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1.
目的 优选不同辅料膏方制备工艺的最佳条件参数.方法 以膏方的性状特征、成膏率及药材检出情况为控制指标,采用多指标综合评分法评价膏方成型性;以辅料的使用量(A)、清膏(B)和成品膏(C)的相对密度为3个因素,采用星点设计进行试验,优选膏方制备工艺.结果 4种不同辅料膏方的制备工艺分别为红糖:A1 18%~23%、B1 1.210~1.260、C1 1.310~1.360;鹿角胶:A2 14%~16%、B2 1.200~1.250、C2 1.230~1.270;龟甲胶:A3 12%~15%、B3 1.190~1.230、C3 1.210~1.240;阿胶:A4 5.0%~8.0%、B4 1.190~1.220、C4 1.190~1.220.结论 优选的不同辅料的膏方制备工艺参数均准确可行,质量符合要求. 相似文献
2.
目的观察蛇床子催眠活性组分(SCZ)对失眠大鼠海马神经递质及钟基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法采用ip对氯苯丙氨酸(PCPA)建立大鼠失眠模型,ig给予低(25 g/kg)、中(50 g/kg)、高(100 g/kg)剂量SCZ,并设阳性对照(地西泮)组,给药3 d,免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)受体蛋白的表达;高效液相色谱法和免疫组化法检测大鼠海马GABA和Glu含量的变化;实时荧光定量PCR检测大鼠海马Clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3等生物钟基因的表达水平。结果免疫组化结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著升高,Glu表达水平显著降低(P0.01)。HPLC结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马组织Glu表达水平显著降低(P0.05),SCZ高、低剂量组大鼠GABA表达水平显著升高(P0.01)。生物钟基因表达水平检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著升高(P0.05),Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组比较,SCZ中剂量组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著降低(P0.01);SCZ高剂量组大鼠Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著增高(P0.05、0.01),SCZ低剂量组大鼠Per1基因表达水平显著增高(P0.01)。结论蛇床子催眠活性组分通过降低海马Clock、Bmal1表达,提高Cry1、Per1、Per2基因的表达水平,增加抑制性、减少兴奋性氨基酸类神经递质的表达,从而调节睡眠-觉醒周期,达到治疗失眠的效果。 相似文献
3.
目的:建立扶正固本颗粒中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等6种成分含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为275 nm(0~8 min)、320 nm(8~9 min)和275 nm(9~33 min),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。以黄芩苷为基准物,采用多点校正法和斜率校正法分别计算另外5种成分的相对校正因子(fk/s),并采用保留时间差值法对待测成分进行色谱峰定位,比较上述两种一测多评法所得计算值与外标法实测值的差异。结果:2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素检测进样量的线性范围分别为0.053~2.12、0.163~6.52、0.059~2.36、0.021 6~0.864、0.03~1.2、0.021~0.84μg(r>0.999),精密度、稳定性(12 h)、重复性试验的RSD均小于3%;平均加样回收率为98.72%~99.82%(RSD为0.89%~1.24%,n=9)。以黄芩苷为基准物,2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素多点校正法的fk/s分别为1.172、0.528、1.479、1.820、2.534,斜率校正法的fk/s分别为1.234、0.550、1.559、1.939、2.664;3种方法测得10批扶正固本颗粒中6种成分含量的RSD为0.29%~2.77%(n=10);两种一测多评法测得结果与外标法的Pearson相关系数均不低于0.999 9(P<0.001)。结论:成功建立了可用于同时测定扶正固本颗粒中6种成分含量的一测多评法。 相似文献
4.
目的 采用DNA条形码分子鉴定技术鉴定藏柴胡(又名窄竹叶柴胡)Bupleurum marginatum及其易混品,以确保柴胡药材质量及临床用药安全。方法 收集柴胡药材共50份,对其ITS2序列进行PCR扩增并双向测序,所得序列用CodonCode Aligner软件校对拼接后,利用MEGA 6.0对序列进行分析比对,计算种内、种间遗传距离,利用邻接法(NJ)构建系统聚类树,并应用ITS2数据库网站预测其ITS2二级结构。结果 藏柴胡种内遗传距离明显小于它与其同属的种间遗传距离,基于ITS2建立的NJ树和网站预测的ITS2二级结构,均能准确将藏柴胡药材与其易混药材区分。结论 基于ITS2序列可以科学准确地鉴别藏柴胡药材及其易混品,为确保临床用药安全提供更多先进可靠的技术手段。 相似文献
5.
目的:观察异虎耳草素对原代海马神经元细胞γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)含量及受体基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯度并给药。分为空白组,地西泮组(25 mg·L~(-1)),异虎耳草素低、中、高剂量组(5,10,20 mg·L~(-1)),共5组,给药24 h后流式细胞术检测海马神经元细胞早期凋亡率,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液GABA,5-HT含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内γ-氨基丁酸A型受体(GABAA)基因GABRA_1,GABRA_5,GABRB_2,γ-氨基丁酸B型受体(GABAB)基因GABBR1,5-羟色胺1A型受体(5-HT1_A)基因5-HT1_(A(A)),5-HT1_(A(B)),5-HT1_(A(C))表达的变化。结果:第7天海马神经元细胞生长状态良好,鉴定纯度 90%;与空白组比较,海马神经元细胞早期凋亡率异虎耳草素中、高剂量组显著降低(P 0. 01),GABA含量异虎耳草素高剂量组显著升高(P 0. 01),GABRA_1,GABRA_5,5-HT1_(A(A)),5-HT1_(A(C))mRNA表达异虎耳草素中、高剂量组显著升高(P 0. 05,P 0. 01),GABBR_1,5-HT1_(A(B))mRNA表达异虎耳草素各组均显著升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:异虎耳草素催眠作用机制可能与抑制海马神经元细胞凋亡,升高抑制性神经递质GABA含量,上调GABA与5-HT相关受体基因表达有关。 相似文献
6.
谱效关系分析蛇床子镇静催眠的活性物质 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:利用指纹图谱与药效相关性分析,研究蛇床子镇静催眠活性目标化合物。方法:采用高效液相色谱法,固定相为EliteSinoChromODS—BP5μm(4.6mm×250mm),流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液;梯度洗脱程序为:0~15min乙腈由23%增加到45%,15~30min乙腈由45%增加到100%,30~40min乙腈为100%;检测波长245nm(0—26min),322nm(26~30min),245nm(30~40min);柱温:40℃;建立蛇床子指纹图谱。对蛇床子采用不同极性溶剂提取,观察戊巴比妥钠持续睡眠时间,比较各提取物镇静催眠活性,并建立相应的指纹图谱。利用SPSS17.0统计分析软件计算各指纹峰峰面积与持续睡眠时间的Pearson相关系数,寻找与镇静催眠活性相关性大的指纹峰。结果:蛇床子各提取物指纹图谱中有8个共有峰,其中6#峰为欧前胡素,7#峰为蛇床子素。分析各指纹峰峰面积与镇静催眠活性相关性发现,5#峰与镇静催眠活性有显著相关性。结论:除已知具有催眠活性的蛇床子素、欧前胡素外,还发现1种镇静催眠活性目标化合物。 相似文献
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8.
星点设计-效应面法优化黄明胶-蜂蜜混合辅料膏方制备工艺 总被引:1,自引:1,他引:0
目的明确黄明胶、蜂蜜混合辅料膏方制备工艺的最佳参数。方法以润肠通便方为模型药物,以膏方的黄明胶、蜂蜜使用量以及成品膏相对密度为考察因素,膏方的成型性和指纹图谱为控制指标,运用星点设计-效应面法优化膏方制备工艺。结果膏方提取工艺:加水6倍量,浸泡0.5 h,煎煮3次,每次1 h,其中首次提取加水8倍量。膏方指纹图谱主要色谱条件:流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱:0~5 min,10%乙腈;5~15 min,10%~35%乙腈;15~30 min,35%~85%乙腈;检测波长238、280 nm。膏方指纹图谱共发现12个共有峰,指认7号峰为和厚朴酚(参比峰,S),各个共有峰相对保留时间和相对峰面积的精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于3%。膏方制备工艺为黄明胶使用量8%~12%、蜂蜜使用量22%~28%、成品膏相对密度1.20~1.25。膏方制备放大试验验证,偏差绝对值均小于3%。结论该方法可以保证膏方具有较好的成型性,以及化学成分相对较高的转移率。 相似文献
9.
目的建立扶正固本颗粒(黄芩、淫羊藿、女贞子等)HPLC指纹图谱。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇?0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长250、260、275、285、320 nm;柱温25℃。结果10批样品HPLC指纹图谱中有36个共有峰,相似度均大于0.99,并确定了其中8种成分(2,3,5,4′?四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、淫羊藿苷、汉黄芩素、宝藿苷I、大黄素)的结构。结论该方法分离度、精密度、稳定性、重复性良好,可用于扶正固本颗粒的质量控制。 相似文献
10.
目的 观察蛇床子催眠活性组分(CHC)对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠行为学、褪黑素(MT)合成限速酶芳基烷基胺N-乙酰基转移酶(AANAT)的影响,探讨其对松果体的保护机制。方法 60只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常、模型,MT阳性药,CHC高、中、低剂量6组,每组10只。除正常组其余各组腹腔注射4.5%PCPA混悬液,10 mL·kg-1,连续2 d,建立大鼠PCPA失眠模型。造模后正常及模型组灌胃等体积2%聚山梨酯-80,MT组(10 mg·kg-1),CHC高、中、低(60,30,15 mg·kg-1)给予10 mL·kg-1给药体积的药物,每日1次,连续7 d。给药4 d后分别进行旷场活动、高架十字迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠试验,采用酶联免疫吸附法检测血清MT;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定松果体MT合成关键酶AANAT mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测松果体AANAT蛋白表达变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠旷场活动总距离、站立次数、中心区持续时间明显增加(P<0.05,P<0.01),高架开臂次数及时间比例下降(P<0.05),入睡潜伏期显著延长(P<0.01);与模型组比较,低剂量组无明显差异,其余各组大鼠活动总距离均减少(P<0.05,P<0.01),高架开臂次数百分比升高(P<0.05),入睡潜伏期缩短、睡眠时间明显延长(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组MT含量显著下降(P<0.01);与模型组比较,低剂量组差异无明显统计学意义,其余各组血清MT不同程度的升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组AANAT mRNA表达量,AANAT蛋白表达量下降(P<0.01);与模型组比较,MT组,CHC高剂量组表达量明显增加(P<0.05)。结论 CHC改善PCPA失眠行为学指标、增加松果体细胞合成分泌MT,提高血清MT水平,与上调松果体AANAT mRNA及其蛋白的表达有关。 相似文献