PPARα配体对泡沫细胞炎性介质分泌的影响

目的在证实泡沫细胞有过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）表达的基础上,探讨其配体对泡沫细胞炎性介质分泌的影响。方法体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,给予oxLDL进一步诱导其转变为泡沫细胞,应用RT-PCR检测PPARα基因表达;PPARα配体氯贝丁酯（50μmol/L）干预后用ELISA法测定泡沫细胞培养上清液中IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9浓度,Gelatin Zymography测定MMPs活性。结果巨噬细胞转化为泡沫细胞后其PPARα基因表达无显著变化;氯贝丁酯可显著抑制泡沫细胞IL-6、TNF-α（P<0.05）、MMP-9（P<0.01）的分泌,抑制MMP-9的活性,对MMP-2的分泌和活性无影响。结论PPARα配体抑制致动脉粥样硬化炎性因子的分泌,减少基质金属蛋白酶的释放并抑制其活性,对防治粥样硬化有利。     

孪生兄弟同患急性心肌梗死一例

双胞胎同患急性心肌梗死的病例相对罕见，我院收治一对，报道如下。     

血清醛固酮和急性ST段抬高型心肌梗死经皮冠状动脉介入术后无复流的关系

目的 探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)急诊PCI术前血清醛固酮(aldosterone,ALDO)水平和术后无复流的关系.方法 2007年1月至2007年10月连续收集117例STEMI患者,在发病12 h内行急诊PCI,在术前股动脉穿刺后留取血清,采用放射免疫法测定醛固酮含量.按ALDO水平分成三组,ALDO＜100 pg/mL组37例,100 pg/mL≤ALDO≤200 pg/mL组43例,ALDO＞200 pg/mL组37例.PCI术后通过评估冠状动脉血流TIMI分级,来判断无复流的发生.又将117例分为无复流(10例)和心肌充分复流(107例)两组,比较两组ALDO水平.结果 ALDO＞200 pg/mL组的无复流发生率(21.62%)明显高于ALDO＜100 pg/mL组(2.70%)和100 pg/mL≤ALDO≤200pg/mL组(2.33%),P=0.003 8.另外,无复流组ALDO水平为379.1±234.3 pg/mL,明显高于心肌充分复流组的164.5±100.6 pg/mL(P=0.001 0).STEMI发病早期PCI术前的ALDO水平与术后TIMI分级两者呈负相关(相关系数-0.392 41,P＜0.000 1).结论 随着血清醛固酮水平的升高,无复流的发生也相应增加.STEMI发病早期PCI术前的ALDO水平与术后TIMI分级两者呈负相关.     

基于数据挖掘的针灸治疗神经衰弱经穴运用规律分析

目的:分析针灸治疗神经衰弱的经穴运用特点。方法:在收集针灸治疗神经衰弱文献基础上,建立以腧穴为主的数据库,运用数据挖掘技术,总结使用经脉和穴位的规律。结果:针灸治疗神经衰弱取穴有局远配合和循经取穴的特点,以督脉和膀胱经选用的腧穴最多,交会穴和原穴等特定穴的应用广泛,建议以{安眠、神门}和{心俞、神门、内关}为基础方,局部配穴推荐使用{神庭、本神}和{百会、四神聪},远端配穴根据证型作辨证配穴组成针灸处方。结论:通过数据挖掘技术所得的研究结果可为针灸临床治疗神经衰弱的选穴、穴位配伍以及组方提供参考和根据。     

精灸治疗腹泻型肠易激综合征的临床观察

目的:观察精灸治疗腹泻型肠易激综合征的临床疗效。方法:将72例腹泻型肠易激综合征患者随机分为精灸组及针刺组,每组36例。精灸组采用精灸疗法,针刺组采用常规针刺疗法,观察两组临床疗效、治疗前后各单项积分以及总积分变化。结果:治疗后精灸组患者IBS-SSS各单项症状积分、总积分改善优于对照组(P0.01或P0.05);精灸组总有效率为94.44%,针刺组为86.11%,精灸组总有效率高于针刺组(P0.05)。结论:精灸对于腹泻型肠易激综合征腹痛、腹胀、排便情况、生活干扰度等症状的改善优于普通针刺。     

药物洗脱支架和金属裸支架治疗冠状动脉小血管病变的疗效

目的 评估雷帕霉素洗脱支架(SES)治疗小管径冠状动脉内粥样硬化病变的疗效. 方法 回顾性分析448例小血管病变SES植入病人和124例裸金属支架(BMS)植入病人的长期疗效.统计并比较住院期间及9个月不良心血管事件发生率(MACE). 结果 SES组治疗复杂病变更多,平均支架长度更长,9个月后再狭窄率明显低于BMS组(1.6% vs 9.9%,P＜0.001);MACE发生率也显著低于BMS组(4.3% vs 13.90%;P＜0.001). 结论 与BMS组相比,在小血管复杂病变中植入SES是有效的,能明显减少术后9个月再狭窄和靶病变血运重建率.     

特异性抑制单核细胞中EMMPRIN基因表达的siRNA筛选和鉴定

目的 设计合成干扰细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)基因表达的不同小型干扰RNA(siRNA),筛选出能高效抑制单核/巨噬细胞中EMMPRIN表达的siRNA.方法 根据人源EMMPRIN mRNA的序列,设计合成3对不同的且能干扰EMMPRIN基因表达的siRNA,将其转染THP-1单核细胞株,采用荧光定量PCR和蛋白印迹法评价基因表达情况.结果 设计合成的3对siRNA中的2对siRNA可以特异性抑制单核细胞中EMMPRIN mRNA和蛋白表达(分别减少70%和50%,P＜0.05).结论 成功设计合成了针对EMMPRIN基因的siRNA,并从中筛选出能特异且高效阻断EMMPRIN表达的siRNA,为进一步研究EMMPRIN基因对动脉粥样硬化形成的影响及其临床应用奠定了基础.     

PPARγ激动剂筛选模型的建立及其应用

目的建立一种简便实用的细胞模型,用于筛选过氧化物酶增殖剂激活受体γ(PPARγ)的新配体激动剂.方法在U937细胞中,共转染PPARγ表达和报告质粒,构建PPARγ激动剂筛选模型,单独转染PPARγ报告质粒作为阴性对照.转染细胞中加入候选药物,24 h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPARγ的能力. 结果已知的PPARγ配体激动剂吡格列酮使虫荧光素酶活性增强了4.48倍(P<0.001),验证了模型的有效性.高密度脂蛋白(HDL)不能激动PPARγ,而氧化后随剂量增加,使虫荧光素酶活性增强1.33倍(25 μg/mL)和1.78倍(50 μg/mL),但没有达到统计学差异(P=0.058,P=0.054);白藜芦醇使虫荧光素酶强度增加了1.78倍和2.47倍(P=0.033, P=0.01).结论通过细胞共转染PPARγ表达质粒和编码虫荧光素酶的报告质粒,可以建立简便的PPARγ激动剂筛选模型.HDL氧化后可能会产生激动PPARγ的成份,而白藜芦醇具有较强的PPARγ激动能力.     

EMMPRIN基因沉默对巨噬/泡沫细胞中MMP-9表达及单核细胞迁移能力的影响

目的:观察细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)基因沉默对巨噬/泡沫细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达以及单核细胞迁移能力的影响。方法:根据RNA干扰原理,设计合成EMMPRIN-siR-NA。通过荧光定量PCR和Western blotting观察巨噬、泡沫细胞中EMMPRIN基因和蛋白被抑制情况。采用West-ern blotting观察特异性抑制EMMPRIN表达对巨噬、泡沫细胞中MMP-9蛋白表达的影响,通过迁移实验观察特异性抑制EMMPRIN表达对单核细胞迁移能力的影响。结果:采用EMMPRIN-siRNA转染巨噬、泡沫细胞,抑制细胞内EMMPRIN的基因和蛋白表达(P0.01)后使巨噬、泡沫细胞中MMP-9的蛋白表达减少了50%和40%。此外特异性抑制EMMPRIN表达使单核细胞在趋化因子MCP-1、VEGF趋化诱导下迁移能力明显减弱(P0.05)。结论:EMMPRIN基因沉默使巨噬、泡沫细胞中MMP-9的蛋白表达明显减少、活性明显减弱同时使单核细胞的趋化迁移能力降低。由此可见EMMPRIN在MMP的表达、活化及单核细胞迁移中扮演重要角色,可能成为防治动脉粥样硬化新的治疗靶点。     

高胰岛素状态下巨噬细胞PPARγ抗炎活性的变化

目的探讨高胰岛素状态下巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）抗炎活性的变化。方法体外培养THP1细胞,诱导分化为巨噬细胞,采用吡格列酮和不同浓度胰岛素分组干预,ELISA法测定细胞培养上清液中IL6、TNFα、MMP9浓度,GelatinZymography法测MMP9活性。半定量RTPCR、Westernblot检测巨噬细胞PPARγ基因、蛋白表达。结果PPARγ配体吡格列酮（20μmol/L）作用24h可显著降低巨噬细胞IL6（P<0.01）、TNFα、MMP9的分泌（P<0.05）,抑制MMP9活性（P<0.05）。高胰岛素使吡格列酮抑制巨噬细胞分泌IL6、TNFα、MMP9的作用减弱,此作用与胰岛素浓度有关,呈浓度依赖性（0.25～0.5μmol/L）。而高胰岛素（0.1μmol/L）状态下巨噬细胞PPARγ基因、蛋白的表达均无显著变化。结论高胰岛素可减弱PPARγ配体抑制巨噬细胞分泌IL6、TNFα、MMP9的作用,但并未对巨噬细胞PPARγ基因、蛋白的表达产生影响,提示胰岛素对PPARγ的活性可能存在抑制。