胰岛素样生长因子-1对大鼠弥漫性脑损伤的保护

目的观察胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)对大鼠弥漫性脑损伤(diffusebraininjury,DBI)皮层神经元死亡的影响,探讨应用IGF-1治疗脑损伤的可行性。方法用Marmarou方法制成大鼠DBI模型并分2d和5d组,伤后10min经侧脑室注入单剂2μgIGF-1,分别于2d和5d后观察室上区皮层神经元损伤变化。结果与对照组2d时(35±9)%和5d时(51±13)%相比,IGF-1治疗组的皮层神经元缺失显著减少犤2d组(24±6)%,F=5.19,P<0.05,5d组(30±7)%,F=13.47,P<0.01)。结论DBI后经侧脑室注入IGF-1可明显减少皮层神经元缺失,提示对DBI有治疗作用。     

胰岛素对大鼠脑缺血后记忆力损害的保护

目的：观察胰岛素对大鼠脑缺血后酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达及学习记忆能力的影响。方法：实验于2001-01／2003—05在解放军第四军医大学完成。①选用纯种健康雄性SD大鼠54只，随机数字表法分为3组：假手术组6只、缺血对照组24只、胰岛素治疗组24只。Y型迷宫箱（张家港生物医学仪器厂制造，MGM-2型）。②缺血对照组、胰岛素治疗组采用改良四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型。假手术组仅暴露双侧翼孔及颈动脉，各血管不行闭塞。⑧各组大鼠在麻醉状态下钻开颅骨，于前囟后1．2mm、左旁1．5—nm处用微量加样器进针3．5mm穿刺脑室。成功后胰岛素治疗组于开放动脉夹行再灌注后立即注入1&;#215;10^5U／L的速效基因合成人胰岛素10μL，假手术组、缺血对照组注入等量生理盐水。④分别于全脑缺血再灌注1，3，5d，假手术组（1只／时相点）、缺血对照组（6只／时相点）、胰岛素治疗组（6只／时相点）大鼠断头取脑，行免疫组化染色，光镜下观察海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达的变化。⑤全脑缺血再灌注8周后，用Y型迷宫箱对假手术组（3只）、缺血对照组（6只）、胰岛素治疗组（6只）大鼠的学习记忆能力进行检测，以其测试时达到连续lO次中9次正确反应所需的电击次数表示。并计数海马CA1区正常神经元。结果：实验选用纯种健康雄性SD大鼠54只，全部进入结果分析。①全脑缺血再灌注后不同时间点各组脑海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶的表达：假手术组海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶呈阴性表达。缺血对照组于缺血再灌注1d海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达阴性；3，5d时均呈阳性表达。而胰岛素治疗组于缺血再灌注1，3，5d海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达均呈阴性。②全脑缺血再灌注8周后各组大鼠学习记忆能力的变化：胰岛素治疗组记忆力损害较轻，达到9／10正确反应所需电击次数明显少于缺血对照组（9．43&;#177;1.8），（18．6&;#177;2．7）次，P〈0.01]。③全脑缺血再灌注8周后各组大鼠脑海马CA1区正常神经元计数结果：假手术组神经元形态正常，细胞核无固缩或溶解，正常神经元计数为（174.6&;#177;10．7）个／mm。缺血对照组神经元大部分死亡，正常神经元计数为（10．6&;#177;0．6）个／mm。胰岛素治疗组可见部分神经元死亡，死亡神经元胞体缩小或脱失，正常神经元计数为（113．4&;#177;9．1）个／mm，明显高于缺血对照组（P〈0，01）。结论：胰岛素可通过调节儿茶酚胺合成与分解酶系的活性及含量来影响脑组织中单胺类神经递质的成分，纠正其代谢紊乱，减少神经元的凋亡，减轻脑缺血造成的学习记忆能力损害，从而发挥中枢的直接保护作用。     

热休克蛋白70大鼠脑弥漫性轴索损伤后神经元保护及修复作用研究

目的探讨大鼠脑弥漫性轴索损伤(diffuseaxonalinjuries,DAI)后不同时期脑皮层组织中热休克蛋白(heatshockproteins,HSP)70的表达,为临床治疗脑损伤寻求有效手段。方法制作大鼠DAI模型,分别在伤后6、24、48、72h,7d以免疫组织化学方法检测大鼠脑皮层成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达,分析其含量变化特点。结果DAI后24hHSP表达增加,48h达高峰,7d后仍维持较高水平。结论bFGF在各时间点表达有明显差异,提示其参与脑损伤后神经元保护及修复过程。     

经鼻-蝶入路手术的解剖理念与微创技术再认识

正近二十年来,随着显微外科和内镜技术的发展,经鼻蝶入路手术的治疗范围不断扩大,具体的手术方式发生了不少变化[1-3]。手术通道的创伤问题,尤其对鼻腔黏膜、鼻甲、鼻中隔、蝶窦结构的处理上,常被人忽视,甚至避而不谈。因此,重新认识该入路的解剖与微创技术很有必要,有不少问题值得商榷。一、经鼻蝶入路的手术解剖研究新结果     

TBI大鼠海马糖皮质激素受体表达变化对认知功能的影响

目的 研究创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后大鼠海马区糖皮质激素受体(ghcocorticoid receptor,GR)表达的变化对认知功能的影响.方法 建立大鼠脑损伤模型,应用免疫组化、Western blot和Morris水迷宫检测伤后大鼠海马区GR表达与学习记忆功能的关系.结果伤后4～10 d大鼠海马区GR持续低表达;Morris水迷宫检测伤后大鼠出现认知功能障碍.结论 TBI大鼠海马区GR表达变化与认知功能的障碍改变具有相关性.

Abstract：

Objective To explore the effect of glucocorticoid receptor(GR)expression in rat hippocampus on cognitive function after traumatic brain injury(TBI). Methods The TBI model wag established in rats.Then,immunohistochemistry and Western blot were used to detect the GR expression and evaluate its relation with cognitire dysfunction by Morris water maze. Results Expression of hippocampal GR was down-regulated 4-10 days after TBI.Morris water maze test showed significant impairment of the cognitive function in rats. Conclusion There is correlation between expression change of hippocampal GR and cognitive dysfunction.     

恶性脑胶质瘤中EphA2、EphrinA1表达与预后的关系

目的 检测受体酪氨酸激酶EphA2和其配体EphrinA1在恶性脑胶质瘤中的表达,并探讨其与患者预后的关系.方法 选取68例原发性恶性脑胶质瘤(Ⅲ或Ⅳ级)入组,患者在手术全切除肿瘤的基础上接受规范的放化疗,并行长期随访.免疫组化SABC法检测肿瘤标本中EphA2、EphrinA1的表达水平,并结合患者的随访资料进行统计学分析.结果 68例标本中,52例EphA2表达阳性,28例EphrinA1表达阳性;EphA2和EphrinA1的表达水平与肿瘤病理分级相关,Ⅲ级肿瘤的EphA2表达水平低于Ⅳ级肿瘤,而Ⅲ级肿瘤的EphrinA1表达水平高于Ⅳ级肿瘤.肿瘤标本呈EphA2阴性、弱阳性表达的患者预后显著优于EphA2中度阳性、强阳性表达的患者,EphrinA1表达水平不同的患者预后差异无统计学意义,EphA2阳性/EphrinA1阴性表达的患者预后显著差于EphA2阳性/EphrinA1阳性,EphA2阴性/EphrinA1阳性和EphA2阴性/EphrinA1阴性表达的患者.结论 EphA2是恶性脑胶质瘤的预后相关因子,同时检测EphA2和EphrinA1的表达对于评估恶性胶质瘤患者的预后具有重要意义.

Abstract：

Objective Malignant gliomas display over- expression of the receptor tyrosine kinase EphA2.However,expression levels of the EphA2 ligand,EphrinA1,have not been fully elucidated.This study aims to determine the expression of EphA2/EphrinA1 in detail,and further detect the predictive roles of EphA2 /EphrinA1 for prognosis of malignant glioma patients.Method Sixty- eight patients with primary gliomas (grade Ⅲ or Ⅳ) were included in this study.The expression of EphA2 and EphrinA1 in tumors was assessed by immunohistochemistry and was statistically analyzed in combination with the follow- up data of patients.Methods of 68 cases,52 cases were EphA2- positive and 28 were EphrinA1- positive.The increased EphA2 expression was associated with higher grade histology and poor patient prognosis.On contrary to this,the increased EphrinA1 expression was associated with lower grade histology,but not associated with poor patient prognosis.Moreover,patients with tumors positive for EphA2 and negative for EphrinA1 had significantly shorter overall survival than patients with tumors positive for both EphA2 and EphrinA1,negative for both EphA2 and EphrinA1,or negative for EphA2 and positive for EphrinA1.Conclusion These data indicate that altered expression of EphA2 and EphrinA1 may correlate with prognosis of malignant glioma patients.     

注射用奥拉西坦治疗颅脑损伤的随机、双盲、对照、多中心临床研究

目的 通过对注射用奥拉西坦与注射用吡拉西坦比较的临床研究,评价注射用奥拉西坦治疗颅脑损伤引起的神经功能缺失的临床疗效及安全性. 方法 本研究为随机、双盲、阳性药平行对照、多中心临床试验,收集自2006年9月至2009年1月珠江医院等5家医院收治的239例颅脑损伤和颅脑手术后患者,按照随机数字表法分为试验组(采用注射用奥拉西坦治疗,120例)和对照组(采用注射用吡拉西坦治疗,119例).比较2组治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、GCS评分、肢体肌力分级、简易智能状态检查量表(MMSE)评分,观察2组的不良反应并进行心电图和实验室检查以了解其安全性. 结果 试验组和对照组NIHSS、GCS评分和肢体肌力分级治疗后较治疗前均有明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05),但改善的程度二者差异无统计学意义(P＞0.05),且2组均无药物严重不良事件发生. 结论 注射用奥拉西坦与注射用吡拉西坦一样,在治疗颅脑损伤引起的神经功能缺失中疗效显著,安全性好.

Abstract：

Objective To evaluate the efficacy and safety of oxiracetam in the treatment of neurological deficits resulting from brain injury through the comparison of oxiracetam for injection and piracetam for injection in clinical trials. Methods A multiple-center, randomized, double-blind,parallel study was performed on 239 patients; these patients were divided into experimental group (oxiracetam for injection, n=120) and control group (piracetam, n=119). National institutes of health stroke scale (NIHSS), Glasgow coma scale (GCS), myodynamia grading, mini-metal state examination (MMSE) were employed to evaluate the therapeutic effects; electrocardiogram and laboratory examination were performed, and the side effects were also observed. Results The scores of NIHSS,GCS and myodynamia grading after treatment in the 2 groups were all significantly higher than those before treatment (P＜0.05); however, no significant differences on these scores were noted between the experimental group and control group (P＞0.05). No serious adverse events were noted in both groups.Conclusion Oxiracetam, the same as piracetam, is safe and effective in the treatment of neurological deficits secondary to brain injury.     

14-3-3β在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

14-3-3蛋白是一类高度保守的小分子二聚体,研究发现其参与了凋亡、细胞周期调控、细胞信号传导、新生血管形成、细胞骨架构建等多种细胞生理和病理过程[1-5].目前,凋亡抵抗、细胞周期调控以及新生血管的形成被认为是胶质瘤发生的重要机制.本实验拟检测人脑星形细胞瘤中14-3-3蛋白β亚型的表达情况,并分析其表达的意义及其与肿瘤恶性程度的关系.     

海参皂苷抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞生长实验研究

目的研究一种新型海参皂苷fuscocineroside A对人脑胶质母细胞瘤U251细胞的生长抑制作用及其机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法绘制细胞生长曲线;用Hoechst33342荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法（TUNEL）及流式细胞仪检测分析U251细胞凋亡;并通过Western blot检测细胞内survivin蛋白表达情况。结果Fuscocineroside A能显著抑制U251细胞的生长,诱导其凋亡,下调survivin的表达,呈浓度及时间依赖性,而对正常胶质细胞并没有明显抑制作用。结论Fuscocineroside A能诱导U251细胞凋亡,这种作用可能与survivin的表达下调有关。     

一种大鼠激光脑损伤模型的建立

目的建立一种稳定、可靠的大鼠激光脑损伤动物模型。方法成年SD大鼠100只,体质量（220±30）g,随机分为假手术对照组（n=25）和激光脑损伤组（n=75）;激光脑损伤组分别用14J、28J和56J能量激光照射致伤动物,根据伤后处理时间点每组再分为5个亚组,即伤后6h、24h、48h、72h和7d组,每亚组5只;假手术组不予激光照射。检测照射后不同时间点脑水肿指数、神经功能评分、血压和光、电镜病理形态变化。结果不同能量组伤后脑水肿指数、神经功能评分、血压和光、电镜病理形态变化不同;假手术对照组无明显改变。结论工作距离0．5cm,工作电流0．2mA,波长10．64μm,28J能量激光可以造成稳定的激光脑损伤动物模型。