医患关系中的循证医学理念

伴随着社会各界对“看病难、看病贵”问题的不断抱怨,医患关系也几乎跌至谷底。究其原因是多方面的,本文从循证医学角度阐述医患这种特殊的人际关系,来改善目前的医患关系。1循证医学1.1定义循证医学(ev idence-based m ed ic ine),系1992年加拿大P rof.D av id Sackett首先提出,为“慎重、准确和明智地应用当前所能获得的最佳研究证据,同时结合医生的个人专业技能和多年临床经验,考虑患者的价值和愿望,将三者完美结合以制定出患者的治疗措施”[1]。1.2循证医学证据根据论证强度分5级:l级证据是指多个随机对照临床试验的系统评价;2级证据是指单个、大样本的随机对照试验;3级是指有对照但未随机的前瞻性临床试验;4级是指回顾性的病例对照研究或无对照的病例系列分析;5级是指经科学验证专家的观点和经验,传统综述、个案报道。从1~5级的论证强度依次减低,分级标准中,专家或权威的意见均属最低级别。1.3循证实践(ev idence-based practice)即促进循证医学临床的实践,包括三个要素:利用最佳的临床研究证据、注重医生的专业技能和经验、尊重患者的期望和选择权利。包含5个步骤[1...     

LC3Ⅱ在骨肉瘤组织中的表达及自噬上调对其化疗敏感性的影响

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3II(LC3II)在骨肉瘤组织中的表达,观察自噬上调对化疗药物顺铂敏感性的影响。方法:利用免疫组化技术,检测LC3II在28例骨肉瘤及19例正常骨组织中的表达;采用MTT比色法,应用雷帕霉素上调自噬,测定化疗药物DDP对骨肉瘤细胞的增殖抑制率。结果:骨肉瘤组织中LC3II阳性率为64.29%,正常骨组织中LC3II阳性率分别为94.73%,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。MTT比色法显示骨肉瘤细胞增殖抑制率与DDP的浓度呈正相关,Spearman相关系数为0.989;Rapamycin+DDP组和DDP组的细胞增殖抑制率比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:LC3II在骨肉瘤组织中的阳性表达低于正常骨组织,它的低表达与骨肉瘤的发生发展有关;Rapamycin+DDP组的细胞增殖抑制率明显低于DDP组,自噬的上调降低了骨肉瘤细胞对化疗药物DDP的敏感性。     

软骨修复中组织整合研究进展

软骨移植是关节软骨修复的重要发展方向.近年来随着软骨移植的开展和软骨组织工程学的进步,移植软骨与受体软骨之间的整合逐步受到重视.软骨整合良好能明显改善关节功能,延长修复组织寿命,整合不良则可导致关节面受力分布不均而加速软骨退变.近年的研究报道对整合的概念和评价方法有更为丰富的认识,对可调控整合的因素如细胞因子、力学、酶等有更深入研究,对内环境、电刺激和激素水平等较新因素也有一定认识.软骨修复整合是多因素共同作用的结果,研究领域正逐步从单因素研究向多因素研究推进.     

细胞老化与椎间盘退变

近期研究发现椎间盘细胞老化与椎间盘退变的特征性改变,如细胞数量减少,基质降解,炎性因子、基质金属蛋白酶等合成和分泌增加相关,在椎间盘退变发生发展过程中起着重要作用。椎间盘退变过程中细胞老化发生机制不同,复制老化为细胞老化的固有机制,而应激诱导早衰则加速了细胞老化,在两种机制的共同作用下最终导致椎间盘细胞染色体和基因表达变化、细胞功能障碍、增殖能力丧失及基质合成改变,椎间盘发生不可逆性变化。因此,干预椎间盘细胞老化途径,延缓椎间盘细胞老化就有可能成为椎间盘治疗的新思路。该文就椎间盘退变过程中细胞老化研究进展及潜在的治疗策略作一综述。     

纳米羟基磷灰石/胶原材料复合硫酸庆大霉素缓释系统体内释放实验

目的 制备纳米羟基磷灰石/胶原材料复合硫酸庆大霉素缓释系统(nano-HA/C-GM-DDS),观察其体内释药效力,以寻求更好的抗生素缓释系统.方法 ①制备纳米羟基磷灰石/胶原材料复合硫酸庆大霉素缓释系统;②体内释放实验:将nano-HA/C-GM-DDS 聚合物植入大鼠股四头肌,术后第1、3、5、7、9、12、18、24天各选6只大鼠,取股四头肌肌肉组织,用标准曲线计算出各标本药物浓度,用SPSS 12.0统计软件包绘制nano-HA/C-GM-DDS的释药浓度与时间关系图,光镜下观察肌肉组织的炎性反应.结果 术后第1天肌肉中nano-HA/C-GM-DDS庆大霉素质量浓度为(130.35±9.25)mg/L,其后逐渐下降,至术后第24天时肌肉中庆大霉素质量浓度仍可达(5.25±1.01)mg/L,局部组织中庆大霉素质量浓度仍在金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(2 mg/L)以上.结论 nano-HA/C-GM-DDS在体内有较好的缓慢释放效应,是一种较好的治疗骨组织感染的生物材料.     

烟酰胺对体外培养兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响

目的 观察烟酰胺(Nia)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的体外培养的退变兔椎间盘组织内细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响.方法 构建兔椎间盘组织凝胶培养模型,分为正常对照组(不加入药物),烟酰胺组(加入0.5 mg/ml烟酰胺),退变组(加入10 ng/ml IL-1β)和治疗组(加入10 ng/ml IL-1β及0.5 mg/ml烟酰胺).培养2周后对各组标本分别行TUNEL染色,Fas、Caspase 3、Bcl-2、HIF-1α、GLUT-1及VEGF免疫组化染色.结果 TUNEL染色示治疗组阳性细胞染色率较退变组有所下降.Fas、Bcl-2染色示治疗组阳性细胞率均与退变组接近(均P>0.05).Caspase 3染色示治疗组阳性细胞率较退变组明显降低(P<0.05).HIF-1α、VEGF染色示治疗组阳性细胞率较退变组均明显降低(均P<0.01).GLUT-1染色示治疗组阳性细胞率较退变组轻微下降(P>0.05).结论 烟酰胺可以抑制IL-1β诱导的椎间盘细胞凋亡,改善IL-1β导致的椎间盘能量代谢障碍.     

烟酰胺对兔髓核细胞增殖及凋亡的调节作用

背景：研究表明，烟酰胺能够对白细胞介素1β或肿瘤坏死因子α致椎间盘退变起到保护作用，但烟酰胺对椎间盘细胞凋亡与增殖的保护机制尚不很清楚。 目的：观察烟酰胺对兔髓核细胞增殖及凋亡的调控作用及其机制。 设计、时间及地点：随机对照分组设计，于2007-04/10在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室及协和医院干细胞中心完成。 材料：2~3月龄日本大白兔10只，体质量1.5~2.0 kg，取L1~L6节段椎间盘内髓核细胞，体外培养髓核细胞凋亡模型。 方法：实验分为6组，正常对照组：不加任何药物；烟酰胺组：加入0.5 g/L 烟酰胺；白细胞介素1β组：加入10 μg/L 白细胞介素1β；白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组：加入10 μg/L 白细胞介素1β及非特异性Caspase抑制剂Z-VAD-FM；白细胞介素1β＋小剂量烟酰胺组：加入10 μg/L 白细胞介素1β及0.05 g/L 烟酰胺组；白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组：10 μg/L 白细胞介素1β及0.5 g/L 烟酰胺。3 d 后对各组细胞行Annexin V-PI染色，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9功能染色检测及MTT检测。 主要观察指标：各组细胞凋亡率、caspase-3、8、9功能染色阳性细胞率及各组细胞的吸光度。 结果：①白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组和白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组较白细胞介素1β组细胞凋亡率明显下降（P < 0.01）。②白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组、白细胞介素1β＋大、小剂量烟酰胺组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9功能染色阳性细胞率较白细胞介素1β组明显下降（P < 0.01或P < 0.05）。③与白细胞介素1β组相比，白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组和白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组吸光度升高（P < 0.01）。 结论：烟酰胺可以促进髓核细胞的增殖并抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡，对凋亡的抑制作用主要通过抑制凋亡的线粒体途径实现。     

烟酰胺对椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原的调控作用

目的：考察烟酰胺对白介素-1β诱导的体外兔腰椎间盘退变模型中Ⅰ、Ⅱ型胶原的保护作用，并初步探讨其机制。方法：构建兔腰椎间盘组织凝胶培养模型，将其分为正常对照组，烟酰胺对照组（加入0．5mg／ml烟酰胺），退变组（加入10ng／mlIL-1β）和3个烟酰胺治疗组（加入IL-1β的同时，并分别加入0．5mg／ml，0．25mg／ml和0．05mg／ml烟酰胺）。培养3天及1周时取各组髓核和纤维环分别行Ⅰ、Ⅱ型胶原基因RT—PCR检测，培养2周时行Ⅰ、Ⅱ型胶原、iN—OS、TGF—J31及Caspase--3免疫组化检测。结果：①RT—PCR显示3天及1周时，各治疗组Ⅰ、Ⅱ型胶原表达均强于退变组，烟酰胺的保护作用随浓度增加而增强。②Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化显示，各治疗组椎间盘正常结构和胶原含量均优于退变组，以大剂量烟酰胺治疗组最显著。③iNOS、Caspase--3免疫组化显示，治疗组阳性细胞染色率均低于退变组（P〈0．01）。TGF—β1免疫组化显示，治疗组阳性细胞染色率高于退变组（P〈0．01）。结论：烟酰胺能够抑制IL-1β诱发的椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原表达及含量的下降，这种保护机制与其抑制iNOS、Caspase--3表达和维持TGF-β1表达的作用有关。     

烟酰胺对兔髓核细胞增殖及凋亡的调节作用

背景：研究表明，烟酰胺能够对白细胞介素1B或肿瘤坏死因子α致椎间盘退变起到保护作用，但烟酰胺对椎间盘细胞凋亡与增殖的保护机制尚不很清楚。目的：观察烟酰胺对兔髓核细胞增殖及凋亡的调控作用及其机制。设计、时间及地点：随机对照分组设计，于2007—04／10在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室及协和医院干细胞中心完成。材料：2—3月龄日本大白兔10只，体质量1．5-2．0kg，取L1-L6节段椎间盘内髓核细胞，体外培养髓核细胞凋亡模型。方法：实验分为6组，正常对照组：不加任何药物：烟酰胺组：加入0．5g／L烟酰胺；白细胞介素1β组：加入10μg／L白细胞介素1β：白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组：加入10μg/L自细胞介素1β及非特异性Caspase抑制剂Z-VAD-FM；白细胞介素1β＋小剂量烟酰胺组：加入10μg/L白细胞介素1β及0．05g／L烟酰胺组：白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组：10μg／L白细胞介素1β及0．5g／L烟酰胺。3d后对各组细胞行Annexin V-PI染色，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9功能染色检测及MTT检测。主要观察指标：各组细胞凋亡率、caspase-3、8、9功能染色阳性细胞率及各组细胞的吸光度。结果：①白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组和白细胞介素lB＋大剂量烟酰胺组较白细胞介素1β组细胞凋亡率明显下降（P〈0．01）。②白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组、白细胞介素1β＋大、小剂量烟酰胺组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9功能染色阳性细胞率较白细胞介素1β组明显下降（P〈0．01或P〈0．05）。③与白细胞介素1β组相比，白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组和白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组吸光度升高（P〈0．01）。结论：烟酰胺可以促进髓核细胞的增殖并抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡，对凋亡的抑制作用主要通过抑制凋亡的线粒体途径实现。     

烟酰胺对体外培养兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因的影响

背景：前期研究已证实，烟酰胺能够促进椎间盘细胞的增殖并对白细胞介素1β致椎间盘退变起到保护作用，而烟酰胺对椎间盘退变的保护机制还不很清楚。 目的：观察烟酰胺对白细胞介素1β诱导体外培养的兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响。 设计、时间及地点：实验于2007-11/2008-05 在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室完成。 材料：3~4月龄日本大白兔10只，体质量1.5~2.0 kg，取L1~6脊柱节段56个椎间盘组织，用于构建兔椎间盘组织凝胶培养模型。 方法：将56枚椎间盘随机分为4组，每组14枚。正常对照组：不加入药物；烟酰胺组：加入0.5 g/L 烟酰胺；退变组：加入 10 μg/L 白细胞介素1β；治疗组加入 10 μg/L 白细胞介素1β及0.5 g/L 烟酰胺。培养2周后对各组标本行TUNEL染色及Fas，Caspase-3，Bcl-2，低氧诱导因子1α、葡萄糖转运体1、血管内皮细胞生长因子免疫组织化学染色。 主要观察指标：各组标本TUNEL染色及免疫组织化学染色阳性细胞率。 结果：TUNEL染色示加入烟酰胺后退变组阳性细胞率较正常对照组上升(P=0.001)。Fas染色退变组阳性细胞率较正常对照组明显上升(P < 0.01)。Bcl-2染色示烟酰胺组较正常对照组阳性细胞率升高(P=0.004)。Caspase-3染色示治疗组阳性细胞率较退变组下降(P=0.024)，但仍高于正常对照组(P=0.006)。低氧诱导因子1α染色示烟酰胺组阳性细胞率低于正常对照组(P < 0.01)；退变组阳性细胞率较正常对照组上升(P < 0.01)。葡萄糖转运体1染色示治疗组阳性细胞率高于正常对照组(P < 0.01)。 结论：烟酰胺可以抑制白细胞介素1β诱导的椎间盘细胞凋亡，改善白细胞介素1β导致的椎间盘能量代谢障碍。