柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:健康SD大鼠120只,随机取20只作为正常组,另100只大鼠用于制备慢性不可预见性温和应激(CUMS)抑郁模型。再将CUMS抑郁大鼠随机分为模型组,柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组,氟西汀组,每组20只。柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组分别灌胃3.25,6.5,13 g·kg~(-1);氟西汀组灌胃盐酸氟西汀10 mg·kg~(-1);正常组和模型组灌胃等量生理盐水;1次/d,共干预21 d。应用糖水偏好和强迫游泳实验评估抑郁行为,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠大脑海马组织中PI3K,Akt,GSK3β以及β-catenin蛋白水平及其磷酸化水平。结果:给药21 d后,与正常组比较,模型组糖水偏好显著下降(P0.01);强迫游泳不动时间显著延长(P0.01);PI3K,p-PI3K p110,p-PI3K p85蛋白水平均显著降低(P0.01);Akt,p-Akt Thr308,p-Akt Ser473,p-GSK3βSer9,β-catenin水平均显著降低(P0.01);GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤中、高组大鼠糖水偏好显著增加(P0.01);强迫游泳不动时间显著缩短(P0.01);PI3K总蛋白,PI3K p110和PI3K p85亚基蛋白磷酸化水平均显著增高(P0.01);p-Akt Thr308和p-Akt Ser473水平均显著升高(P0.01);p-GSK3β Ser9,β-catenin水平显著增高(P0.01),而GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平却明显降低(P0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤通过提高大鼠海马组织PI3K蛋白水平及活性,激活Akt,抑制GSK3β活性,阻止β-catenin降解,即提高大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路活性,保护海马神经元。     

Acsl4在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨Acsl4在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测108例浸润性乳腺癌组织中Acsl4的表达。结果:108例浸润性乳腺癌组织中,33例(30.6%)阳性表达,75例(69.4%)阴性表达。组织学G3级的乳腺癌组织中Acsl4阳性率为42.3%(22/52),高于G1+G2级的阳性率(19.6%,11/56),差异具有统计学意义(P<0.05)。ER阳性组织的Acsl4的阳性率15.8%(6/38),低于ER阴性的病例(38.6%,27/70),差异具有统计学意义(P<0.05)。Acsl4的表达与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结是否转移、HER2、PR、p53、Ki67的表达情况无统计学意义的相关性(P均>0.05)。结论:Acsl4在浸润性乳腺癌组织中存在异常表达,其阳性表达与乳腺癌患者组织学分级较高及ER阴性表达密切相关。     

小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠的保护作用研究

目的通过构建蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,研究小柴胡汤对NASH模型小鼠的保护作用。方法选择C57BL/6小鼠为研究对象,将其随机分为对照组、模型组、小柴胡汤(高、中、低剂量)组、易善复组和强肝胶囊组。通过饲喂MCD饲料建立NASH模型,造模同时按分组给予不同药物进行干预;实验过程中记录小鼠体质量、日摄食量、日饮水量变化,实验结束对肝组织进行HE染色观察病理变化,检测血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平变化,检测肝组织中TC、TG的水平变化,利用q RT-PCR技术检测肝组织脂肪酸合成酶(FAS)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)的表达水平。结果小鼠体质量、日摄食量、日饮水量及肝脏系数等数据显示MCD饮食诱导的模型组小鼠会出现体质量降低、摄入量减少及肝脏湿质量下降的特点,而小柴胡汤给药组小鼠体质量、摄入量及肝脏系数较模型组小鼠显著升高;HE染色结果显示小柴胡汤可明显减轻肝组织脂肪变性和炎症程度,改善肝细胞的形态和结构;生化指标检测结果显示小柴胡汤能显著降低NASH模型小鼠血清及肝组织TG、TC水平,升高血清中HDL-C水平,降低血清中AST、ALT、IL-6、TNF-α水平;q RT-PCR结果显示模型组小鼠肝组织FAS和SREBP-1c的基因表达水平明显升高,小柴胡汤可显著降低FAS和SREBP-1c的基因表达水平。结论小柴胡汤对MCD饮食诱导的NASH模型小鼠有明显保护作用,其机制可能通过调控抑制脂肪酸合成基因(FAS、SREBP-1c)的表达,减少脂肪堆积,实现调脂作用,并通过抑制炎症因子的表达改善肝组织的损伤。     

宫颈鳞状细胞癌对DDP和DDP+5-FU的体外药敏检测及与耐药蛋白表达的关系研究

目的通过对宫颈鳞状细胞癌进行顺铂(DDP)和DDP+5-氟尿嘧啶(5-FU)体外药敏检测,比较两种化疗方案的体外有效率。同时检测其耐药蛋白P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、胸苷酸合成酶(TS)的表达,探讨DDP和DDP+5-FU体外药敏与耐药蛋白表达的关系。方法收集35例宫颈鳞状细胞癌患者的新鲜肿瘤组织,采用三磷酸腺苷生物荧光法(ATP-TCA)对DDP和DDP+5-FU进行体外药敏检测,同时采用EnVision二步法检测宫颈鳞状细胞癌组织中耐药蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS的表达,并分析DDP和DDP+5-FU的体外药敏与耐药蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS表达的关系。结果 35例标本均进行药敏试验,DDP的体外有效率为37.14%,与DDP+5-FU的51.43%比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。经多因素分析发现,患者年龄、临床分期、分化程度均不为DDP、DDP+5-FU药物敏感性的影响因素(P> 0.05)。P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS蛋白阳性表达率分别为57.14%(20/35)、51.43%(18/35)、71.43%(25/35)、57.14%(20/35)。GST-π蛋白阳性表达是宫颈鳞状细胞癌对DDP耐药的影响因素(P=0.002);TS蛋白阳性表达是宫颈鳞状细胞癌对DDP+5-FU耐药的影响因素(P=0.001)。结论 宫颈鳞状细胞癌ATP-TCA法检测DDP+5-FU与单药DDP相比,体外有效率无显著差异。GST-π、TS蛋白阳性表达可用于临床宫颈癌患者对DDP、5-FU化疗耐药的预测指标。     

血清TP、TS、DPD 表达与SOX 方案治疗晚期胃癌疗效的相关性

目的　探讨血清TS、TP 及DPD 表达与替吉奥化疗治疗晚期胃癌患者疗效的相关性。方法　选择符合要求的晚期胃癌患者化疗前血清标本，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者外周血中TP、TS、DPD 的表达水平，分析其与患者化疗疗效的相关性。结果　晚期胃癌患者血清中TS 低表达者化疗有效率高于高表达者（77.78% vs. 28.57%，P<0.05），TP 高表达者化疗有效率高于低表达者（66.67% vs. 25%，P<0.05），DPD 低表达者化疗有效率高于高表达者（62.5% vs. 21.43%，P<0.05）。结论　晚期胃癌患者血清TS、TP、DPD 表达水平与SOX 方案化疗的临床疗效有关，TS、DPD 阴性及TP 阳性的晚期胃癌患者SOX 方案化疗的疗效更好。     

自身免疫性甲状腺疾病患儿血清FasL、IL-17水平及与甲状腺抗体的相关性

目的检测自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患儿血清脂肪酸合成酶配体(Fas L)、白细胞介素-17 (IL-17)及甲状腺自身抗体水平,探究它们之间的相关性。方法选取2017年1月-2019年1月丽水市中医院和日照市中医医院收治的AITD患儿97例,其中桥本甲状腺炎(HT) 41例、格雷夫病(GD) 56例,同期招募50名健康志愿者作为对照组。采集各受试者静脉血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测个受试者血清可溶性脂肪酸合成酶配体(s Fas L)、IL-17水平,化学发光法检测血清甲状腺自身抗体Tg Ab、TPOAb水平,Pearson检验分析s Fas L、IL-17与各因子相关性。结果与健康儿童比较,HT组和GD组患儿血清s Fas L、IL-17、Tg Ab、TPOAb抗体水平均显著增高(P<0. 05); Pearson分析显示,HT、GD患儿血清s Fas L水平与IL-17、Tg Ab、TPOAb水平呈正相关(P<0. 05),血清IL-17水平与s Fas L、Tg Ab、TPOAb水平呈正相关(P<0. 05)。结论 AITD患儿体内存在高s Fas L水平和高IL-17水平,二者呈正相关,可能共同参与AITD疾病发生。     

口服蛋氨酸饲料致大鼠心室重塑的研究

目的:探讨口服蛋氨酸饲料致大鼠心力衰竭模型的机制，及程序性死亡因子4（PDCD4）通路在此过程中的作用。方法:5周龄健康Wistar雄性大鼠30只，适应性喂养1周后，随机分为实验组与对照组，实验组给予3%蛋氨酸饲料喂养，对照组标准饲料喂养。12周后进行血流动力学检测，采用酶联免疫法测定血清同型半胱氨酸（HCY）及N端前脑钠肽（NT-proBNP）水平，心脏彩超进行心功能评估，病理染色明确有无细胞肥大、纤维化，Western blot检测心肌组织中PDCD4蛋白的表达。结果:3%蛋氨酸饲料喂养组HCY水平较对照组升高（均P＜0.05）,心脏彩超提示3%蛋氨酸饲料喂养组大鼠左室射血分数、缩短分数、室间隔厚度显著减低（均P＜0.05），左室收缩末内径及舒张末内径较对照组显著增加（均P＜0.05），Western blot结果显示, PDCD4蛋白表达降低（P＜0.05）。结论:通过口服蛋氨酸饲料造成大鼠高HCY血症可导致大鼠出现心室重塑，并造成心功能受损，其机制可能与PDCD4信号通路的下调有关。