基于化学模式识别技术提升参威骨痹片的质量标准并监测其生产中质控指标的转移率变化

目的:提升参威骨痹片的质量标准,初步探索其质量控制指标成分在批间含量差异较大的原因。方法:采用HPLC建立参威骨痹片的指纹图谱,以Diamonsil C18(4. 6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相乙腈(A)-0. 1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,10%A;5～15 min,10%～12%A;15～30 min,12%～26%A;30～43 min,26%～31%A,43～50 min,31%～40%A,50～70 min,40%～55%A;70～84 min,55%～72. 5%A),检测波长230 nm。以共有峰为自变量绘制正交偏最小二乘法-判别分析-变量重要性投影(OPLS-DA-VIP)图,将共有峰对该制剂各批次间指纹图谱差异的贡献度量化,寻找差异较大的色谱峰,结合相关文献,筛选出与参威骨痹片临床适应症相关的成分并进行其含量测定的专属性试验,最终选定质控指标。通过HPLC-二极管阵列检测器(DAD)同时对本品及其生产过程中间体中质控指标进行测定,检测波长236,276,230,322 nm,其他条件同HPLC指纹图谱检测方法。结果:HPLC指纹图谱共标定了26个共有峰,各批次样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均≥0. 950。优选出马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、蛇床子素为参威骨痹片的质控指标,四者的平均质量分数分别为161. 02,401. 80,255. 54,80. 68μg·g-1。结论:所建立的指纹图谱及多指标定量分析方法稳定、可靠,可用于参威骨痹片的质量控制。原料药批间质控指标成分含量差异和生产过程中间体的质控方法不够完善是引起该制剂批间质控指标成分含量差异较大的主要原因。     

龙血竭总黄酮纯化工艺研究

目的建立龙血竭总黄酮的纯化工艺。方法以龙血素A、龙血素B的吸附率和解吸率为评价指标,采用大孔树脂纯化龙血竭总黄酮,确定最佳纯化工艺。结果大孔树脂纯化龙血竭总黄酮的最佳工艺为:选择D101大孔树脂,用0.3%NaOH溶液溶解龙血竭乙酸乙酯提取物,上样质量浓度为12 mg/mL,上样量为2 BV,上样体积流量为1.0 BV/h,依次用纯化水洗脱杂质至流出液呈中性为止,再用80%乙醇5 BV洗脱。得到的龙血竭总黄酮含量以龙血素A和龙血素B计,比药材中含量提高了3倍。结论 D101大孔树脂可用于龙血竭总黄酮的纯化,该工艺稳定可靠。     

Box-Behnken设计优化甘葛护肝胶囊醇水双提工艺

目的优选甘葛护肝胶囊的提取工艺。方法依据单因素试验结果,采用Box-Behnken设计,以木香烃内酯(Costunolide,CLD)、去氢木香内酯(Dehydrocostuslactione,DYDL)的转移率和醇提浸膏得率为醇提综合指标(Y1),优选最佳醇提工艺。以葛根素的转移率和水提浸膏得率为水提综合指标(Y2)优选最佳水提工艺,并对工艺进行验证。结果醇提最佳条件为乙醇体积分数85.77%,提取时间107.56 min,提取次数2.61次,料液比1∶15.87(g:ml),验证试验中Y1均值为101.93分(RSD=2.89%,n=3),与预测值104.71分相比较,相对误差为2.65%。水提最佳条件为提取次数2.82次,料液比1∶10.97(g:ml),提取时间100.03 min,验证试验中Y2均值为96.42分(RSD=2.42%,n=3),与预测值98.01分相比较,相对误差为1.62%。结论所优选甘葛护肝胶囊提取工艺稳定可行。     

十二烷基硫酸钠强化柴胡皂苷的提取工艺

目的筛选出对柴胡提取过程具有较好强化作用的表面活性剂,并采用响应面法优选柴胡的提取工艺。方法以柴胡皂苷a、d总含量为评价指标,考察3种表面活性剂在柴胡提取中对柴胡皂苷a、d总含量的影响。通过单因素试验对表面活性剂浓度、加液量、提取时间、提取次数4个自变量的水平进行考察,以柴胡皂苷a、d总含量为响应值,采用响应面法优化柴胡提取工艺。结果采用响应面法,通过Design-Expert 8.0.6软件预测分析得到最佳提取工艺条件,并进行实验验证,筛选出十二烷基硫酸钠(SDS)为最佳表面活性剂;柴胡的最优提取条件为加液量10.16倍,SDS浓度为1.28%,回流提取2.5次,每次52.09 min。结论 SDS对水提取柴胡中柴胡皂苷的提取有明显强化作用,优选的柴胡皂苷提取工艺稳定可行。     

七龙天胶囊HPLC指纹图谱研究及4种成分的含量测定

目的:建立七龙天胶囊HPLC指纹图谱分析方法,并同时测定红景天苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量。方法:Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);乙腈-水溶液梯度洗脱;检测波长:203nm;流速:1mL/min;进样量:10μL;温度:25℃。结果:15批七龙天胶囊的HPLC图谱有11个共有峰,相似度均>0.9,通过与混合对照品比对,指认出4种化学成分:红景天苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1。4种成分分别在46.2~595.3、55.7~717.1、46.9~604.0、76.7~845.7μg/mL内呈良好的线性关系,平均回收率在99.53%~100.38%。结论:该方法稳定可行,可用于七龙天胶囊的质量控制。     

层次分析-熵权法联合响应面法优选参威骨痹片的提取工艺

目的 确定指标权重，优选参威骨痹片的提取工艺。方法 以加水量、提取时间和提取次数为自变量，以干膏得率、芍药苷转移率和龙胆苦苷转移率的综合评分为响应值，用层次分析法(Analytic Hierarchy Process, AHP)和信息熵权重法(Entropy Weight Method, EWM)综合加权确定各指标权重系数，联合Box-Behnken响应曲面法确定最佳提取工艺。结果 干膏得率、芍药苷转移率和龙胆苦苷转移率权重系数分别为12.49%、64.72%、22.79%;参威骨痹片的最佳提取工艺为：加10倍量水，提取3次，每次2 h, 3批验证实验综合评分均值为99.42,RSD为0.42%,综合评分接近预测值。结论 AHP-EWM法可用于参威骨痹片提取工艺多指标权重的计算，且权重系数更加科学、合理、全面；优选得到的工艺稳定可行，重复性和可操作性好，可用于参威骨痹片的生产提取。