阻断Hedgehog信号通路对人胰腺癌干细胞自我更新的影响

目的 观察Hedgehog信号通路特异阻断剂环巴明对胰腺癌干细胞自我更新的影响.方法 应用0.5、1、2、5、10 μmol/L环巴明处理胰腺癌PANC1干细胞、PANC1贴壁细胞和永生化胰腺导管上皮H6C7细胞24、48、72 h.采用实时RT-PCR法检测细胞Smo及Gli1 mRNA表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡.结果 10 μmol/L环巴明处理72 h后,PANC1干细胞、PANC1细胞和H6C7细胞的Smo mRNA表达量分别为1、0.83、2.61;Glil mRNA为57.27、26.35、1;生长抑制率分别为(37.85±13.69)%、(8.53±4.43)%、(43.55±28.98)%.与PANC1细胞比较,PANC1干细胞的Smo、Gli1 mRNA表达显著增加,生长抑制率亦显著增强(P值＜0.05或＜0.01).经10 μmol/L环巴明处理72 h,PANC1干细胞G1期比例从(67.41±6.35)%显著降至(36.53±6.03)%(P＜0.05),细胞凋亡率从(10.95±5.68)%降至(5.73±1.42)%(P＞0.05);PANC1细胞G1期比例从(67.64±6.88)%显著降至(53.13±1.10)%(P＜0.05),细胞凋亡率从(12.08±4.12)%降至(5.66±1.33)%(P＞0.05);而H6C7细胞的G1期比例及凋亡无明显变化.结论 环巴明阻断Hedgehog信号通路可抑制PANC1干细胞增殖,其机制可能与细胞凋亡无关.     

胰腺癌组织转录因子GATA-6表达及其意义的探讨

目的:探讨胰腺癌组织GATA-6的表达及其对胰腺癌发生、发展的可能作用及临床意义。方法:采用免疫组化检测33例胰腺癌、15例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织GATA-6蛋白的表达;免疫细胞荧光法检测胰腺癌细胞株Panc-1、BxPC-3和SW1990及正常胰腺导管上皮细胞H6C7的GATA-6蛋白表达情况;Real-time RT-PCR技术检测上述细胞株的GATA-6 mRNA表达;并分析GATA-6与胰腺癌临床病理参数的关系。结果:GATA-6蛋白在胞核中表达,胰腺癌组织GATA-6的阳性表达率(88.9%)显著高于慢性胰腺炎(40.0%)和正常胰腺组织(16.7%),P<0.01,但与性别、年龄、分化程度和临床分期均无显著性相关;3种胰腺癌细胞株均有GATA-6蛋白表达,而正常胰腺导管上皮细胞无表达;3种胰腺癌细胞株GATA-6 mRNA表达也明显高于正常胰腺导管上皮细胞,P<0.05。结论:GATA-6在胰腺癌组织及细胞中呈高表达,提示GATA-6在胰腺癌的发生、发展中可能起一定作用。     

3-methyladenine抑制自噬诱导胰腺癌细胞SW1990失巢凋亡

【目的】 探讨3-methyladenine(3-MA)对人胰腺癌SW1990细胞增殖?迁移及失巢凋亡的影响作用及其机制?【方法】 以胰腺癌细胞SW1990及永生化胰腺导管上皮细胞H6C7为研究对象,设3-MA处理组及PBS对照组,采用软琼脂克隆培养法及Poly-HEMA悬浮培养法筛选抵抗失巢凋亡的细胞?Annexin V-FITC/PI双染和TUNEL试剂盒法检测细胞凋亡;免疫荧光法及透射电镜检测细胞自噬;CCK-8法检测细胞增殖; Transwell小室检测细胞迁移能力?【结果】永生化胰腺导管上皮细胞H6C7处理组及对照组均无集落形成,胰腺癌细胞SW1990处理组形成(2.3 ± 2.63)个集落,对照组形成(9 ± 3)个,与H6C7 相比,SW1990具有较强的抵抗失巢凋亡的能力 (P < 0.05)?3-MA可抑制胰腺癌SW1990细胞自噬(P < 0.05)并抑制其增殖及迁移能力(P < 0.01)且诱导失巢凋亡(P < 0.01)?【结论】 3-MA可诱导胰腺癌细胞SW1990失巢凋亡,其机制可能与细胞自噬受抑有关?     

人胰腺癌细胞系SW1990中肿瘤干细胞样侧群细胞的分离及生物学特性研究

目的 从人胰腺癌细胞系SW1990中分离肿瘤干细胞样侧群(side population,SP)细胞,并进一步研究其生物学特性.方法 细胞常规培养后应用Hoechst 33342和PI染色、荧光激发流式细胞仪检测并分选SP细胞,MTT法检测细胞活性,流式细胞仪分析干细胞标志物CD133的表达,克隆平板测定细胞克隆形成能力,Western blot检测细胞ABC超家族成员G2(ABCG2)蛋白表达.结果 人胰腺癌细胞系SW1990中SP细胞比例为2.70%,可完全被维拉帕米阻断.培养9 d后,SP细胞的A492值为2.1,克隆形成率为(38.7±6.8)%,CD133阳性率为69.63%,均显著高于非SP细胞的0.5,(15.5±2.8)%,16.71%;SP细胞ABCG2表达也较非SP细胞强.结论 胰腺癌细胞系SW1990存在SP细胞.     

胰腺癌肿瘤干细胞的悬浮培养法

目的 建立无血清悬浮培养分离人胰腺癌细胞系PANC1干细胞球的方法.方法 采用无血清悬浮法培养PANC1细胞,显微镜下观察干细胞球形成率;流式细胞仪检测细胞CD133表达和细胞周期;以含10%FBS培养基诱导干细胞球细胞分化,荧光显微镜下观察细胞形态及CK18的表达;干细胞球细胞接种NOD/SCID小鼠皮下,观察其成瘤能力.结果 在无血清悬浮培养条件下存活的PANC1细胞形成干细胞球,体外连续传代培养20代始终保持4%0～5%0的干细胞球形成率.干细胞球细胞CD133表达率(5.91±0.7)%,G0/G1期细胞占(80.99±2.60)%,与原代PANC1细胞的(1.44±0.52)%和(69.01±5.03)%相差显著(P＜0.05).将于细胞球细胞置含血清培养基中培养.细胞逐渐恢复原代细胞形态,并表达上皮标志蛋白CK18,2×103的干细胞即在NOD/SCID小鼠皮下成瘤.结论 无血清悬浮法培养PANC1细胞可分离出肿瘤干细胞,其具有自我更新、多向分化和成瘤能力.     

胰腺癌干细胞的研究进展

越来越多的证据表明肿瘤细胞中存在一小部分干细胞性质的肿瘤干细胞（cancer stem cell）．其具有自我更新及多向分化潜能。肿瘤干细胞是肿瘤细胞增殖、转移、复发和耐药的根源。胰腺癌是预后最差的肿瘤之一,肿瘤干细胞理论的提出将为胰腺癌的根治提供新的靶点和新的治疗方案。     

心脏骤停患者采用便携式胸腔按压机和徒手胸外心脏按压疗效探讨

目的:探讨心脏骤停患者采用便携式胸腔按压机和徒手胸外心脏按压的救治效果。方法:汕头大学医学院第二附属医院对汕头市潮阳区大峰医院急诊科医护人员进行便携式胸腔按压机和徒手胸外心脏按压培训考核,统计初考和补考合格率。选取2016年1月至2019年12月汕头市潮阳区大峰医院急诊科接诊的心脏骤停患者60例为研究对象,其中采用便携式胸腔按压机急救的患者38例为A组,徒手胸外心脏按压急救患者22例为B组。比较两组救治效果以及不良反应事件发生率,监测比较两组患者复苏后3 min、5 min、10 min、20 min的心率、血氧饱和度(SPO_2)、血压、呼吸频率等指标水平。抢救后两组患者均进行了血气分析。结果:45名急诊医护人员初次考核合格率为86.67%(39/45),补考合格率为100.00%(45/45)。与B组比较,A组心肺复苏成功率比B组高(P0.05)。两组血气分析指标、气胸、胸壁胸内脏器受损和肋骨骨折等不良反应事件发生率比较,无明显差异(P0.05)。A组心肺复苏后10 min、20 min的SPO_2高于B组(P0.05)。结论:急诊医护人员需要规范培训掌握便携式胸腔按压机和徒手胸外按压的急救方法,对比发现心脏骤停患者急救采用便携式胸腔按压A组,比徒手胸外心脏按压的B组效果好,且安全性高,值得推广应用。     

反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞侵袭和迁移的抑制作用

目的:探讨微小RNA-196a(miR-196a)在胰腺癌细胞系中表达状况及反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响。方法:miR-196a采用实时荧光定量PCR检测。人工化学合成反义miR-196a并转染PANC-1细胞。CCK-8法检测细胞增殖。流式细胞术检测细胞凋亡情况。通过划痕损伤实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验检测PANC-1细胞侵袭和迁移能力。构建野生型及突变型核因子κB抑制蛋白α(NFKBIA)3'UTR的萤光素酶报告载体,检测海肾萤光素酶的相对活性以验证miR-196a对NFKBIAmRNA的作用靶点。结果:人胰腺癌细胞系中miR-196a呈高表达;转染反义miR-196a后,PANC-1细胞miR-196a表达下降,其细胞增殖和凋亡无显著改变(P>0.05);而转染反义miR-196a组中通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组(P<0.01)。与各对照组相比,共转染野生型NFKBIA的3'UTR和反义miR-196a可使海肾萤光素酶相对活性显著提高。结论:miR-196a可能是癌微RNA(oncomiR)之一,有望成为人胰腺癌基因治疗的候选靶点。     

突然患病住院的心理反应及护理对策

1心理反应因个人所处的时间地点和个性心理特征不同而异。患病特有心理的产生，是由于社会对病人角色所规定的行为，病人特有的经验以及患病时生物学改变而引起的躯体不适三个方面共同作用的结果。一般患病后会出现以下的心理反应。1．1焦虑及恐惧病人的焦虑主要来源于对疾病的诊断和治疗的担心，家庭经济的负担，事业问题及陌生环境等。导     

急救护理路径对脑卒中患者的影响

目的:探讨急救护理路径对脑卒中患者的影响。方法:采用随机数字表法将2017年1月1日～2018年12月31日收治的120例脑卒中患者分为研究组和对照组各60例,对照组给予常规急诊护理干预,研究组给予急救护理路径干预;比较两组急救环节用时及达标情况、治疗效果及护理满意度。结果:研究组急救各个环节用时均短于对照组(P0.01);研究组专科医生会诊、实验室检查、影像学检查、绿色通道停留时间达标率均高于对照组(P0.05);研究组康复出院率高于对照组(P0.01),致残率低于对照组(P0.05);研究组护理满意度高于对照组(P0.01)。结论:将急救护理路径应用于脑卒中患者护理中,可有效缩短绿色通道停留时间,提高治疗效果及护理满意度。