亚麻子水提液对DPP-4及α-葡萄糖苷酶活性抑制实验研究

目的通过观察亚麻子水提液对二肽基肽酶-4（DPP-4）、α-葡萄糖苷酶抑制作用,为该药防治糖尿病提供实验依据。方法①以DPP-4酶、缓冲液、底物建立DPP-4抑制剂的体外筛选体系,对亚麻子水提液进行抑制实验,采用发色底物法测定吸光度（OD）,计算DPP-4抑制率及IC50值;②以蔗糖为底物建立α-葡萄糖苷酶活性抑制模型,采用葡萄糖氧化酶法测定亚麻子水提液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,计算其抑制率和IC50值。结果①亚麻子具有轻度DPP-4抑制作用,其IC50值738.20mg/L;②亚麻子具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,其IC50值为365.9mg/mL。结论亚麻子水提液可一定程度地抑制DPP-4及α-葡萄糖苷酶活性。     

金匮温经汤对围绝经期大鼠卵巢凋亡因子Caspase3、Caspase9、Apaf-1蛋白表达的影响

目的:观察金匮温经汤对围绝经期大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及卵巢凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase9、Apaf-1达的影响,从细胞凋亡角度探讨金匮温经汤治疗围绝经期综合征的作用靶点。方法:12月龄SD雌性清洁级大鼠,采用阴道脱落细胞涂片法选取40只围绝经期模型大鼠,随机数字表法分为模型组,中药组(各20只),对照组为20只3月龄SD雌性大鼠。中药组给予金匮温经汤8. 31 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,模型组、对照组均给予同体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续28 d。处死大鼠,采用放免法观察大鼠血清E2、FSH、LH的水平;取卵巢,采用Western Blot检测凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase9、Apaf-1表达。结果:模型组,血清E2水平低于对照组(P 0. 05),FSH、LH高于对照组(P 0. 05);卵巢Caspase3、Caspase9、Apaf-1蛋白表达均高于对照组(P 0. 05)。中药组,血清E2水平高于模型组(P 0. 05),FSH、LH低于模型组(P 0. 05);卵巢Caspase3、Caspase9、Apaf-1蛋白表达下调,均低于模型组(P 0. 05)。结论:金匮温经汤通过下调卵巢凋亡因子Caspase3、Caspase9、Apaf-1蛋白表达,以此改善生殖内分泌水平,治疗围绝经期综合征。     

基于网络药理学和分子对接探讨菟丝子治疗胰岛素抵抗的作用机制

目的 基于网络药理学和分子对接探讨菟丝子治疗胰岛素抵抗(IR)的分子机制。方法 运用中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库,筛选菟丝子的化合物和有效靶点;使用GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库预测IR的相关靶点,并利用Uniprot数据库转换成相应的基因名称;选取Cytoscape软件构建菟丝子—活性成分—靶点网络关系图、String数据库构建靶点蛋白质—蛋白质相互作用(PPI)网络;利用David数据库进行GO生物学功能富集分析和KEGG通路富集分析,并绘制柱状图和气泡图;使用Autodocktools软件对活性成分与核心靶点进行分子对接分析。结果 获得菟丝子的关键化合物10个、药物靶点207个、疾病靶点1 279个、交集靶点122个,得到JUN、AKT1、TP53、RELA、MAPK1和TNF 6个PPI网络核心分子,网络药理学结果提示菟丝子可能通过TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路和FoxO信号通路等121条信号通路参与调控IR。分子对接结果显示,菟丝子中活性成分槲皮素、苦参碱、β-谷甾醇与核心靶点JUN、TP53、MAPK1和RELA间存在结合位点。...     

滋肾清肝方治疗2型糖尿病40例

目的:观察滋肾清肝方治疗2型糖尿病的临床疗效。方法:将81例2型糖尿病患者随机分为对照组41例和观察组40例,2组均给予2型糖尿病常规治疗,对照组服用盐酸二甲双胍1 000 mg/d。观察组服用滋肾清肝方,按80 g生药/d服用。2组均连续治疗8周。观察2组治疗前后空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)、糖化血红蛋白(Hb Alc)、曲线下面积(AUC)及胰岛素抵抗指数(Homa-IR)的变化情况。结果 :FBG、PBG、Hb Alc、AUC及Homa-IR指数治疗前后同组组内比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗后组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。总有效率观察组为82.50%,对照组为65.85%,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗期间2组均未出现不良反应。结论:滋肾清肝方具有较好的调节2型糖尿病患者糖代谢作用,可改善胰岛素抵抗。     

金匮温经汤对虚寒证原发性痛经患者微炎症状态的影响

目的探讨金匮温经汤对虚寒证原发性痛经患者血清炎症因子的影响,完善金匮温经汤治疗本病的的作用机制。方法收集45例虚寒证原发性痛经患者,给予金匮温经汤连续治疗3个月经周期;45例正常女性作为对照组。比较治疗前后,痛经患者血清炎症相关因子高敏C反应蛋白（Hs-CRP）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、高迁移率族蛋白1（HMGB1）的变化。结果痛经组治疗前,血清Hs-CRP、IL-6、TNF-α、MCP-1和HMGB1均显著升高,与正常组比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。治疗后上述指标均有不同程度降低,与治疗前比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;且治疗后IL-6、MCP-1和HMGB1,与正常组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗后Hs-CRP和TNF-α,与正常组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论虚寒证原发性痛经患者存在微炎症状态,金匮温经汤能够减轻机体的微炎症反应程度,有效治疗虚寒证原发性痛经。     

中药复方及有效成分对骨骼肌胰岛素抵抗PI3K/AKT通路的影响

2型糖尿病(T2DM)是一种多基因遗传的代谢性疾病,其主要病、生理特征为胰岛素抵抗(IR),而骨骼肌是IR的主要靶器官。骨骼肌胰岛素抵抗的发生发展机制与PI3K/AKT信号转导通路有着密切的关系。临床及实验研究显示,中药复方及中药有效成分可改善骨骼肌IR,防治T2DM。因此,本文就近年来中药复方和中药有效成分通过PI3K/AKT信号通路改善T2DM的骨骼肌IR的机制进行综述。     

双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌及HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的:研究双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量及人肝癌HepG2细胞糖原合成,己糖激酶(hexokinase,HK),丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性的影响,初步探讨其作用机制,为其临床应用奠定基础。方法:采用高胰岛素方法建立骨骼肌细胞的胰岛素抵抗(IR)模型,观察双益方低、中、高剂量组、组方中药(黄芪、山茱萸、黄连、桑白皮、葛根、佩兰),有效成分(黄芪甲苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,熊果酸,马钱苷,小檗碱,1-脱氧野尻霉素,葛根素)组(30,120,480μg·L-1)对骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量的影响,蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定骨骼肌细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(protein tyrosine phosphatase-1B,PTP-1B),葡萄糖转运蛋白4(glucosetransporters 4,GLUT4)表达;建立HepG2细胞的胰岛素抵抗模型,研究双益方、组方中药及其有效成分对HepG2细胞糖原合成及己糖激酶、丙酮酸激酶活性的影响。结果:双益方,黄芪,山茱萸,黄芪甲苷,1-脱氧野尻霉素,葛根素可降低骨骼肌细胞细胞上清液葡萄糖浓度(P0.05),以480μg·L-1双益方,黄芪甲苷组及葛根素组效果较好;与模型组比较,双益方、黄芪及有效成分组方可降低PTP-1B,提高GLUT-4的表达(P0.05,P0.01)。与正常组比较,模型组糖原合成量及HK,PK活性显著降低(P0.01);与模型组比较,各浓度组单味中药及有效成分均能一定程度的增加糖原合成量及HK,PK活性(P0.05,P0.01),其中黄芪甲苷、黄芪提取液增加糖原合成及提高HK活性作用较好;双益方提取液及葛根素增加PK活性作用较好。结论:双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌,HepG2细胞胰岛素抵抗具有一定缓解作用,降低PTP-1B表达、提高GLUT4表达、增加糖原合成、提高HK,PK活性可能是其作用机制。     

金匮温经汤对妇科虚寒证模型大鼠子宫、卵巢GRP78、 Nrf-2表达的影响

目的:观察金匮温经汤对妇科虚寒证模型大鼠子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达的影响。方法:120只3月龄SD雌性清洁级大鼠,随机数字表法分为4组,对照组、模型组、温经汤高、低剂量组(各30只)。模型组、温经汤高、低剂量组采用延长冰箱冷冻加冰水浸泡时间的方法造模,同时温经汤高、低剂量组给予金匮温经汤灌胃,对照组、模型组给予同体积蒸馏水灌胃,连续30 d。处死大鼠,取子宫、卵巢,采用免疫组织化学染色和Western blot检测GRP78、Nrf-2的表达。结果:模型组子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达低于对照组(P0.05),高、低剂量组子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达高于模型组(P0.05),其中高剂量组升高更为显著,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:金匮温经汤通过上调子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达,拮抗内质网应激,缓解氧化损伤,恢复改善靶器官功能,治疗妇科虚寒证。     

虚寒证原发性痛经患者血清氧化应激的变化及金匮温经汤的干预机制

目的探讨虚寒证原发性痛经患者血清氧化应激指标的变化,完善金匮温经汤治疗本病的作用机制。方法收集60例虚寒证原发性痛经患者,给予金匮温经汤连续治疗3个月经周期;60例正常女性作为对照组,比较治疗前后痛经患者血清生殖激素（FSH、LH、E2、P、T）及氧化应激指标（SOD、MDA、GSH-PX、T-AOC）的变化。结果痛经组患者治疗前,血清E2、SOD活性、GSH-PX和T-AOC均显著降低,MDA升高,与正常组比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;治疗后,血清E2、SOD活性、GSH-PX和T-AOC均有不同程度升高,MDA降低,与治疗前比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,且治疗后E2、SOD活性、MDA与正常组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论虚寒证原发性痛经患者存在氧化应激损伤;金匮温经汤能够通过激活机体抗氧化能力缓解机体氧化损伤状态,有效治疗虚寒证原发性痛经。     

明月草水提液抑制DPP-4及α-葡萄糖苷酶活性的实验研究

目的:通过观察明月草水提液对DPP-4、α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为该药防治糖尿病提供实验依据。方法:以DPP-4酶、缓冲液、底物建立DPP-4抑制剂的体外筛选体系,对明月草水提液进行抑制实验,采用发色底物法测定吸光度(OD),计算DPP-4抑制率及IC50值。以蔗糖为底物建立α-葡萄糖苷酶活性抑制模型,采用葡萄糖氧化酶法测定明月草水提液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,计算其抑制率和IC50值。结果:明月草具有轻度DPP-4抑制作用,其IC50值为1199.97mg/L。明月草具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,其IC50值为64.12mg/L。结论:明月草水提液可一定程度地抑制DPP-4及α-葡萄糖苷酶活性。