的组成)对恒河猴单核衍生的巨噬细胞在未极化(M0)、M1极化条件下基因表达的影响,分析其可能的免疫调节的作用机制。【方法】采用密度梯度离心法分离中国恒河猴外周血单个核细胞(PBMCs),采用贴壁法纯化出单核细胞,并以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激5 d以使单核细胞分化成巨噬细胞;然后不加入极化因子(M0)或以干扰素γ(IFN-γ,继续培养2 d)诱导巨噬细胞极化为M1表型,同时分别加入淫羊藿、巴戟天提取物进行干预;然后提取m RNA并逆转录后,采用实时荧光定量PCR检测CCR5、CD4、CTLA-4、Fox P3、IDO、IL-10、TGF-β等基因表达量。【结果】与空白对照组比较,加入巴戟天提取物培养的M0巨噬细胞基因表达上调不明显;经淫羊藿提取物培养的M0巨噬细胞,CCR5基因表达量上调4.21倍,TGF-β上调7.66倍,Fox P3、IL-10轻度上调,而CD4、CTLA-4、IDO等基因表达改变倍数无明显变化。经巴戟天提取物刺激的M1型巨噬细胞,CTLA-4基因表达量上调3.22倍,Fox P3上调3.69倍,CCR5、CD4、IL-10、IDO基因改变倍数均无明显变化,TGF-β未测出;而由淫羊藿提取物刺激的M1型巨噬细胞,IL-10的表达量上调11.83倍,Fox P3上调4.55倍,IDO、CCR5、CD4、CTLA-4基因改变倍数无明显变化,TGF-β未测出。【结论】巴戟天和淫羊藿提取物培养能够上调M1型巨噬细胞IL-10、Fox P3、CTLA-4等抑炎基因表达,淫羊藿提取物能够上调M0巨噬细胞CCR5和TGF-β等基因表达,促进病原体清除和组织修复,从而发挥多效免疫调节作用。     

仝小林运用淫羊藿、巴戟天、枇杷叶治疗老年哮喘经验

淫羊藿、巴戟天、枇杷叶三味小方用于治疗老年肺肾虚型哮喘,在临床中取得了良好的疗效.哮喘的病因之一,是风寒湿邪侵袭在表为标;其次是素体虚弱,年老体虚,肾阳虚衰在里为本,病位在肺肾、脾胃,治疗上以扶阳补肾止咳为原则.仝小林院士多用淫羊藿、巴戟天调态,温补肾阳用以固本,维持肾可纳气作用,以平喘;枇杷叶打靶,补肺化痰止咳平喘.用量方面,淫羊藿、巴戟天、枇杷叶常用剂量各为15 g,临床中可根据病情酌情调整用量,其最大剂量可至30 g,但须注意淫羊藿、巴戟天类激素作用对患者的影响.     

巴戟天盐炙前后寡聚糖类与环烯醚萜类指纹图谱差异

目的:对比巴戟天盐炙前后寡聚糖类与环烯醚萜类指纹图谱的差异,为巴戟天与盐巴戟天的质量评价提供参考。方法:采用超高效液相色谱仪串联电雾式检测器(UPLC-CAD),以乙腈为流动相A,以水为流动相B,梯度洗脱,柱温为35℃,流速为0.4 mL·min^-1,建立寡聚糖类指纹图谱;采用超高效液相色谱仪串联二极管阵列检测器(UPLC-DAD),以甲醇为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,柱温为35℃,流速为0.4 mL·min^-1,检测波长为235 nm,建立环烯醚萜类指纹图谱。结果:巴戟天盐炙前后具有相同的指纹峰,寡聚糖类指纹图谱具有15个共有峰,环烯醚萜类指纹图谱具有7个共有峰;通过主成分分析(PCA),寡聚糖类指纹图谱中确定了1个主成分因子,累积方差贡献率达到90.3%,炮制前后平均综合得分差异较大;环烯醚萜类指纹图谱中确定了3个主成分因子,累积方差贡献率达到87.7%,炮制前后平均综合得分差异较大。结论:建立了巴戟天的寡聚糖、环烯醚萜类指纹图谱,该分析方法对巴戟天质量评价具有一定意义,并对比巴戟天盐炙前后指纹图谱的的区别,为建立盐巴戟天饮片质量标准提供参考。     

巴戟天抗抑郁成分药理机制研究进展

中药巴戟天有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效,常用于治疗阳痿遗精、宫冷不孕、筋骨痿软、风湿痹痛等病症。近年来时有研究报道采用巴戟天或其组成的中药复方用于抑郁症的治疗。巴戟天主要的抗抑郁活性成分有巴戟天寡糖、巴戟甲素和巴戟天多糖等,巴戟天抗抑郁成分的药理机制可能是减少海马区神经元损伤、减少脑组织氧化损伤、直接增强5-HT神经递质的表达、提高神经营养因子BDNF的表达并调节海马神经可塑性。     

南药巴戟天的全球产地区划

目的:开展巴戟天全球产地生态适宜性分析,为合理布局巴戟天的人工引种提供科学依据,实现巴戟天资源的保护和有效利用。方法:采用药用植物全球产地生态适宜性区划信息系统(GMPGIS)系统对搜集到的巴戟天Morinda officinalis How道地产区、主产区及野生分布区共100个样点进行生态因子的聚类分析,得到巴戟天全球范围的生态适宜区和潜在种植区。结果:巴戟天在世界范围的生态适宜产区为中国、越南、巴西、老挝和加纳等国家;巴戟天在中国的主要适宜产区为广东、福建、广西、海南等省区。结论:中国为巴戟天的最主要产区,应加强对巴戟天的人工种植研究。GMPGIS为巴戟天的人工种植区域选择提供科学指导。     

巴戟天对运动训练大鼠骨骼肌自由基代谢及运动能力的影响

目的：通过建立力竭游泳训练模型，观察巴戟天对运动训练大鼠骨骼肌自由基代谢及运动能力的影响。 方法：实验于2004—04／12在郑州大学医学院药理教研室完成。选择雄性SD大鼠24只，随机分为安静对照组，过度训练组，过度训练＋巴戟天组，每组8只。过度训练组、过度训练＋巴戟天组大鼠均采用递增负荷游泳训练建立力竭游泳训练模型，每周训练6d，共7周。过度训练＋巴戟天组大鼠同时于训练前1h灌服巴戟天4．5mg／（kg&;#183;d）。安静对照组只进行常规游泳训练，30min／d，每周训练6d，共训练7周。7周后将各组大鼠处死，立即分离骨骼肌，用预冷的生理盐水洗净血污，滤纸吸干，按1：9（W／V）加入低温磷酸盐缓冲液（pH7．2）匀浆，离心（5000r／min，25min，0～4℃），取上清液，在1～40C的冰箱保存，以测定超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、Ca^2＋-ATP酶和Na^＋-K^＋-ATP酶活性。组间均数比较采用t检验。 结果：各组大鼠均进入结果分析，无脱落。过度训练组大鼠力竭时间明显低于安静对照组和过度训练＋巴戟天组（P〈005）；经过7周训练，过度训练组大鼠肌细胞超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、Ca^2＋-ATP酶和Na^＋-K^＋-ATP酶活性显著低于安静对照组和过度训练＋巴戟天组（P〈0.05），安静对照组与过度训练＋巴戟天组无显著性差异。 结论：巴戟天可显著提高运动大鼠抗自由基氧化的功能，使大鼠运动能力明显增强。     

HPLC测定不同产地巴戟天中5种茜草素型蒽醌的含量

目的:建立用HPLC同时测定不同产地巴戟天中5种茜草素型蒽醌含量的方法。方法:采用HPLC测定巴戟天中1-甲氧基-2-羟基蒽醌、1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素的含量。色谱条件:Ecosil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸梯度洗脱,流速:0.8 m L/min,检测波长:277 nm,柱温:30℃。结果:1-甲氧基-2-羟基蒽醌、1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素5种蒽醌质量浓度分别在0.2856~34.27μg/m L、0.3268~39.22μg/m L、0.3450~41.40μg/m L、0.1248~14.98μg/m L、0.0508~6.096μg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.4%、100.2%、101.4%、97.2%、103.2%(RSD均小于3%)。对10个不同产地的巴戟天样品进行测定,1-甲氧基-2-羟基蒽醌、1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素的含量变化范围为0.0025~0.0722 mg/g、0.0016~0.0658 mg/g、0.0022~0.0684 mg/g、0.0182~0.3965 mg/g、0.0014~0.0179 mg/g。结论:该方法准确、可靠,可同时测定巴戟天中5种茜草素型蒽醌成分的含量,为评价不同产地巴戟天质量提供了科学依据。     

芪仙地花颗粒质量标准的研究

目的建立芪仙地花颗粒(黄芪、淫羊藿、虎杖等)的质量标准。方法 TLC、HPLC法分别定性鉴别黄芪、巴戟天,HPLC法测定淫羊藿苷、虎杖苷含有量。结果 TLC斑点清晰,阴性无干扰;HPLC色谱图中阴性对照无干扰;淫羊藿苷、虎杖苷分别在0.51～25.45、0.54～27.00μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=1),平均加样回收率分别为98.79%(RSD=4.54%)、99.50%(RSD=3.47%)。结论该方法准确、稳定、可行,可用于芪仙地花颗粒的质量控制。     

巴戟天萃取物对环磷酰胺诱导睾丸损伤模型大鼠的影响

目的:观察巴戟天萃取物(MO)对环磷酰胺(CTX)诱导睾丸损伤模型大鼠的影响及可能机制。方法:雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、CTX+NS组、CTX+MO不同剂量组。以环磷酰胺构建大鼠睾丸损伤动物模型;巴戟天水提物用乙酸乙酯萃取后取水层成分给予每组治疗组灌胃。观察各组大鼠睾丸微细结构,比较卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白及mRNA表达的差异。结果:光镜下观察可见CTX+NS组明显病理改变,各治疗组的睾丸生精小管的结构明显改善,FSHR mRNA和FSHR蛋白表达明显高于CTX+NS组,差异具有统计学意义。结论:巴戟天萃取物对环磷酰胺诱导睾丸损伤模型大鼠具有修复作用,可能与巴戟天萃取物能促进睾丸FSHR高表达有关,并以30g·kg~(-1)·d~(-1)浓度效果最佳。     

制巴戟天炮制工艺正交设计实验研究

目的:优化制巴戟天最佳炮制工艺条件.方法:用正交设计实验对巴戟天炮制工艺进行研究.结果:取净巴戟天置人等量甘草汁(相当6%甘草)中浸润约10min,倾倒人锅中,8～10min拌炒至甘草汁被吸尽,取出,趁热抽去木心,切段,干燥.结论:该实验结果为制定巴戟天饮片的质量标准提供了依据.