银屑病患者皮损间充质干细胞的培养鉴定及其表达HES1和CXCL6的研究

【摘要】 目的 培养鉴定银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞（DMSC），并研究DMSC的发状分裂相关增强子1（HES1）和趋化因子配体6（CXCL6）表达情况。方法 分离培养15例银屑病患者皮损及18例正常人皮肤的DMSC，利用流式细胞仪进行表型鉴定，实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫印迹（Western blot）检测HES1和CXCL6的mRNA及蛋白表达水平，两组间比较采用t检验。结果 银屑病组DMSC形态与正常对照组无差异，但HES1 和CXCL6基因的mRNA水平分别是对照组的3.56和3.44倍，且差异有统计学意义（P < 0.05）。在蛋白水平，银屑病组DMSC中HES1和CXCL6的表达明显高于对照组（P < 0.05）。结论 银屑病患者皮肤DMSC HES1及CXCL6表达升高可能参与银屑病的发病。     

蒂部分段结扎法对缩短皮瓣断蒂时间的动物研究

目的:探讨蒂部分段结扎法缩短皮瓣断蒂时间方法的可行性及其在带蒂皮瓣转移中的应用。方法:制作大鼠背部随意型皮瓣,采用蒂部分段结扎法逐步减少蒂部血流,分别在3天、6天、9天、12天完全断蒂,观察皮瓣的存活率及微血管密度,并作统计分析。结果:3天、6天、9天断蒂的大鼠皮瓣,其皮瓣外观、存活率及血管密度均存在差异(P0.05),即随着断蒂时间的延长,其血管密度增高,皮瓣存活率提高,而9天组与12天组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:蒂部分段结扎法能缩短皮瓣断蒂时间,9天为该方法断蒂的较好时机,既有利于皮瓣血流循环的充分建立,又能保证皮瓣存活。     

Box-Behnken效应面法优化大黄素/小檗碱-壳聚糖双载药纳米粒的处方工艺研究

目的优化大黄素(Emo)与小檗碱(Ber)壳聚糖双载药纳米粒的制备工艺和处方,并考察其稳定性及溶出度。方法以壳聚糖(CS)为载体,三聚磷酸钠(TPP)为交联剂,采用离子交联法包载大黄素/羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)和小檗碱,得到载药纳米粒(Emo/HP-β-CD-Ber-CS NPs),以粒径和多分散指数(PDI)为自变量,运用总评归一值(OD)法进行数据处理,采用Box-Behnken效应面法优化处方并进行验证。最后对纳米粒的最佳冻干条件进行筛选,考察保护剂种类和用量。并对制剂进行表征和溶出度考察。结果优化得到的最佳制备工艺为壳聚糖与TPP质量比为3∶1,小檗碱与载体质量比为0.166∶1,Emo/HP-β-CD与载体质量比为0.2∶1。测得Emo/HP-β-CD-Ber-CS NPs的平均粒径为(178.0±2.0)nm,PDI为0.187±0.006,平均OD值为0.9536,实测值与预测值接近。大黄素和小檗碱的载药量分别为0.34%和0.95%。稳定性考察结果表明,纳米粒胶体溶液在9 d内以4℃储存物理性质稳定,以6%葡萄糖为保护剂制得的冻干制剂效果较好,复溶迅速,再分散后的平均粒径为(161.8±4.8)nm,PDI为0.263±0.047。体外释放研究表明载药纳米粒冻干粉溶解度和溶出度显著提高。结论Box-Behnken效应面法所建立的模型能较好的用于Emo/HP-β-CD-Ber-CS NPs制剂的处方优化,精度高,预测效果较好,且Emo/HP-β-CD-Ber-CS NPs制备工艺稳定可行。     

以茶皂素为天然乳化剂制备水飞蓟素纳米乳及其理化性质考察

目的 以茶皂素为天然乳化剂制备水飞蓟素纳米乳（silymarin nanoemulsion,SM-NE）。方法 使用高速剪切联合高压均质法制备SM-NE,以平均粒径、粒度多分散系数（polydispersity index,PDI）、分层指数和外观为主要评价指标,采用单因素试验对处方和制备工艺进行优化;以摩尔增溶比（molar solubilization ratio,MSR）和胶束-水分配系数（K_m）作为评价指标探究了茶皂素对水飞蓟素的增溶能力;对最佳处方和工艺制备的SM-NE进行了理化性质和稳定性考察。结果 SM-NE的最佳处方为水飞蓟素用量0.15%,茶皂素用量为0.3%,油相用量为5%,最佳制备工艺为剪切速率16 000 r/min,剪切时间3 min,均质压力为100 MPa,均质次数为8次;茶皂素对水飞蓟素增溶参数值MSR和K_m分别为0.011 1和2.31;制得的SM-NE的平均粒径为（204.1±2.8）nm,PDI为0.058±0.007,电导率为（117.8±0.9）μs/cm,pH值为7.31±0.10,浊度为（59.75±1.10）cm^-1,水飞蓟素溶解度为（1.22±0.05）mg/mL;稳定性结果显示,SM-NE具有良好的离心稳定性和储存稳定性。结论 以茶皂素为天然乳化剂成功制备了稳定的SM-NE,茶皂素是一种潜在的用于水飞蓟素新型绿色纳米制剂生产的天然增溶剂。     

微型化介质研磨法制备槲皮素纳米混悬剂

采用Box-Behnken设计-效应面法优化一种微型化介质研磨法制备槲皮素纳米混悬剂(QT-NS)的工艺参数并评价所制得的QT-NS的体外累积释放度。结果显示,以最优工艺参数:氧化锆珠子4.5 m L、研磨速度690 r·min-1、研磨时间1.5 h,制得的QT-NS的粒径为(169±5)nm,多分散度指数为0.204±0.006,稳定系数为0.827±0.014,且理论预测值与实测值偏差较小,模型具有良好的预测性;在120 min体外累积释放度实验中,QT-NS明显高于原料药和物理混合物。使用该种微型化介质研磨法能成功制备QT-NS,且该方法中原料药消耗少,工艺简单、操作方便,可为纳米制剂的制备提供新的参考。     

PDCA循环管理法降低自动摆药机内药品滞销的效果评估

目的：探讨PDCA循环管理法在降低自动摆药机内药品滞销的应用及效果。方法：运用PDCA循环管理方法,调查自动摆药机内药品滞销的现状,利用鱼骨图、"80/20"法则分析导致摆药机药品滞销的原因,拟定对策,设定目标,减少摆药机内滞销药品。对实施PDCA循环管理前和实施PDCA循环管理后的摆药机内药品滞销情况进行统计分析,评价干预效果,并将干预措施标准化。结果：2020年12月—2021年5月（管理前）摆药机每月滞销品种数的平均值为22.50,每月滞销品种占比的平均值为7.93%。2021年6—11月（管理后）摆药机每月滞销品种数的平均值降至9.17,每月滞销品种占比的平均值降至3.29%,管理前后数据差异均具有统计学意义（P<0.01）,达到预期目标。结论：PDCA循环管理可有效降低自动摆药机内药品滞销,值得推广。     

DNA编码化合物库技术新进展及其在生物医药领域的应用与展望

随着医药领域对靶向调节特定生命活动过程的新分子化合物的需求日益增加,高效、低成本地发现亲和配体分子的新型小分子药物筛选技术——DNA编码的化合物库(DNA encoded compound library,DEL)筛选技术应运而生。DEL作为组合化合物库,可以是简单小分子化合物的集合,也可以是具有高级空间结构的复杂小分子库,每个化合物都以共价方式与特异的DNA序列偶联,因而可将库中所有化合物与靶标蛋白进行合并筛选,随后使用高通量测序对DNA编码序列进行测序来鉴定结合的配体分子。近年来,应用DEL技术筛选开发候选药物的例子已越来越多地被报道,本文回顾和总结了DEL技术的实施流程,特别是DEL库构建和亲和筛选方法的最新研究进展,展示了利用DEL技术筛选开发的最新亲和配体分子,并对DEL技术在生命科学领域的应用前景作了展望。     

人肝再生增强因子真核表达及其对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的：构建人肝再生增强因子（human augmenter of liver regeneration,hALR）15kD亚型的真核表达系统,并探索ALR对顺铂（Cisplatin,DDP）诱导的人肝癌细胞株QGY凋亡的影响。方法：用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）方法和基因重组技术,从重组质粒pPIC9K-rhALR中扩增出编码rhALR基因片段,将其克隆入pPICZαA质粒中构建重组质粒pPICZα－A-rhALR。重组质粒SacⅠ酶切线性化后电转入酵母GS115中,并在1%的甲醇诱导下表达。表达上清蛋白经Western blot（ALR多克隆抗体和His-tag标签抗体）鉴定和镍柱亲和层析纯化。MTS试剂检测rhALR体外对人肝癌细胞（HepG2、QGY）的促增殖活性,及流式细胞仪检测rhALR在顺铂诱导QGY细胞凋亡中的抗凋亡作用。结果：PCR、双酶切、DNA测序均鉴定重组质粒构建与预期一致。分泌表达的rhALR约占上清总蛋白的70%,目的分子量约17 kD,Western blot均可见单一条带。纯化后的rhALR对HepG2和QGY的体外促增殖作用呈浓度依赖性增强（HepG2组：F=246.729,P=0.000;QGY组：F=246.004,P=0.000）,且在QGY细胞顺铂诱导凋亡时也发挥着浓度梯度式抗凋亡作用（F=101.061,P=0.000）。结论：成功构建高效分泌表达rhALR的pPICZα－A-rhALR GS115真核表达系统;体外实验证实rhALR对顺铂诱导人肝癌细胞有呈浓度依赖性的抗凋亡作用。     

自乳化系统联合液固压缩技术运用于难溶性药物的初探

近年来,许多新技术、新方法运用于难溶性药物的增溶,但在实际应用中会遇到一定的局限性。本文通过查阅国内外文献,介绍自乳化系统和液固压缩技术及各自的的优缺点,探讨将自乳化系统和液固压缩技术结合,既发挥两项技术的优势,又起到互补作用,并形成一套完备的工艺体系,为增溶技术提供了新思路。     

柴胡疏肝散加减与氟哌噻吨美利曲辛片治疗肝郁气滞型功能性消化不良的效果

目的探究肝郁气滞型功能性消化不良患者接受柴胡疏肝散加减与氟哌噻吨美利曲辛片联合治疗的价值。方法选取2016年1月—2017年1月肝郁气滞型功能性消化不良患者40例作为研究对象,按照治疗措施差异分组,对照组经氟哌噻吨美利曲辛片治疗,实验组经柴胡疏肝散加减与氟哌噻吨美利曲辛片联合治疗,对比两组消化不良患者的疗效和复发情况。结果实验组肝郁气滞型功能性消化不良患者治疗总有效率高于对照组,同时其疾病复发率低于对照组(P0.05)。结论肝郁气滞型功能性消化不良患者接受柴胡疏肝散加减与氟哌噻吨美利曲辛片联合治疗,疗效显著。