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目的:探讨健脾消癌方对人结肠癌细胞(HCT116)来源外泌体诱导正常人胚肺成纤维细胞(HFL1)向肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)活化的影响。方法:以13.1 g·kg~(-1)的健脾消癌方灌胃SD大鼠以制备含药血清,采取超高速离心法分别提取含10%无外泌体血清培养的HCT116细胞外泌体及含20%健脾消癌方含药血清培养的HCT116细胞外泌体,纳米颗粒跟踪分析仪(Zetaview)检测外泌体的粒径分布,蛋白免疫印迹法(Western blot)鉴定外泌体的标志蛋白凋亡转接基因2互作蛋白X(Alix),热休克蛋白70(HSP70),肿瘤易感基因101蛋白(TSG101),荧光显微镜观察HFL1对细胞膜染色试剂盒(PKH67)标记的外泌体的摄取情况;将HFL1细胞分6组:空白组,转化生长因子-β1(TGF-β1)组,TGF-β1联合HCT116外泌体2 mg·L~(-1)组,TGF-β1联合HCT116外泌体4 mg·L~(-1)组,TGF-β1联合健脾消癌方外泌体2 mg·L~(-1)组,TGF-β1联合健脾消癌方外泌体4 mg·L~(-1)组,均干预48 h,Western blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白和mRNA的表达水平。结果:Zetaview检测粒径分布主要集中在50~100 nm,结合标志蛋白Alix,HSP70和TSG101的表达证实其为外泌体,HFL1细胞与外泌体共孵育后,荧光显微镜下可看到大量外泌体被HFL1细胞所摄取;与空白组比较,TGF-β1组和TGF-β1联合HCT116外泌体组的α-SMA蛋白及mRNA表达水平升高(P0.05);与TGF-β1联合HCT116外泌体组比较,TGF-β1联合健脾消癌方外泌体组的α-SMA蛋白及mRNA水平下降(P0.01)。结论:人结肠癌细胞外泌体联合TGF-β1可诱导HFL1活化成CAFs,健脾消癌方可通过影响α-SMA的表达水平而降低HFL1的活化能力从而达到拮抗结肠癌肺转移的作用。 相似文献
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蒋益兰教授认为"脾虚、瘀积、岩毒"并存是大肠癌发病的基本病机特点,瘀毒未尽合并正气不足是大肠癌术后复发转移的主要病机;强调分期论治,以健脾益气法贯穿全程;重视身心合调和内外合治;灵活应用虫类药及活血化瘀药;以自拟"健脾消癌方"应用于临床20余年,取得了较好的临床疗效。 相似文献
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目的确定半夏与其伪品水半夏的简易鉴别方法。方法利用该二药的药材性状、显微特征和薄层色谱以及药理作用加以对比。结果发现二者在性状、显微、薄层色谱的斑点数目和位置上以及药理作用上均存在较大差异。结论:该方法简便可行,可选择本方法鉴别定性。 相似文献
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目的:观察重楼皂苷Ⅰ对转录因子叉头框Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)及上皮间质转化相关因子表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法:用1.25,2.50μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ作用于结直肠癌HCT116细胞,蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测FOXQ1,E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin)蛋白和mRNA表达情况。结果:与空白组比较,1.25μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组FOXQ1蛋白和mRNA相对表达量降低,E-cadherin mRNA相对表达量升高,但差异无统计学意义;Vimentin蛋白和mRNA相对表达量降低(P<0.05);E-cadherin蛋白相对表达显著升高(P<0.01)。与空白组比较,2.50μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组中的FOXQ1,Vimentin蛋白和mRNA相对表达量降低,E-cadherin蛋白和mRNA相对表达量升高(P<0.05,P<0.01)。与1.25μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组比较,2.50μmol·L^-1重楼皂苷Ⅰ组中的Vimentin蛋白和mRNA相对表达量降低,但差异无统计学意义;E-cadherin蛋白和mRNA相对表达量升高,FOXQ1蛋白和mRNA相对表达量降低(P<0.05,P<0.01)。结论:重楼皂苷Ⅰ抑制结肠癌的转移,可能与抑制FOXQ1的表达,上调E-cadherin的表达,降低Vimentin的表达相关。 相似文献
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目的 观察健脾消癌方对Hox转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)/ 酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法 分析不同细胞株lncRNA HOTAIR的表达情况,采用10%,15%,20%健脾消癌方含药血清作用于HCT116细胞,transwell实验检测健脾消癌方对HCT116细胞的侵袭能力影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测lncRNA HOTAIR,JAK2,STAT3 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2,磷酸化STAT3(p-STAT3),STAT3蛋白表达情况。结果 结肠癌细胞株HCT116中lncRNA HOTAIR的表达水平最高,采用此细胞作为观察对象。与空白组比较,健脾消癌方各组的侵袭细胞数均降低(P<0.05,P<0.01);健脾消癌方中剂量组JAK2 mRNA相对表达水平降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的lncRNA HOTAIR,健脾消癌方高剂量组的JAK2 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,健脾消癌方中剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的JAK2蛋白,健脾消癌方高剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.01)。结论 健脾消癌方可有效抑制结肠癌细胞转移,其机制可能与抑制lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路的表达相关。 相似文献
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特发性室速致电张调整性T波改变一例误诊 总被引:3,自引:1,他引:2
电张调整性T波改变也称“T波记忆”,常在阵发性室上性或室性心动过速等情况发作过后,出现与原有异常除极的QRS波群方向相同的T波改变,常见T波倒置,类似心肌缺血。近来笔者收治1例电张调整性T波改变,酷似心内膜下心肌梗死,现报道如下。1 病例资料男,32岁。因阵发性心动过速病史3年入院待行射频消融术。3年中发生阵发性心动过速10余次,发作时脉率达160/min,经数分钟~数小时可自行缓解。曾2次发作过后入当地医院,心电图:胸前导联T波倒置,深达1.0mv,经2~3周T波恢复正常,当地诊断为心内膜下心… 相似文献
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同种异体原位心脏移植六例 总被引:1,自引:0,他引:1
目的总结6例行原位心脏移植术患者的外科治疗经验。方法采用Shumway和Stanford方法行心脏移植,供心保护采用经主动脉根部灌注4℃心脏停搏液;术后免疫抑制治疗采用环孢素A、骁悉和强的松联合治疗,根据血环孢素A浓度及心内膜活检调整环孢素A用量。结果6例患者均康复,无手术及术后死亡,术后未发生超急性或急性排斥反应。结论受者-供者选择、供心保护、吻合技术、合理应用免疫抑制剂和围术期并发症的处理是手术成功的关键。 相似文献
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目的 探讨不同分期结直肠癌患者血清外泌体中整合素α5、β5、β6的表达水平及其临床意义。方法 收集2016年1月-2020年10月就诊于湖南省中医药研究院附属医院和湖南省肿瘤医院的50例结直肠癌患者的血清标本,按照TNM分期分为结直肠癌Ⅰ期组(n=5)、Ⅱ期组(n=19)、Ⅲ期组(n=14)与Ⅳ期组(仅肝转移,n=12)。另收集2018年8月-2020年5月于湖南省中医药研究院附属医院健康管理中心体检的10名健康者的血清标本作为健康对照组。对血清标本进行外泌体提纯,运用纳米微粒追踪分析(NTA)及Western blotting鉴定外泌体;采用Western blotting检测血清外泌体中整合素α5、β5、β6的表达水平。随访追踪50例结直肠癌患者的生存期,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Cox比例风险回归模型进行生存分析。结果 50例结直肠癌患者中,男26例(52.0%),女24例(48.0%),以中老年群体为主,平均年龄58岁;TNM... 相似文献