人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇(PEG)为修饰剂,以活性酯法制备出PEG- 重组人超氧化物歧化酶(PEG-rh SOD)共价结合物.修饰酶的生物半衰期为15h,比修饰前延长了90倍,对酸、碱、热的耐受力明显高于修饰前.用照射小鼠的活存率评价了PEG-rhSOD的辐射防护作用.小鼠受8.5Gy γ射线照射前1h腹腔注射30万U/kg PEG-rh SOD,可提高活存率42%,与未修饰的rhSOD相比,活存率提高14%.实验仍在进行中.     

刺桐胰蛋白酶抑制剂的高效表达、纯化、亲和介质的制备及其在r-PA纯化中的应用

刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,能够特异性结合胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂,抑制其活性。因此ETI可以作为配体与固定相偶联制备亲和层析介质,用于tPA(组织型纤溶酶原激活剂)及其突变体的纯化。利用基因工程方法构建了ETI的高表达工程菌株,诱导表达后目的蛋白占总蛋白的39.6%,经包涵体变性、复性、纯化,制备了纯度高于96%的ETI样品,收率达到了63.5%。利用纯化的ETI,偶联制备了亲和层析介质,偶联率达到99%。用制备的ETI亲和层析介质纯化瑞替普酶(r-PA),获得的r-PA样品纯度高于95%,生物学活性高于5×105U/mg。本研究为ETI的进一步生产及应用奠定了基础。     

去氨普酶研究进展

去氨普酶是重组吸血蝙蝠唾液中提取的纤溶酶原激活剂,是正在开发中的新一代溶栓药物。与其他溶栓剂相比,它具有治疗窗宽、特异性强、毒副作用小等特点。此文对其基础和临床研究进行了综述。     

重复给予恒河猴rhKGF后其免疫原性及抗体中和性质的检测

目的测定恒河猴经静脉重复给予重组人角质细胞生长因子(rhKGF)后血清中特异性抗体的水平及抗体中和性质。方法采用间接ELISA法检测猴血清中的抗体水平,同时采用32D-KGFR细胞检测抗体的中和活性。结果确定了抗原包被浓度为10μg·mL-1,抗体从1.6×103开始稀释,二抗稀释倍数为1∶5×103的间接ELISA法实验体系;14～56 d均可检测到抗体的存在;生物学活性测定的结果显示其为非中和性抗体。结论重复给予恒河猴rhKGF的毒性试验中,部分猴的血清中检测到抗体,但不是中和抗体。     

应用McAb和免疫血清对不同HFRS病毒株感染乳鼠保护作用的比较

HFRS病毒陈茱、76-118株和R22株100LD_(50)分别感染新生乳鼠。感染后24h,经腹腔分别接种McAb(3D8、3G1、8F8、8G3和8G2)和免疫血清(陈株、76-118株和R22株),结果发现,这5株McAb对陈林和76-118株感染乳鼠100％保护,而对R22株感染乳鼠只有McAb8F8有25％保护,而其佘McAb均无保护。免疫血清的保护实验也表明,陈株和76-118株可以交互保护。上述结果提示,陈株与76-118株保护性抗原较一致,但R22株与前两株差别较大。     

抗重组人Cu／Zn SOD单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

抗重组人Ｃｕ／Ｚｎ　ＳＯＤ单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立陈晓穗，赵丽，王晶翼，骆训一，谢邦铁，刘晓琳，李战青，陈宇萍（海军总医院分子生物学研究室，北京１０００３７）超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）是一种有前途的药用酶。美国ＦＤＡ已批准ＳＯＤ在炎症、再灌注性损伤...     

流行性出血热外周血淋巴细胞亚群的变化及特异性免疫球蛋白对它的影响

用淋巴细胞分化抗原的系列单抗隆抗体,动态观察流行性出血热(EHF)外周血淋巴细胞亚群的变化。发现CD_8~+细胞数在2—5及9—12病日明显增加,CD_4~+/CD_8~+比值倒置或下降,16—19病日逐渐恢复正常。B~+、IL-2R~+和HLA-DR~+细胞数在病程的不同阶段均显著增高。在疾病的早期重、中型患者B~+、IL-2R~+及HLA-DR~+细胞数高于轻型患者。特异性免疫球蛋白治疗后B~+、IL-2R~+和HLA-DR~+细胞数与对照组相比明显降低。提示:EHF患者细胞免疫功能增强,细胞免疫可能参与本病的发病机制。特异性免疫球蛋白的应用似有改善细胞免疫功能紊乱的作用。     

金属螯合层析介质的研制及其在纯化重组人铜锌超氧化物歧化酶中的应用

以琼脂糖Sepharose 4B为基质,经氯代环氧丙烷活化,与亚氨基二乙酸通过化学交联再与铜螯合,合成了金属铜螯合层析介质,结果显示此介质不仅具有特异性吸附能力,且有一定的刚性,对强碱和热亦有一定的耐受性.用此介质纯化人超氧化物歧化酶(rhSOD),即可得到高纯度的rhSOD产品,简化了纯化工艺,降低了生产成本.