双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参＊

目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对，设计特异性的引物探针，建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq （Probe qPCR） 10 μL，人参上下游引物各0.5 μL，西洋参上下游引物各0.3 μL，人参与西洋参特异性探针各0.4 μL，DNA模板2 μL，灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s；然后以95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品，包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA，以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测，用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线，人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线，其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。     

吲哚菁绿荧光示踪在急性胆囊炎腔镜手术中的应用价值

目的探索低剂量吲哚菁绿(ICG)荧光腹腔镜示踪在急性胆囊炎患者腔镜手术中的应用价值。方法收集2020年1月至2021年9月常州市第二人民医院198例因急性胆囊炎行腹腔镜胆囊切除术的患者临床资料, 其中荧光组采用术前15 min静脉注射ICG后术中实时荧光示踪肝外胆道, 并与常规白光组(对照组)对比胆管辨别效率、手术时间、术中出血及术后并发症情况。结果纳入的198例患者中, 荧光组97例、对照组101例;男86例、女112例。两组的年龄[52(44, 63)比56(46, 68)岁, P>0.05)]、慢性炎症病史[34(35.1%)比31(30.7%)例, P>0.05]等临床基线资料差异均无统计学意义(均P>0.05), 具有可比性。与对照组相比, 荧光组患者具有胆管识别效率高[18(16, 19)比38(28, 55)min, P<0.001]、手术时间短[45(40, 60)比80(65, 100)min, P<0.001]、术中出血少[10(5, 15)比60(20, 100)ml, P<0.001]、术后肝功能损害小[丙氨酸转氨酶35.0(...     

经聚乙烯亚胺钝化的荧光碳点负载阿霉素抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移侵袭的治疗研究

目的研究利用经聚乙烯亚胺（PEI）钝化的荧光碳点（CD）装载阿霉素（DOX）进行药物递送，旨在增加DOX对非小细胞肺癌的治疗作用，减少DOX的心肌毒性。 方法通过一步微波加热法将甘油和PEI的混合物制备成CD-PEI，并通过静电效应将DOX装载至CD-PEI。采用CCK8实验检测CD-PEI-DOX对非小细胞肺癌细胞A549的增殖能力的影响；Transwell实验评估CD-PEI-DOX对A549细胞迁移侵袭能力的影响；最后通过体内动物实验评估CD-PEI-DOX的心肌毒性以及对非小细胞肺癌皮下肿瘤生长的抑制效果。 结果体外细胞实验证实，对比单纯的DOX处理组，CD-PEI-DOX对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移侵袭能力的抑制作用更为显著。体内实验证实，CD-PEI-DOX纳米复合物治疗组小鼠心肌细胞结构完整，并且能有效抑制小鼠皮下肺癌肿瘤的生长。 结论经PEI钝化的荧光碳点负载阿霉素能显著提高DOX对非小细胞肺癌的治疗效果，并减少DOX对心脏的毒性作用。运用CD-PEI纳米颗粒改善化疗药物递送的治疗方案取得了初步证实，这可为肺癌化学治疗提供新思路，具有广大的临床应用前景。     

癫痫发作后状态及其临床意义

癫痫发作后状态(PIS)是指癫痫发作停止到恢复至发病前水平的异常状态,包括认知、运动、感觉、自主神经和精神行为等异常,症状多样,严重程度不一,持续数秒至数天不等,对患者的健康和生活质量产生很大影响。然而,目前国内外相关的研究较少,临床医生对此缺乏正确认识,容易误诊误治。本文将从PIS的定义、病理生理机制、临床表现、诊断和鉴别诊断、临床意义以及干预策略等进行综述,以提高临床医生的认识,并为今后临床研究提供参考。     

FISH技术在乳腺癌HER-2基因检测中的应用价值评估

目的研究荧光原位杂交(FISH)技术在乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)基因检测中的应用价值。方法50例新发乳腺癌患者,采集乳腺癌标本,分别采用FISH技术和免疫组化(IHC)技术进行HER-2基因检测。观察IHC与FISH检测结果、FISH检测17号染色体多体发生情况。结果IHC结果为+++、++、+/0时,FISH与IHC检测结果的阳性符合率分别为87.50%、94.59%、20.00%,经一致性检验,IHC与FISH检测结果一致性较好(Kappa值=0.543,P<0.05)。IHC检测HER-2高表达(+++、++)患者中17号染色体多体发生率为17.78%,在HER-2低表达或无表达(+、0)患者中的多体发生率为20.00%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论FISH技术与IHC技术在乳腺癌HER-2基因检测中的一致性较好,17号染色体多体可能是导致IHC与FISH检测结果不一致的原因之一,FISH技术可以作为检测HER-2基因扩增的确诊手段在临床上应用。     

60例胰岛素瘤临床特点分析

目的探讨胰岛素瘤的临床特点及诊断方法。方法回顾性分析2013年1月至2018年9月郑州大学第一附属医院收治的60例病理确诊为胰岛素瘤患者的临床资料。结果 26.67%(16/60)的患者曾被误诊;均有Whipple三联征表现,血糖<3 mmol/L时,100%(60/60)患者血清胰岛素≥3 mU/L且血清C-肽≥0.6 ng/mL;75%(45/60)的患者胰岛素释放指数(IRI)≥0.3,91.67%(55/60)的患者修正后IRI≥50。术前经腹超声、CT、灌注CT、MRI及内镜超声(EUS)检查的阳性率分别为26.67%(16/60)、87.50%(21/24)、94.29%(33/35)、75.00%(6/8)、100%(3/3)。所有患者均接受手术治疗,最终术后病理确诊为胰岛素瘤。结论胰岛素瘤患者容易被误诊。对有Whipple三联征表现的可疑患者,胰岛素瘤定性诊断的首选标准为血清胰岛素≥3 mU/L和C-肽≥0.6 ng/mL,定位诊断则首选灌注CT,EUS可作为对常规定位检查的补充,病理是最终确诊的金标准。