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目的 研究肌肽对缺氧所致人体内皮细胞系ECV304细胞损伤的影响.方法 建立缺氧条件下ECV304细胞损伤模型,用MTT法观察肌肽对缺氧损伤的ECV304细胞活性的影响,测定细胞培养基中乳酸脱氨酶(LDH)活力,并对细胞骨架进行考马斯亮蓝R-250染色观测其细胞结构.结果 浓度为10~20 mmol/L肌肽孵育ECV304细胞6 h后,可以抑制缺氧12 h和24 h引起的ECV304细胞活性下降,同时减少LDH的释放,保持细胞骨架完整.结论 肌肽对缺氧所致的ECV304细胞伤具有保护作用. 相似文献
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邻苯二甲醛柱前衍生化高效液相色谱法测定组织中肌肽含量 总被引:3,自引:0,他引:3
目的建立测定小鼠各组织肌肽含量的高效液相色谱法。方法采用C18色谱柱,以甲醇和0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 3.5)为流动相,用邻苯二甲醛为柱前衍生剂,在柱温38℃下采用二元梯度洗脱,对小鼠各组织中的肌肽含量进行了测定。结果肌肽在0.63~10.00μg/mL时峰面积与进样质量浓度有良好的线性关系,其相关系数为0.999 6。回收率在98.2%~99.7%之间。检测限为0.05μg/mL(S/N=10)。结论该法灵敏可靠、专属性强、重现性好。小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑皮层和海马中肌肽含量分别为123.67,22.86,158.86,76.57,81.86 mg/g。 相似文献
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背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。
目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。
设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成。
材料:L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供。α-MEM培养基为美国Gibco公司产品。
方法:复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14 d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成。将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1×106/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜。换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h。设立2组,实验组的板孔内加入含1×10-7 mol/L胰岛素的HEPES缓冲液(136 mmol/L NaCl,4.7 mmol/L KCl,1.25 mmol/L MgSO4,1.2 mmol/L CaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20 mmol/L HEPES,pH 7.4)孵育1 h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1 h。弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1 mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100 μL,孵育10 min后取出置于冰板上快速回收上清。
主要观察指标:考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度。
结果:诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构。使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3 h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似(P > 0.05);使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组(P < 0.05)。
结论:诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。 相似文献
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目的 分析中国西部地区政府医疗卫生支出效率,探索效率变化的原因并提出相关建议,为卫生资源的科学规划提供参考依据。方法 运用数据包揽分析(DEA)的BCC模型和Malmquist指数模型对西部地区2009—2020年间的政府医疗卫生支出效率进行静态和动态分析。结果 12年间各省区综合技术效率均值除宁夏外都小于1,最低和最高值之间相差0.594,规模效率的决策单元值超过0.9的有105个,全要素生产率均值为0.937,技术变化率均值为0.896。结论 医疗卫生支出效率偏低且逐年下降,其主要原因是技术衰退,并且地区间差异显著,规模和结构也有待调整。因此政府应出台相关政策,以技术创新和人才培养为主,因地制宜调整医疗卫生支出规模和配置医疗卫生资源,从而有效提高政府医疗卫生支出效率。 相似文献
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背景:在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少.目的:拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成.材料:L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供.α-MEM培养基为美国Gibco公司产品.方法:复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14 d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成.将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1 × 108/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜.换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h.设立2组,实验组的板孔内加入含1×107mol/L胰岛素的HEPES缓冲液(136mmol/LNaCl,4.7mmol/LKCl,1.25 mmol/L MgSO4,1.2 mmol/L CaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20 mmol/L HEPES,pH 7.4)孵育1 h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1 h.弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1 mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100 μL,孵育10 min后取出置于冰板上快速回收上清.主要观察指标:考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度.结果:诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构.使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3 h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似(P>0.05);使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组(P<0.05).结论:诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型. 相似文献
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