蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊的制备

目的制备蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。方法反相乳化法制备纳米胶囊。以CaCl2溶液浓度、蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例、壳聚糖溶液浓度为影响因素,粒径、Zeta电位为评价指标,正交试验优化制备工艺。然后,考察纳米胶囊微观形态、载药量、包封率、药物释药性能。结果最佳条件为CaCl2溶液浓度20 mmol/L,蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例1∶1,壳聚糖溶液浓度1%,所得纳米胶囊大小均匀,分散性好,表面光滑饱满,平均粒径(210±5.12)nm,PDI 0.16±0.03,Zeta电位(-25.46±0.56)mV,载药量(16.35±1.35)%,包封率(83.69±4.31)%,人工胃液中24 h内累积释放率(81.86±3.15)%。结论该方法稳定可靠,可用于制备具有良好的体外缓释性能的蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白治疗胶原诱导性关节炎大鼠的相关作用机制研究

目的探讨蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白（CⅡ）治疗胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的相关作用机制。方法60只10周龄Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组和空白组、模型组、塞来昔布（对照）组,每组10只。除空白组外,其余5组采用牛CⅡ-弗氏完全佐剂乳剂注射法构建CIA大鼠模型,2周后分别给予相应药物治疗,治疗30d后处死大鼠,获得左后足膝关节滑膜组织和肠系膜淋巴结。采用HE染色法观察大鼠关节滑膜组织病理学变化,ELISA法检测大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞（MLNLs）中IL-2、IL-4、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）水平,流式细胞术检测辅助性T细胞17（Th17）、调节性T细胞（Treg）细胞比例。结果与空白组比较,模型组大鼠膝关节滑膜组织细胞体积增大、炎症细胞浸润、新生血管生成,MLNLs中IL-2、IL-4水平明显降低（均P＜0.05）,TGF-β、IL-17水平明显升高（均P＜0.05）,Th17、Treg细胞比例明显升高（均P＜0.05）;与模型组比较,对照组和蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组大鼠膝关节滑膜组织内炎症细胞聚集、新生血管明显减少,MLNLs中IL-2、IL-4、TGF-β水平明显升高（均P＜0.05）,IL-17水平明显降低（P＜0.05）,Treg细胞比例升高而Th17细胞比例降低（均P＜0.05）,其中蕲蛇CⅡ不同剂量组间呈一定的量效关系（均P＜0.05）。结论蕲蛇CⅡ治疗能改善CIA大鼠关节滑膜组织的病理性改变,其作用机制可能是通过调节MLNLs中细胞因子水平和Th17、Treg细胞比例实现的。     

桑黄液体发酵生产多糖工艺研究

目的 考察不同培养条件对桑黄菌液体发酵生产多糖的影响.方法 通过正交试验设计,对不同培养基种类、起始pH值、发酵温度和摇床转速进行优化,在此工艺基础上,采用5L发酵罐进行发酵放大试验.结果 采用添加0.3 9/L维生素B1和0.3 g/L维生素B2的PD培养基,起始pH值5,发酵温度28℃,摇床转速180 r/min条件下,桑黄菌摇瓶发酵液中胞内多糖和胞外多糖分别为5.80、2.37 g/L;5 L发酵罐发酵液中桑黄胞内多糖和胞外多糖分别为5.85、2.30 g/L.结论 桑黄液体发酵可获得桑黄多糖,本实验结果为桑黄液体发酵工业化生产提供参考.     

开展《制药工程》双语教学的实践与思考

双语教学是培养高素质双语人才的重要途径,也是制药工程专业发展的需要.该文章通过对<制药工程>双语教学的意义、存在依据、合理模式及存在问题的分析,为今后进一步深化双语教学改革提供策略建议和依据.     

芍药甘草汤修复PM2.5暴露系统性红斑狼疮小鼠的作用机制研究

目的：建立PM_2.5暴露系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型,研究芍药甘草汤对PM_2.5致SLE小鼠病理损伤的治疗作用与机制。方法：40只C57BL/6雌性小鼠随机分为空白对照组、SLE组、SLE+PM_2.5组(模型组)及芍药甘草汤组。模型组通过PM_2.5全身暴露建立PM_2.5暴露SLE小鼠模型。治疗结束后ELISA法检测小鼠血清抗ds-DNA抗体含量和肺泡灌洗液中活性氧(ROS)含量;HE染色观察肾脏和肺组织病理形态学改变;Western Blot检测相关蛋白NF-κB p65、p-NF-κB p65、TLR4、COX-2的表达水平;16S rRNA基因分析小鼠肠道微生物的变化。结果：与模型组比较,芍药甘草汤治疗后脾脏指数和血清抗ds-DNA抗体水平显著降低(P<0.01);小鼠肾小球基底膜均匀、足突轻微融合;小鼠肺泡灌洗液中ROS含量降低(P<0.05);HE染色切片发现小鼠肺组织肺泡炎症细胞渗出减少,NF-κB p65、p-NF-κB p65、TLR4、COX-2...     

柠檬醛亚微乳对哮喘大鼠的免疫调节作用

[目的]探讨柠檬醛亚微乳对哮喘大鼠的免疫调节作用及其作用机制。[方法]将60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、柠檬醛亚微乳低、中、高剂量组。以卵白蛋白（OVA）致敏大鼠,2周后给予1%OVA雾化激发,在雾化激发前2h用柠檬醛亚微乳剂雾化给药,连续4周。末次雾化攻击24h后,计数肺泡灌洗液（BALF）中白细胞总数和嗜酸性粒细胞（Eosinophil,EOS）数量,测定BALF中IL-4和IFN-γ的含量,并检测肺组织病理改变情况。[结果]与空白组比较,模型组EOS和IL-4显著升高（P＜0.01）,而IFN-γ显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,阳性组能显著降低EOS数量和IL-4含量（P＜0.01）,升高IFN-γ的含量（P＜0.01）,柠檬醛高剂量组EOS数量和IL-4含量显著降低（P＜0.01）,而IFN-γ的含量则明显升高（P＜0.05）。[结论]EOS及细胞因子IL-4和IFN-γ参与哮喘发病过程,柠檬醛亚微乳可通过降低BALF中EOS的数量和IL-4的含量,升高IFN-γ的含量,从而减轻哮喘大鼠的气道炎症。     

HPLC法测定蕲蛇中核苷类成分的研究

[目的]探讨高效液相色谱法（HPLC）法测定蕲蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷的分析方法。[方法]采用HPLC法,色谱条件为Dionex C18（3μm,150 mm×4.6 mm）,以0.05 mol.L-1磷酸氢二钾水溶液为流动相;检测波长为254 nm;流速为0.8 mL.min-1。[结果]尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷分别在0.0088～0.220μg、0.0352～0.880μg、0.0344～0.860μg、0.0176～0.440μg范围内具有良好线性关系;平均加样回收率分别为99.0%、98.6%、100.4%、103.0%;RSD分别为2.69%、2.25%、2.90%、2.88%。[结论]HPLC法可以测定蕲蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷含量,从而控制蕲蛇药材品质。     

基于HPLC-Q-TOF/MS的代谢组学方法用于解毒祛瘀滋阴方对系统性红斑狼疮干预作用的研究

该文建立了基于高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(HPLC-Q-TOF/MS)的代谢组学方法,研究系统性红斑狼疮(SLE)小鼠经解毒祛瘀滋阴方治疗后血清代谢物的变化,探讨SLE发病及药物作用机制。利用正交偏最小二乘法(orthogonal partial least squares, OPLS)对实验数据进行模式识别,发现对照组、SLE模型组、解毒祛瘀滋阴方治疗组和醋酸泼尼松治疗组的代谢图谱存在较明显的差异。根据OPLS载荷图,利用精确质量数结合二级质谱鉴定出traumatic acid,PAF,12(S)-HETE,15(S)-HETrE,Hepoxilin B3等12种差异代谢物。SLE小鼠经解毒祛瘀滋阴方治疗后,有效调节PAF,12(S)-HETE等差异代谢物的相对含量接近于对照组水平。代谢通路分析表明,SLE发病会导致体内不饱和脂肪酸和氨基酸代谢通路显著变化,而解毒祛瘀滋阴方对SLE紊乱的不饱和脂肪酸代谢通路具有一定修复调节作用。     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白的提取和鉴定表征

该研究通过限制性胃蛋白酶酶解法提取蕲蛇中Ⅱ型胶原蛋白(type Ⅱ collagen,CⅡ),并采用离子交换色谱法对其进行纯化,所得蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法、红外吸收光谱法和质谱法进行表征鉴定,结果显示,蕲蛇CⅡ相对分子质量约为130 kDa,其紫外吸收峰约为223 nm;红外图谱中在1 200~1 450 cm^-1具有特征吸收,表明蕲蛇CⅡ中有特征序列Gly-X-Y肽段,存在三股螺旋结构。通过对蕲蛇CⅡ与牛CⅡ进行蛋白质肽段质谱图分析对照后发现,两者具有相似肽段和CⅡ结构特征。以上鉴定表征结果证明采用酶解法提取蛋白为蕲蛇CⅡ,可为蕲蛇药材CⅡ的进一步药理研究提供实验基础。     

蕲蛇水提液对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

目的:研究蕲蛇水提液对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法:制备完全弗氏佐剂诱导的Wistar大鼠AA模型并进行随机性分组,分为空白组、模型组、阳性组(塞来昔布给药组)、蕲蛇低剂量组、蕲蛇中剂量组、蕲蛇高剂量组,每组10只。连续给药20d,采用容积法测量关节肿胀程度,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的表达水平。结果:与模型组比较,不同剂量的蕲蛇水提液均能显著降低大鼠右后足跖肿胀度(P0.01),使炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著降低(P0.01),且对不同炎性细胞因子的抑制强度与阳性组相比有所不同。结论:蕲蛇提取液对AA大鼠关节炎症有一定的治疗作用,其治疗机制可能是通过口服免疫耐受机制产生免疫调节作用抑制炎性细胞因子实现的。