小檗胺诱导体外培养的视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞凋亡的研究

[目的]观察探讨小檗胺(BBM)对体外培养的视网膜母细胞瘤(RB) HXO-RB44细胞增生和凋亡的影响及其机制.[方法]体外培养RB细胞,取对数生长期细胞分为BBM处理组和空白对照组.BBM处理组分别加入2、4、8、16、32 mg/L BBM,作用24、48、72 h后,四氮唑(MTT)比色法检测细胞增生活性;4、8、16 mg/L BBM作用24 h后,流式细胞仪检测细胞早期细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、Bax蛋白的表达,比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)的活性.[结果]BBM以时间-剂量依赖方式显著抑制RB细胞的增生(24 h:F=70.547,48 h:F=603.438,72 h:F=577.521;P＜0.01).作用24、48、72 h,半数抑制浓度分别为25.26、10.94、6.25 mg/L.空白对照组和不同浓度BBM处理组细胞坏死率分别为(1.25±0.45)％、(4.10±2.95)％、(4.39±0.21)％、(10.54±4.38)％,与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=6.527,P＜0.05);晚期凋亡和坏死率分别为(2.13±0.71)％、(5.45±2.31)％、(9.86±3.18)％、(11.10±1.70)％,与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=10.845,P＜0.05):早期凋亡率分别为(0.51±0.26)％、(2.68±0.35)％、(5.97±0.50)％、(11.22±1.17)％,与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=144.976,P＜0.01).BBM剂量依赖性地减少bc1-2的表达,增加Bax的表达,降低bcl-2/Bax比值,增强Caspase-3活性,差异均有统计学意义(bcl-2:F=835.726,Bax:F=111.963,Caspase-3:F=298.058;P＜0.01).[结论]BBM体外能抑制RB细胞增生并诱导细胞凋亡或坏死.其机制可能与下调bcl-2的表达,上调Bax的表达,并增强Cspase-3的活性有关.     

过敏性结膜炎药物治疗研究进展

过敏性结膜炎是一类常见的眼表过敏性疾病,其主要由Ⅰ型及Ⅳ型变态反应引起。药物是本类疾病的主要治疗手段,局部用药可为病变部位提供更高的药物浓度,起效更快、更好,且可避免全身用药引起的副作用。近来局部治疗过敏性结膜炎的药物种类明显增多,给临床治疗提供了更多选择。这些药物包括抗组胺药、血管收缩剂（减少充血剂）及其复方制剂、肥大细胞稳定剂、双效抗组胺药、非甾体抗炎药和糖皮质激素,其中0.2%奥洛他定滴眼液是首个每日1次的双效抗组胺药。因此进一步开发长效、高效和耐受性良好的抗过敏滴眼剂对于提高患者用药的方便性和依从性意义重大。同时,对于局部使用某些免疫抑制剂治疗严重的顽固性的春季角结膜炎和特应性角结膜炎的有效性和安全性的评价还需要进行多中心大样本的临床观察。     

高效液相色谱法测定龙胆泻肝丸中栀子苷的含量

目的:用高效液相色谱法测定龙胆泻肝丸中栀子苷的含量.方法:采用Thermo C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(15:85)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长为238 nm.结果:对照品在5.5～16.5μg/ml范围内呈线性关系,γ=0.999 8,加样回收率平均为97.2%(n=6),RSD为2.3%,结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于测定龙胆泻肝丸中栀子苷的含量.     

龙胆泻肝汤对氧自由基和由羟自由基诱导的脂质过氧化的影响

目的 探讨龙胆泻肝汤对氧自由基和由羟自由基诱导的批质过氧化的影响。方法 用邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基和Ｆｅｎｔｏｎ反应产生羟自由基,收羟自由基诱导大鼠虹膜睫状体组织匀浆的脂质过氧化反应。结果 龙胆泻肝汤对超氧阴离子自由基具有清除作用,并优于抗坏血酸;对羟自由基具有清除作用,对羟自由基诱导的批质过氧化具有抑制作用并强于甘露醇。结论 龙胆泻肝汤泻肝胆实火,清下焦湿热的机理可能与其清除氧自由     

小檗胺对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞增殖的抑制作用

目的:探讨小檗胺对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞增殖和细胞周期的影响.方法:体外培养视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定0、2、4、8、16、32 mg/L小檗胺作用24、48和72 h后对HXO-RB44细胞增殖的抑制率,流式细胞仪检测0、4、8、16 mg/L小檗胺作用HXO-RB44细胞24h后的细胞周期.结果:随着小檗胺浓度的增加和作用时间的延长,其对HXO-RB44抑制率逐渐增加,作用24、48、72 h的IC50分别为25.26、10.94和6.25mg/L.流式细胞分析显示,与空白对照组比较,小檗胺可显著抑制细胞周期,使G2/M期细胞增多(P＜0.01).结论:小檗胺在体外可抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的增殖,并可诱导G2/M期阻滞,可能成为一种有效的抗视网膜母细胞瘤药物.     

HPLC法测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量

目的:用HPLC法测定龙胆泻肝丸中的黄芩苷的含量。方法:采用Nova-Pak C18柱(3.9 mm×150 mm,4μm),以甲醇-水-冰醋酸(45∶55∶1)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长275 nm。结果:对照品在0.815~4.075μg/ml范围内呈线性关系(r=0.999 6),加样回收率平均为99.4%,RSD为1.12%。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量。     

HPLC法测定壮骨止痛颗粒中淫羊藿苷的含量

目的:采用高效液相色谱法测定壮骨止痛颗粒中淫羊藿苷的含量。方法:采用Thermo C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(26∶74)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为270 nm,柱温为室温。结果:淫羊藿苷在0.01～0.07mg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.5%(n=6),RSD为0.85%。结论:本方法操作简便,精密度好,结果准确可靠。     

舒筋定痛胶囊抗炎镇痛药效学研究

目的:对制备工艺改进后的舒筋定痛胶囊进行抗炎镇痛药效学研究。方法:采用冰醋酸扭体法和热板法对小鼠进行镇痛试验;采用二甲苯耳肿法和角叉菜胶足跖肿胀法对小鼠进行抗炎试验。结果:制备工艺改进后的舒筋定痛胶囊其镇痛和抗炎作用显著优于工艺改进前的制剂,具有统计学显著性差异。结论:通过制备工艺改进,达到了减少服用剂量提高疗效的目的。     

龙胆泻肝汤对大鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的影响

运用体外培养的方法,研究龙胆泻肝汤（ＬＴ）对巨噬细胞（Ｍφ）内诱生性一氧化氮（ＮＯ）产生的影响。发现ＬＴ能抑制ＮＯ的产生,而且在一定范围内,其抑制作用随ＬＴ浓度的增大而增强。实验结果从抑制Ｍφ产生ＮＯ的角度部分揭示了龙胆泻肝汤上泻肝胆实火,下清下焦湿热的作用实质。     

抗青光眼药物的研究进展

近年来，一些新型抗青光眼药物被用于眼科临床，例如，α2-肾上腺素能受体激动剂溴莫尼定、局部碳酸酐酶抑制剂多佐胺和布林佐胺、前列腺素拟似剂等。本文对该类药物对青光眼和高眼压症患者增加眼部血流量、视神经保护和控制24h眼压的效果进行了文献综述，旨在促进抗青光眼药物的临床应用。