阻断Hedgehog信号通路对人胰腺癌干细胞自我更新的影响

目的 观察Hedgehog信号通路特异阻断剂环巴明对胰腺癌干细胞自我更新的影响.方法 应用0.5、1、2、5、10 μmol/L环巴明处理胰腺癌PANC1干细胞、PANC1贴壁细胞和永生化胰腺导管上皮H6C7细胞24、48、72 h.采用实时RT-PCR法检测细胞Smo及Gli1 mRNA表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡.结果 10 μmol/L环巴明处理72 h后,PANC1干细胞、PANC1细胞和H6C7细胞的Smo mRNA表达量分别为1、0.83、2.61;Glil mRNA为57.27、26.35、1;生长抑制率分别为(37.85±13.69)%、(8.53±4.43)%、(43.55±28.98)%.与PANC1细胞比较,PANC1干细胞的Smo、Gli1 mRNA表达显著增加,生长抑制率亦显著增强(P值＜0.05或＜0.01).经10 μmol/L环巴明处理72 h,PANC1干细胞G1期比例从(67.41±6.35)%显著降至(36.53±6.03)%(P＜0.05),细胞凋亡率从(10.95±5.68)%降至(5.73±1.42)%(P＞0.05);PANC1细胞G1期比例从(67.64±6.88)%显著降至(53.13±1.10)%(P＜0.05),细胞凋亡率从(12.08±4.12)%降至(5.66±1.33)%(P＞0.05);而H6C7细胞的G1期比例及凋亡无明显变化.结论 环巴明阻断Hedgehog信号通路可抑制PANC1干细胞增殖,其机制可能与细胞凋亡无关.     

沉默BECN1对人三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨沉默人三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-231中beclin 1(BECN1)基因后其生物学特性的变化.方法:设计3组沉默BECN1基因的慢病毒(干扰组1、干扰组2和干扰组3)以及阴性对照慢病毒(NC组)分别转染MDA-MB-231维胞,空白组不做处理.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测BECN1 mRNA表达,蛋白免疫印迹(WB)实验检测各组细胞BECN1蛋白与自噬标志蛋白LC3B的表达,筛选出抑制率最高的一组用于后续实验.细胞计数试剂8(CCK-8)检测各组细胞的增殖情况、Transwell实验检测各组细胞的迁移及侵袭能力、流式细胞术检测各组细胞凋亡率与周期分布情况.结果:慢病毒感染细胞后,干扰组2中BECN1的信使核糖核酸(mRNA)与蛋白的表达量最低(P＜0.05),WB结果显示干扰组2的LC3B蛋白中LC3-Ⅱ/LC31-Ⅰ的比值明显低于空白组和NC组(均P＜0.05),选取干扰组2用于后续实验.沉默BECN1基因后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(均P＜0.05);流式细胞术结果显示干扰组2、NC组与空白组的凋亡率没有明显差异;相比于空白组与NC组,干扰组2处于G0/G1期的比例升高(P＜0.05).结论:BECN1基因沉默可以降低细胞的自噬水平,抑制TNBC MDA-MB-231细胞增殖、迁移与侵袭能力.     

牛黄至宝丸的质量标准研究

目的：为保证药品质量，提高牛黄至宝丸的质量标准。方法：采用薄层色谱法对处方中的栀子（栀子苷）、大黄（大黄素）、人工牛黄（去氧胆酸）进行定性鉴别；建立高效液相色谱法测定处方中栀子苷的含量。结果：定性鉴别分离度好，专属性高；栀子苷在0．51～5．10txg范围内呈良好线性关系（r=0．9999），平均回收率为97．94％，RSD：2．07％（n=6）。结论：所建立的方法简便，可行，重现性好，可用于牛黄至宝丸的质量控制。     

胰腺癌组织转录因子GATA-6表达及其意义的探讨

目的:探讨胰腺癌组织GATA-6的表达及其对胰腺癌发生、发展的可能作用及临床意义。方法:采用免疫组化检测33例胰腺癌、15例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织GATA-6蛋白的表达;免疫细胞荧光法检测胰腺癌细胞株Panc-1、BxPC-3和SW1990及正常胰腺导管上皮细胞H6C7的GATA-6蛋白表达情况;Real-time RT-PCR技术检测上述细胞株的GATA-6 mRNA表达;并分析GATA-6与胰腺癌临床病理参数的关系。结果:GATA-6蛋白在胞核中表达,胰腺癌组织GATA-6的阳性表达率(88.9%)显著高于慢性胰腺炎(40.0%)和正常胰腺组织(16.7%),P<0.01,但与性别、年龄、分化程度和临床分期均无显著性相关;3种胰腺癌细胞株均有GATA-6蛋白表达,而正常胰腺导管上皮细胞无表达;3种胰腺癌细胞株GATA-6 mRNA表达也明显高于正常胰腺导管上皮细胞,P<0.05。结论:GATA-6在胰腺癌组织及细胞中呈高表达,提示GATA-6在胰腺癌的发生、发展中可能起一定作用。     

尖端扭转型室性心动过速10例临床分析

尖端扭转型室性心动过速（TorsadsdsPoints，TdP）是一种恶性心律失常，如抢救不及时，常迅速危及生命。为提高TdP的抢救成功率，本文报告10例，结合文献对其临床分型及治疗加以分析讨论。1临床资料1．1性别和年龄10例中女性9例，男性1例，年龄9～79岁，平均56.5岁。1．2病因冠心病4例，合并低血钾3例，其中高度房室传导阻滞2例，急性前壁心肌梗死1例，合并肺心病1例。心肌病2例，其中卫例因房颤用乙胺碘映酮治疗，25天后发生TdP，血清钾为3．2mmol／L，另1例因腹腔肿瘤手术切除，术中出现TdP。非家族性Q－T间期延长综合征2例，均合并…     

中药不良反应的防治

1中药不良反应发生的原因1 1剂量过大或疗程过长 :近时有的医生为求速效 ,剂量常有加大 ,目前且有越来越大的趋势。其实 ,只有在一定范围内 ,药物浓度增加 ,作用可与之俱增。但既达到最大作用浓度后 ,若再增加浓度 ,则不能再增加治疗作用 ,甚或出现相反的结果。而且疗程过长也是引起中药不良反应的因素 ,尤其是使用有毒中药或含有有毒成分的中成药时。1 2滥用中药及间接引起中毒 :有的病人过分相信某人传教的单方秘方 ;或自己采药 ,误用或滥用 ;或游医的胡乱用药而引起中毒。目前广泛施用农药 ,作为药用的动、植物 ,亦可遭受污染。不少中药…     

淫羊藿制备过程的淫羊藿苷动态含量变化研究

淫羊藿提取物的制备现主要采用一定浓度的乙醇回流法或水提醇沉法,我们尝试采用高效低温提取进行提取物制备全过程的淫羊藿苷含量动态变化规律研究,冀以发现工艺过程中的关键控制点及控制方法.     

非诺贝特缓释微丸的制备及释放度研究

目的：制备非诺贝特缓释微丸。方法：采用BZJ-360M离心包衣造粒机制备微晶纤维素空白丸核和非诺贝特含药素丸，并在此基础上进行丙烯酸树脂水分散体（Eudragit NE 30D）包衣。用释放度测定法考察影响药物释放的各种因素，对包衣微丸体外释药机制进行研究。结果：包衣材料为Eudragit NE 30D，增重3％时包衣微丸呈现良好的缓释效果，体外释药过程基本符合Higuchi方程：Q=0．436＋30．316t^1/2／（r=0．9997）。结论：成功的制备了非诺贝特缓释微丸。     

高效液相色谱法测定注射用盐酸罂粟碱的含量

目的建立注射用盐酸罂粟碱中盐酸罂粟碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法。以甲醇-0．005N庚烷磺酸钠（冰乙酸调pH值至3．0）（55：45）为流动相,用外标法按峰面积计算回收率。结果盐酸罂粟碱在1．490—11．920μg／ml范围内,线性关系良好（r=0．9999）;平均回收率为99．5,RSD为0．31（n=9）。结论高效液相色谱法操作简便快捷,测定结果准确,可用于注射用盐酸罂粟碱的含量测定和质量控制。