依达拉奉对硝普钠诱导PC12细胞氧化应激的保护作用

目的研究依达拉奉对硝普钠诱导PC12细胞损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法以500μmol.L-1硝普钠诱导PC12细胞氧化应激损伤,MTT法测定细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹检测Bax和Bcl-2表达变化。结果依达拉奉在25μmol.L-1能增加氧化应激损伤细胞活力,在75μmol.L-1其保护作用达到峰值,能明显改善细胞形态结构,减少早期凋亡细胞数目,升高细胞Bcl-2/Bax比值。结论依达拉奉对硝普钠诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,其机制可能与依达拉奉清除NO,抑制线粒体凋亡通路有关。     

黄芪甲苷对免疫低下糖尿病大鼠的影响

目的:研究黄芪甲苷对免疫低下糖尿病大鼠的影响.方法:SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素1次,环磷酰胺3次,造成免疫低下糖尿病模型动物,持续给药4周后,腹主动脉取血,分离血清,测定血糖、血常规、IgG、IL-2、INS水平,并进行胰腺组织形态学观察及胰岛素样生长因子(IGF)的检测.结果:免疫低下糖尿病动物模型造模成功,黄芪甲苷各剂量组的各项指标均有所改善.结论:黄芪甲苷可以使模型动物血糖降低,免疫力增强,是黄芪功效发挥的重要成分之一.     

一测多评法同时测定扶正固本颗粒中6种成分的含量

目的:建立扶正固本颗粒中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等6种成分含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为275 nm(0~8 min)、320 nm(8~9 min)和275 nm(9~33 min),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。以黄芩苷为基准物,采用多点校正法和斜率校正法分别计算另外5种成分的相对校正因子(fk/s),并采用保留时间差值法对待测成分进行色谱峰定位,比较上述两种一测多评法所得计算值与外标法实测值的差异。结果:2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素检测进样量的线性范围分别为0.053~2.12、0.163~6.52、0.059~2.36、0.021 6~0.864、0.03~1.2、0.021~0.84μg(r>0.999),精密度、稳定性(12 h)、重复性试验的RSD均小于3%;平均加样回收率为98.72%~99.82%(RSD为0.89%~1.24%,n=9)。以黄芩苷为基准物,2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素多点校正法的f_k/s分别为1.172、0.528、1.479、1.820、2.534,斜率校正法的f_k/s分别为1.234、0.550、1.559、1.939、2.664;3种方法测得10批扶正固本颗粒中6种成分含量的RSD为0.29%~2.77%(n=10);两种一测多评法测得结果与外标法的Pearson相关系数均不低于0.999 9(P<0.001)。结论:成功建立了可用于同时测定扶正固本颗粒中6种成分含量的一测多评法。     

胡黄连葫芦烷型四环三萜类化合物及其生物活性的研究进展

胡黄连Picrorhizae Rhizoma为中医临床清虚热要药,目前一般认为其功效与环烯醚萜类、苯乙醇糖苷类和酚苷类化合物相关,而对于胡黄连所含葫芦烷型四环三萜类化合物及其生物活性关注较少。研究表明含有α,β-不饱和酮结构的葫芦烷型四环三萜属于迈克尔反应受体小分子,具有抗肿瘤等重要药理活性。对胡黄连中的葫芦烷型四环三萜类化合物进行综述,一方面比较了2种基原胡黄连所含葫芦烷型四环三萜类化合物的差异,另一方面对此类化合物的生物活性研究进行总结,为深入探索胡黄连功效的物质基础提供参考。     

西藏胡黄连中1个新的葫芦烷型糖苷化合物

采用柱色谱方法对西藏胡黄连Picrorhiza scrophulariiflora乙醇提取物进行提取分离,并通过HR-MS、1D和2D NMR等技术鉴定结构,同时采用CCK-8法检测细胞毒性。结果分离得到4个葫芦烷型糖苷,分别为2β-D-葡萄糖氧基-3β,16α,20β-三羟基-9-甲基-19-去甲羊毛甾-5,25-二烯-22-酮(1)、2β-D-葡萄糖氧基-3β,16α,20β-三羟基-9-甲基-19-去甲羊毛甾-5,24-二烯-22-酮(2)、25-乙酰氧基-2β-葡萄糖氧基-3β,16α,20β-三羟基-9-甲基-19-去甲羊毛甾-5-烯-22-酮(3)、25-乙酰氧基-2β-葡萄糖氧基-3β,16α,20β-三羟基-9-甲基-19-去甲羊毛甾-5,23-(E)-二烯-22-酮(4),其中化合物1为1个新的葫芦烷型糖苷。对4种肿瘤细胞的半数抑制浓度均大于100μmol·L^-1,表明这4个化合物无明显细胞毒作用。     

探讨蛇床子催眠活性组分对PCPA失眠大鼠褪黑素合成限速酶AANAT的调控作用

目的 观察蛇床子催眠活性组分（CHC）对对氯苯丙氨酸（PCPA）失眠大鼠行为学、褪黑素（MT）合成限速酶芳基烷基胺N-乙酰基转移酶（AANAT）的影响，探讨其对松果体的保护机制。方法 60只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常、模型，MT阳性药，CHC高、中、低剂量6组，每组10只。除正常组其余各组腹腔注射4.5%PCPA混悬液，10 mL·kg^-1，连续2 d，建立大鼠PCPA失眠模型。造模后正常及模型组灌胃等体积2%聚山梨酯-80，MT组（10 mg·kg^-1），CHC高、中、低（60，30，15 mg·kg^-1）给予10 mL·kg^-1给药体积的药物，每日1次，连续7 d。给药4 d后分别进行旷场活动、高架十字迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠试验，采用酶联免疫吸附法检测血清MT；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定松果体MT合成关键酶AANAT mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测松果体AANAT蛋白表达变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠旷场活动总距离、站立次数、中心区持续时间明显增加（P<0.05，P<0.01），高架开臂次数及时间比例下降（P<0.05），入睡潜伏期显著延长（P<0.01）；与模型组比较，低剂量组无明显差异，其余各组大鼠活动总距离均减少（P<0.05，P<0.01），高架开臂次数百分比升高（P<0.05），入睡潜伏期缩短、睡眠时间明显延长（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组MT含量显著下降（P<0.01）；与模型组比较，低剂量组差异无明显统计学意义，其余各组血清MT不同程度的升高（P<0.05）。与正常组比较，模型组AANAT mRNA表达量，AANAT蛋白表达量下降（P<0.01）；与模型组比较，MT组，CHC高剂量组表达量明显增加（P<0.05）。结论 CHC改善PCPA失眠行为学指标、增加松果体细胞合成分泌MT，提高血清MT水平，与上调松果体AANAT mRNA及其蛋白的表达有关。     

决明子降脂保肝胶囊的CO2超临界萃取工艺研究

目的研究CO2超临界萃取决明子降脂保肝胶囊中有效成分之一的蒽醌类化学物质的最佳工艺条件,考察各工艺参数对蒽醌类化学物质的影响。方法以决明子降脂保肝胶囊中蒽醌类化学物质的含量为主要指标,采用L（3）4正交设计优选CO2超临界萃取的蒽醌类化学物质最佳工艺条件。结果CO2超临界萃取温度、萃取压力及萃取次数均对蒽醌类化学物质有较大影响,以萃取温度为60℃,萃取压力为60mPa,萃取2次,每次1.5h时,蒽醌类化学物质的萃取最佳。结论CO2超临界萃取可用于决明子降脂保肝胶囊的生产,且工艺条件简单、稳定、可行。     

扶正固本颗粒HPLC指纹图谱建立

目的建立扶正固本颗粒(黄芩、淫羊藿、女贞子等)HPLC指纹图谱。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Diamonsil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇?0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长250、260、275、285、320 nm;柱温25℃。结果10批样品HPLC指纹图谱中有36个共有峰,相似度均大于0.99,并确定了其中8种成分(2,3,5,4′?四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、淫羊藿苷、汉黄芩素、宝藿苷I、大黄素)的结构。结论该方法分离度、精密度、稳定性、重复性良好,可用于扶正固本颗粒的质量控制。     

黄芩苷对鱼藤酮致PC12细胞损伤的保护作用研究

目的:探讨黄芩苷对鱼藤酮致PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法:建立鱼藤酮损伤PC12细胞模型,采用终浓度分别为0.1,1,10μmol·L-1的黄芩苷进行药物干预;四氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,并用显微镜观察细胞形态;应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;采用荧光探针二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)测定细胞内氧自由基(ROS);采用蛋白免疫印记法检测凋亡信号蛋白Bcl-2,Bax及Caspase-3表达。结果:PC12细胞经1.5μmol·L-1鱼藤酮孵育24 h后细胞活力显著降低,黄芩苷对鱼藤酮所致的细胞损伤呈现剂量依赖性的保护作用;流式细胞术分析表明黄芩苷可明显减少鱼藤酮致PC12细胞凋亡比例;荧光显微镜观察发现黄芩苷能明显减少鱼藤酮损伤PC12细胞ROS含量,免疫印迹实验表明黄芩苷可上调模型细胞Bcl-2及下调Bax表达并减少活化Caspase-3含量。结论:黄芩苷对鱼藤酮诱导的PC12损伤具有保护作用活性,其机制可能与黄芩苷减少鱼藤酮诱导PC12细胞ROS含量,抑制线粒体凋亡通路有关。     

蛇床子素对佐剂性大鼠关节炎模型治疗作用研究

目的:探讨蛇床子素对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用,并对其作用机理进行初步研究。方法:采用弗氏完全佐剂诱导大鼠关节炎模型,测量大鼠左后足体积,检测血清TNF-α和IL-10水平,观察大鼠关节滑膜病理改变,对外周血进行T淋巴亚群分析。结果:与模型组比较,蛇床子素高剂量组大鼠左后足体积显著降低(P0.05);蛇床子素治疗组CD4+/CD8+升高,继发侧关节滑膜表面光滑,血清中炎症相关因子TNF-α和IL-10水平降低(P0.05,P0.01)。结论:蛇床子素具有改善佐剂性关节炎的作用,这可能与其具有抗炎作用相关,为研究与开发治疗类风湿性关节炎的药物提供一定的参考。