复方感冒灵颗粒抗流感相关药效作用研究

目的 建立复方感冒灵颗粒（CGG）全方、化学药（CM）组、中药（TCM）组的抗病毒、抑菌、解热、抗炎等实验,以期综合评价复方感冒灵颗粒治疗流行性感冒的药效作用,为临床用药提供参考。方法 分别采用甲型流感病毒制备小鼠病毒感染模型,金黄色葡萄球菌制备小鼠细菌感染模型,酵母菌致大鼠发热模型及巴豆油致小鼠耳肿胀模型,对CGG、CM、TCM的抗病毒、体内体外抑菌、解热和抗炎的作用效果进行研究。结果 小鼠感染流感病毒后,给药组肺组织中病毒载量较模型组明显降低（P<0.05）;CGG、CM、TCM组小鼠的肺指数抑制率分别为19.68%、8.30%、8.54%;各组存活时间较模型组明显延长（P<0.05）,延长率分别为29.6%、5.4%、12.9%;病毒感染致小鼠死亡抑制率分别为26.7%、0、10.0%。在体内注射金黄色葡萄球菌感染小鼠致死实验中发现,CGG、CM、TCM对小鼠的死亡抑制率分别为10.0%、15.0%、0;体外抑菌和杀菌实验发现CGG、TCM对金黄色葡萄球菌等标准株均显示出抑制和杀灭作用。解热实验中发现CGG、CM可在给药后1、2 h显著抑制酵母致大鼠发热反应（P<0.01）。抗炎实验中发现给药组耳肿胀值明显低于模型组（P<0.05）,CGG、CM、TCM组抑制率分别为31.7%、22.6%、26.8%。结论 CGG具有抗病毒、抑菌、解热、抗炎等功效,且CGG效果优于TCM、CM,提示TCM和CM发挥了协同作用,可用于治疗感冒引起的头痛、发热、鼻塞、流涕、咽痛等上呼吸道感染疾病。     

复方感冒灵流浸膏的HPLC指纹图谱及化学成分鉴定

目的 建立复方感冒灵流浸膏HPLC指纹图谱并对其化学成分进行分析,为复方感冒灵流浸膏质量评价与药效物质基础研究提供依据。方法 采用Kromasil C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长290 nm,柱温为30℃,测定10批复方感冒灵流浸膏。利用中药色谱相似度评价系统建立复方感冒灵流浸膏HPLC指纹图谱,并通过对照品对共有峰进行指认,应用HPLC-Q-TOF-MS/MS技术对复方感冒灵流浸膏中的化学成分进行鉴定。结果 建立了复方感冒灵流浸膏成分指纹图谱共有模式,显示12个共有峰,各峰分离度良好,各批次间共有峰相对保留时间RSD均<3.0%,样品间相似度均>0.9。鉴定出复方感冒灵流浸膏中12个化学成分,分别为奎尼酸、原儿茶酸、新绿原酸、swertiajaposide F、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、蒙花苷。结论 该指纹图谱具有良好的精密度、重复性、稳定性,各共有峰间分离度好,可用于复方感冒灵流浸膏的质量评价;该研究为复方感冒灵流浸膏物质基础的研究提供基础。     

基于超高效液相色谱法-串联质谱技术和网络药理学的复方感冒灵成分及作用机制验证

目的：采用超高效液相色谱法-串联质谱（UPLC-MS/MS）技术系统研究复方感冒灵颗粒药效物质成分及体内代谢谱,并结合网络药理学探讨发挥药效的作用机制。方法：采用UPLC-MS/MS法对复方感冒灵颗粒主要化学成分以及入血成分进行鉴定。采用网络药理学的方法构建“成分-靶点-功效-疾病”网络,通过蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络筛选核心靶点,进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果：从复方感冒灵颗粒醇提物中共鉴别出170个化合物和21个入血成分,构建了复方感冒灵颗粒成分谱及代谢谱。预测核心靶点为肿瘤坏死因子（TNF）、血管内皮生长因子A（VEGFA）、表皮生长因子受体（EGFR）、胱天蛋白酶3（CASP3）、前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）、促分裂原活化的蛋白激酶1（MAPK1）、信号转导及转录激活因子3（STAT3）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、白细胞介素-2（IL-2）以及促分裂原活化的蛋白激酶14（MAPK14）,与解热、抗炎与抗病毒功效对应。结论：本研究采用UPLC-MS/MS技术构建了复方感冒灵颗粒的物质成分谱及体内代谢谱,从网络药理学角度阐明复方感冒灵多成分、多靶点的整体调节特点,初步揭示解热、抗炎与抗病毒的物质基础和作用机制,为复方感冒灵的深入研究奠定了基础。     

五指柑药材质量标准研究

目的建立五指柑药材的质量标准。方法以隐绿原酸、异牡荆苷和木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷为对照,建立五指柑薄层鉴别方法;建立异荭草苷和木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷含量的HPLC测定方法,采用Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长:340 nm;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃。结果五指柑在薄层色谱中检出隐绿原酸、异牡荆苷和木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷,且分离效果较好;含量测定结果表明,异荭草苷在11.64~116.4μg·mL^-1,木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷在21.2~212.0μg·mL^-1质量浓度范围内具有良好的线性关系,回归方程分别为Y=52 474X+35 233,r=0.999 6;Y=82 694X-1 199.4,r=0.999 9,平均回收率分别为97.19%、97.06%,RSD为1.92%、1.35%。10批五指柑异荭草苷的含量为0.24~0.80 mg·g^-1,木犀草素-3’-葡萄糖醛酸苷的含量为0.26~1.57mg·g^-1。结论所建立的方法具有良好的专属性和准确性,可用于五指柑药材的质量控制。