PD-1在急性白血病异基因造血干细胞移植后T淋巴细胞的表达

目的 探究PD-1在急性白血病患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后外周血T淋巴细胞表达的动态变化及临床意义。方法 采集23例健康志愿者(对照组),40例急性白血病患者allo-HSCT(移植组)后1、2、3、4.5、6个月的外周血标本,采用流式细胞术对各标本CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺ T淋巴细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达水平进行监测,分析移植组和对照组的PD-1表达水平差异。结果 急性白血病患者allo-HSCT后1、2个月PD-1在CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞的表达水平高于对照组;3、4.5、6个月PD-1在CD3⁺CD4⁺ T细胞的表达水平高于对照组, 且随移植时间呈现下降趋势,在CD3⁺CD8⁺ T淋巴细胞的表达水平与对照组差异无明显统计学意义(P均>0.05)。结论 急性白血病患者allo-HSCT后早期PD-1在CD3⁺CD4⁺ T淋巴细胞的表达较正常水平升高且随移植时间呈现下降趋势;在CD3⁺CD8⁺ T淋巴细胞的表达于移植后早期呈现一过性升高。     

肿瘤及白血病细胞多药耐药相关蛋白基因的研究与进展

肿瘤细胞多药耐药性的形成机理中除了P_(170)糖蛋白过度表达,DNA拓扑异构酶Ⅱ量和质的异常外,最近又发现了多药耐药相关蛋白(MRP)过度表达所致的多药酎药。本文综述了关于MRP研究的新进展。     

对缺氧诱发离体猪冠脉机械和电反应的影响

研究３－Ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏｓｙｄｎｏｎｉｍｉｎｅ－Ｎ－ｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｉｄｅ（ＳＴＮ－１）对缺氧诱发离体猪冠脉机械和电反应的影响。同步记录机械张力和膜电位。缺氧可诱发离体猪冠脉平滑肌细胞膜去极化和收缩；ＳＩＮ－１和维拉帕米可使其复极化和松驰。     

线粒体神经酰胺酶通过其下游代谢产物1-磷酸鞘 氨醇，上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平

目的：将线粒体神经酰胺酶（mtCDase）转 染到K562细胞，观察线粒体神经酰胺酶的细胞生物学效应。方法:以脂 质体介导将含有mtCDase cDNA的pCDNA3.1/His-CDase质粒转染到K562细胞，G418筛选阳性 克隆，建立稳定表达mtCDase的K562TC细胞株。Annexin Ⅴ/PI法、FCM及Western印迹法分别 检测K562与K562TC细胞在无血清培养耐受性及Bcl-2蛋白表达水平方面的差异。 结 果:稳定表达mtCDase 的K562TC细胞Bcl-2蛋白水平明显升高，抗血清剥夺能力明 显增强。以硫代反义寡核苷酸特异性封闭K562TC细胞mtCDase，Bcl-2蛋白表达水平下调；二 甲基鞘氨醇（DMS，鞘氨醇激酶抑制剂，降低细胞内1-磷酸鞘氨醇水平）同样下调K562TC细 胞Bcl-2蛋白表达水平，而外源性1-磷酸鞘氨醇（SPP）显著上调K562细胞Bcl-2表达水平。 结论:mtCDase转染K562细胞导致Bcl-2蛋白表达水平升高及无血清培养耐 受能力增强。这种效应是通过mtCDase的下游代谢产物-SPP产生的。本研究证实mtCDase通过 其下游代谢产物代谢SPP，上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平。     

急性白血病患者多药耐药相关蛋白基因表达及临床意义

目的：研究急性白血病（ＡＬ）多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与临床耐药的关系。方法：应用半定量逆转录－聚合酶链反应，检测了６５例ＡＬ患者骨髓和１５名正常人外周血单个核细胞中ＭＲＰ基因的表达。以ＭＲＰ／β２微球蛋白（β２Ｍ）评价ＭＲＰ的表达水平，将ＭＲＰ／β２Ｍ≥０．３表示为ＭＲＰ阳性。结果：复发难治组ＭＲＰ的平均表达水平及阳性率最高，与正常对照组、初治组、长期生存组的ＭＲＰ平均表达水平及阳性率相比均有显著差异（Ｐ＜０．０５），而长期生存组与正常对照组之间无统计学差异。初治组ＭＲＰ阳性病例与ＭＲＰ阴性病例的首次完全缓解率（分别为２５％和８４％）之间有显著差异。ＭＲＰ表达水平在ＦＡＢ各亚型间略有差异。同时检测了６５例ＡＬ患者ｍｄｒ－１基因的表达，发现临床耐药组ＭＲＰ和ｍｄｒ－１的平均表达水平及阳性率均明显高于临床非耐药组，ＭＲＰ和ｍｄｒ－１基因的表达水平之间无相关性（ｒｓ＝０．１６８３）。结论：ＭＲＰ基因过度表达可导致临床耐药，是预后的重要不利因素。     

bcl-2硫代反义寡核苷酸对Raji细胞增殖和凋亡的影响

研究bcl-2硫代反义寡核苷酸(bcl-2 ASODN)对淋巴系统恶性肿瘤的作用及机制。将bcl-2 ASODN与Raji细胞共孵育，应用MTT检测，电镜超微结构，流式细胞仪（FCM）分析和RT-PCR方法，观察bcl-2 ASODN对Raji细胞增殖及凋亡的影响，以及bcl-2蛋白及mRNA水平的变化。MTT检测显示bcl-2 ASODN可以部分抑制Raji细胞增殖；经ASODN作用48h，电镜超微细胞观察细胞呈现典型凋亡特征，包括胞膜出芽，异染色质核膜下浓聚形成凋亡小体及胞核破裂；FCM检测Annexin V^ /PI^-的凋亡细胞比例升高，20μmol/L bcl-2 ASODN处理Raji细胞72h，细胞凋亡率达43.86%，比对照组（10.05%）明显增高。bcl-2阳性细胞率逐渐下降，于72h达低谷为0.88%，明显低于对照组（79.54%）。bcl-2 mRNA水平亦显下降。结论 bcl-2 ASODN通过下调bcl-2蛋白表达水平，诱导Raji细胞凋亡。     

以多浆膜腔积液为突出表现的慢性原发性骨髓纤维化1例

患者，女，60岁。以腹胀10天、活动后气短1周、加重伴夜间憋醒1天入院。心电图：窦性心律，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVL、V3-6T波低平。心脏超声：大量心包积液。腹部超声：肝大、肝静脉扩张、腹水。5年前发现脾脏肿大，曾在外院行脾脏切除术，并取肝组织活检，术后病理：肝被膜纤维素及白细胞渗出，被膜增厚，汇管区淋巴细胞浸润，纤维组织轻度增生，肝窦内皮轻度增生，肝细胞未见特殊改变；     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因的表达

为研究急性白血病（ＡＬ）多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与临床耐药的关系，应用半定量的逆转录多聚酶链反应，检测了６５例ＡＬ患者骨髓细胞和１５例正常人外周血单个核细胞中ＭＲＰ基因的表达。以ＭＲＰ／β２Ｍ评价ＭＲＰ的表达水平，将ＭＲＰ／β２Ｍ≥０．３表达为ＭＲＰ＋。结果发现复发难治组ＭＲＰ的平均表达水平及阳性率最高，与正常对照组、初治组、长期生存组的ＭＲＰ平均表达水平及阳性率均有显著性差异（Ｐ＜０．０５），而长期生存期与正常对照组之间则无统计学差异，初治组ＭＲＰ＋病例与ＭＲＰ－病例的首次完全缓率之间有显著性差异，未观察到ＭＲＰ表达水平与ＦＡＢ分型有关。     

异基因造血干细胞移植后嵌合状态与白血病复发关系的研究

目的 探讨异基因造血干细胞移植（allo HSCT）后嵌合状态与白血病复发的关系。方法 回顾性分析2014年1月至2018年6月于我院行清髓性allo HSCT的成人白血病患者73例,采用短串联重复序列 聚合酶链反应（STR PCR）检测移植后+30、+60、+90天受者骨髓的供受者细胞嵌合率,分析嵌合率与复发的关系。结果 移植后+90天复发组嵌合率低于非复发组。移植后+60 d、+90 d低嵌合患者有较高的复发率（P=0.021,0.027）。多因素分析显示移植前疾病状态、+60d嵌合率、+90d嵌合率是白血病患者行allo HSCT后复发的独立危险因素。结论 Allo HSCT后嵌合状态对复发具有预测价值,+60、+90天低嵌合患者有较高的复发率。     

肝脾γδT细胞淋巴瘤一例

肝脾γδT细胞淋巴瘤是一种罕见的高度恶性的外周T细胞淋巴瘤，表达T细胞标志CD2、CD3以及γδ型T细胞受体。病理表现为肿瘤性T细胞在肝脏血窦和脾脏红髓的弥漫性浸润，不形成结节，易造成误诊。通过对患者肝脏活检标本、脾脏穿刺标本和骨髓标本的免疫表型及TCR受体分析，诊断为1例成人肝脾γδT细胞淋巴瘤。结合文献复习，可以认为免疫表型及TCR受体分析是诊断肝脾γδT细胞淋巴瘤的必要手段。