新型冠状病毒肺炎与耳鼻咽喉科诊疗的相关研究

2019年末，我国湖北省武汉市暴发了新型冠状病毒肺炎（COVID-19）并在短时间内迅速波及全国。COVID-19患者病情变化迅速，常累及多个器官，需要多学科协作进行综合性诊疗。虽然患者最常见的临床表现为发热、乏力及干咳，但临床数据分析显示有部分患者可以鼻塞、咽痛、嗅觉障碍等耳鼻咽喉科相关症状就诊。同时在标准诊疗方案中也涉及到耳鼻咽喉科的相关内容，故充分认识耳鼻咽喉科与COVID-19诊治的相关性，有助于提高对该疾病的认识与掌握。本文从耳鼻咽喉科角度出发，对二者之间的相关性作一综述，为COVID-19诊断及治疗过程中的耳鼻咽喉科相关问题提供参考。     

基于16S rRNA测序研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响

目的 采用16S rRNA技术研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响。方法 将60只健康SD大鼠随机分为6组，分别为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组，丽珠肠乐组，每组10只。除正常组外，每日按头孢拉定178.6 mg·kg^-1，硫酸庆大霉素31.25 mg·kg^-1混合抗生素进行灌胃造模，造模成功后，葛根芩连汤高、中、低剂量组灌胃葛根芩连汤（7.02，3.51，1.755 g·kg^-1），丽珠肠乐组按0.125 g·kg^-1灌胃，正常组与模型组给予无菌蒸馏水灌胃，体积分数均为10 mL·kg^-1，连续给药7 d，将大鼠麻醉后取大鼠结肠内容物，提取粪便DNA后进行16S rRNA高通量测序并分析其结果。结果 葛根芩连汤明显调节菌群失调性腹泻模型大鼠的物种数量及Alpha与Beta多样性，提高菌群生物丰富度指数与多样性指数，正向调节菌群失调性腹泻模型大鼠的3种差异菌门（厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门）与14种差异菌属（拟杆菌属、狄氏副拟杆菌属、布劳特氏菌属等）。结论 葛根芩连汤对菌群失调性腹泻模型大鼠肠道菌群有调节作用，揭示了肠道菌群与菌群失调性腹泻之间的生理病理机制。     

胶束电动毛细管色谱法测定保健品中的8种心血管保健功效成分

目的建立8种心血管保健功效成分(腺苷、大豆苷元、大豆苷、染料木苷、染料木素、葛根素、芦丁、淫羊藿苷)的胶束电动毛细管色谱同时检测法。方法采用50 cm×Φ50μm弹性石英毛细管为分离柱,柱温25℃,以50 mmol/L硼砂-10 mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS)溶液为运行缓冲液,在16 kV直流电压下分离,紫外检测器检测。结果所建立的方法能在10 min内实现8种物质的基线分离,以苯甲酸为内标,各物质相对迁移时间及相对峰面积相对标准偏差(RSD)分别低于2.11%及2.16%,线性相关系数r值为0.9961～0.9996,检出限在0.076～0.835μg/ml之间。相对峰面积日内精密度≤2.75%,日间精密度≤6.90%,加标回收率在85.7%～96.5%范围内。结论本方法简便快速,灵敏准确,可用于心血管保健食品中8种功效成分的测定。     

中西医结合治疗三踝关节骨折临床分析

目的:观察中西医结合治疗三踝关节骨折的临床疗效。方法:选择62例手术治疗的三踝关节骨折患者,随机分为对照组和观察组,每组31例。所有患者均采用术后关节功能康复训练,观察组患者术后加用中医穴位按摩及中药方剂熏洗,比较两组患者术后6个月的踝关节功能。结果:术后6个月观察组患者踝关节功能优良率为90.3%,对照组患者踝关节功能优良率为80.6%,观察组显著高于对照组。结论:中西医结合治疗三踝关节骨折,能够促进患者术后关节功能的恢复,临床疗效显著。     

越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠血清IgE及肺组织中SOD影响的研究

目的 通过研究不同阶段各实验组小鼠血清中免疫球蛋白（IgE）及肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力与抑制率的改变,探索越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠的作用机制。方法 采用卵白蛋白( OVA)、氢氧化铝凝胶混悬液腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠哮喘模型,各组小鼠治疗完成后处死,采用ELISA法检测各组小鼠血清IgE水平,采用WST-1法测定各组小鼠肺组织匀浆中SOD活力水平,肺组织HE染色,观察其病理变化。结果 中药制剂组小鼠与哮喘模型组小鼠相比,前者外周血清中IgE含量下降(P<0.05),IgE在2组间差异有统计学意义(P<0.05);前者肺组织匀浆中SOD活力与抑制率升高,SOD活力与抑制率在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 降低过敏性哮喘小鼠血清中IgE含量及升高小鼠肺组织SOD活力与抑制率水平,提高肺组织抗氧化能力,可能为越婢加半夏汤治疗过敏性哮喘的作用机制之一。     

越婢加半夏汤降低过敏性哮喘小鼠的血清IgE和升高肺组织中SOD的活力

目的 通过观察不同阶段各实验组小鼠血清中免疫球蛋白(IgE)及肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力与抑制率的变化,探讨越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠的作用机制。方法 随机将健康昆明种小白鼠分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松干预组和中药制剂组。采用卵白蛋白(OVA)、氢氧化铝凝胶混悬液腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠哮喘模型,造模成功后,中药制剂组给予越婢加半夏溶液1 mL/100 g。地塞米松组给予腹腔注射地塞米松 1 mg /kg。正常对照组和哮喘模型组小鼠分次给予生理盐水灌胃治疗。给药30 d后处死,检测各组小鼠血清IgE水平和肺组织SOD活力,并进行HE染色观察肺组织的病理学变化。结果 中药制剂组小鼠与哮喘模型组小鼠相比,前者外周血清中IgE含量下降(P<0.05),IgE在2组间差异有统计学意义(P<0.05);前者肺组织匀浆中SOD活力与抑制率升高,SOD活力与抑制率在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 降低过敏性哮喘小鼠血清中IgE含量及升高小鼠肺组织SOD活力与抑制率水平,提高肺组织抗氧化能力,可能为越婢加半夏汤治疗过敏性哮喘的作用机制之一。     

同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱快速测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁的研究

  目的  建立尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱的快速测定方法。  方法  离心后的尿样上清液加入15N₅-8-羟基脱氧鸟苷、D₃-可替宁两种内标,以3 mmol/L甲酸铵水溶液稀释5倍,经0.22 μm水系滤器过滤后,引入液相色谱-串联质谱法（ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）分析。以ACQUITY UPLC? BEH HILIC色谱柱（50 mm×3.0 mm, 1.7 μm）分离,3 mmol/L甲酸铵水溶液与乙腈为流动相(10∶90) 等度洗脱,柱温40 ℃,流速0.3 mL/min;质谱以电喷雾电离源（electrospray ionization, ESI）+扫描多反应监测模式检测,内标法定量。  结果  8-羟基脱氧鸟苷和可替宁在各自线性范围内线性良好,方法检出限分别为0.064 μg/L和0.035 μg/L;定量限分别为0.21 μg/L和0.12 μg/L;加标回收率分别为92.6%～102.0%和102.0%～106.0%。采用所建立的方法测定实际尿样,并通过40例样本统计分析发现,主、被动吸烟者的烟草烟气暴露量、烟草特有亚硝胺摄入量存在差异（P<0.05）,NNAL和可替宁含量在主动吸烟者尿样中含量更高;主、被动吸烟者的烟草烟气暴露与烟草特有亚硝胺暴露呈正相关（其相关系数r分别为0.487和0.786,P<0.05）。  结论  本研究成功建立同时测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁含量的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱法,该方法前处理简单、快速,通过同位素内标校正,定量灵敏准确,能够满足批量分析的需求。     

更昔洛韦联合胸腺肽治疗小儿巨细胞病毒感染疗效分析

目的探究更昔洛韦联合胸腺肽在HCMV感染的小儿患者治疗中的临床应用价值。方法采用前瞻性开放研究,共收集80例在我院就诊的人类巨细胞病毒(HCMV)小儿患者,分别进行更昔洛韦联合胸腺肽治疗和单用更昔洛韦治疗,经统计学分析比较两组治疗的总有效率和不良反应发生率。结果将二者总有效率和不良反应率采用SPSS18.0统计软件进行卡方检验后,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论更昔洛韦与胸腺肽联合治疗小儿巨细胞病毒感染的疗效明显优于单用更昔洛韦治疗,且其不良反应明显低于后者,因此值得在临床上推广应用。     

间接ELISA检测蛔虫抗体方法的建立

目的 寻找能更准确地对蛔虫感染进行检测的方法。方法 以蛔虫虫卵可溶性蛋白为抗原,建立检测蛔虫特异性抗体的间接ELISA方法。结果 ELISA的最佳工作条件是：抗原包被浓度为1 μg/mL,血清最佳稀释度为1: 80,酶标二抗的最佳工作浓度为1: 8 000。对100份人血清样本采用本方法进行检测,其阳性检出率为10.0 %;血清样本对应粪便样本进行现场粪检虫卵法确定阳性率为2.0 %。结论 本研究建立了稳定而特异的抗蛔虫体IgG 的间接ELISA检测方法,可用于蛔虫感染的临床监测。     

抗类风湿人源单链抗体库的制备及筛选

目的 通过噬菌体展示技术构建抗类风湿人源单链抗体库,为其进一步的临床应用研究奠定基础。方法提取患者外周淋巴细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以人源免疫球蛋白H链和L链可变区的扩增引物,分别扩增出H链和L链可变区基因。采用SOE—PCR法将VH和比片段随机拼接成scFv片段,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中,构建噬菌体单链抗体库。结果初级库库容量为3×10^6,在大肠杆菌TG1中重组后得到1．2×10^6的次级抗体库。结论本研究成功构建类风湿人源单链抗体库,拟为类风湿病的预防、诊断、治疗奠定基础。