基于UPLC-Q-TOF/MS和模式识别技术阐释樟帮特色黄连水炒吴茱萸的炮制科学内涵

目的 分析黄连水炒吴茱萸炮制前后的化学成分变化，为深入阐明该饮片的炮制机制提供科学依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF/MS），Titank C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）进行梯度洗脱（正离子模式：0~0.01 min，5%B；0.01~20 min，5%~35%B；20~25 min，35%~45%B；25~50 min，45%~95%B；50~52 min，95%B；52~52.1 min，95%~5%B；52.1~55 min，5%B。负离子模式：0~0.01 min，5%B；0.01~25 min，5%~30%B；25~40 min，30%~55%B；40~45 min，55%~95%B；45~47 min，95%B；47~47.1 min，95%~5%B），柱温40 ℃，流速0.25 mL·min^-1；电喷雾离子源（ESI），分别在正、负离子模式下扫描，扫描范围均为m/z 50~1 250。采用对照品比对、数据库匹配和文献参照对黄连水炒吴茱萸炮制前后化学成分进行鉴定，并通过MarkerView? 1.2.1软件对所得数据归一化处理，应用SIMCA-P 14.1软件对生品和炮制品的MS数据进行主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA），筛选炮制前后差异性成分。结果 共鉴定出50种化合物，其中黄连水炒吴茱萸48种、生品44种，炮制后新增了丹参素、降氧化北美黄连次碱、氧化小檗碱、原阿片碱、13-methylberberrubine、canadine共6种化合物，（S）-7-hydroxysecorutaecarpine、wuchuyuamide Ⅱ在炮制后未被检出，酚酸类和黄酮类成分在炮制后总体含量明显下降，柠檬苦素类成分含量总体有所上升，生物碱类成分含量总体下降不明显。PCA及OPLS-DA结果表明吴茱萸炮制前后化学成分的组成和含量存在明显差异，共筛选得到槲皮素、二氢吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱等12个炮制差异性成分。结论 黄连水炒吴茱萸中主要含有酚酸、黄酮、柠檬苦素及生物碱类成分，其炮制前后化学成分的组成和含量均发生了一定变化，炮制辅料的加入和热水浸泡是造成这一差异的主要原因，可为该樟帮特色炮制品种的炮制机制阐释提供实验依据。     

基于HS-GC-MS考察苍术米泔水漂制前后挥发性成分的变化

目的 通过比较苍术经米泔水漂制前后的挥发性成分组成与含量变化，考察米泔水炮制对苍术挥发性成分的影响。方法 采用顶空气相色谱-质谱法（HS-GC-MS）检测北苍术、茅苍术及二者米泔水制品的挥发性成分，色谱条件采用程序升温（起始柱温50 ℃，维持2 min；以10 ℃·min^-1升温至120 ℃，以2.5 ℃·min^-1升温至170 ℃，以10 ℃·min^-1升温至240 ℃，维持3 min），进样口温度280 ℃，分流比为10∶1，溶剂延迟时间3 min；质谱条件为电子轰击离子源（EI），离子源温度230 ℃，扫描范围m/z 20~650，采用峰面积归一化法测定各成分的相对质量分数。运用SIMCA 14.1对所得样品数据进行主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA），通过变量重要性投影（VIP）值>1的原则筛选北苍术、茅苍术与其炮制品的差异性成分。结果 共鉴定出60种化合物，其中北苍术40种、制北苍术38种、茅苍术46种、制茅苍术47种。PCA及OPLS-DA均显示，4种苍术样品各自聚为一类，表明2种苍术经米泔水炮制后挥发性成分均发生明显变化，且北苍术和茅苍术的挥发性成分差异明显。2种苍术的生品与其炮制品比较，化合物组成基本不变，但含量有明显变化，差异性成分主要聚集在单萜类及倍半萜类化合物，且单萜类化合物含量多呈下降趋势。结论 北苍术、茅苍术经米泔水炮制后挥发性成分的含量发生了明显变化，蒎烯、3-蒈烯、4-异丙基甲苯、罗勒烯、萜品油烯、苍术酮、乙酸、糠醛可作为炮制前后的差异性标志物。     

应用siRNA抑制神经胶质瘤C6细胞受体表达的探讨

目的构建编码大鼠血管紧张素Ⅱ受体基因mRNA的短发夹RNA真核表达载体质粒,研究体外培养的哺乳细胞中siRNA抑制靶基因表达的有效性,为利用基因沉默技术从转录后水平进行高血压治疗的研究做准备。方法根据大鼠AT1受体mRNA序列设计并合成siRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-1。用构建完成的pGenesil-1-siRNA质粒和重新洗牌的对照质粒转染大鼠胶质瘤细胞,并在不同时相收集转染的细胞,进行RT-PCR和Westernblot检测。结果AT1R基因短发夹RNA抑制大鼠血管紧张素Ⅱ受体mRNA基因及其蛋白的结果类似。与对照组比较(100%),在转染后48h血管紧张素Ⅱ受体mRNA基因水平下降到35.5%±3.0%,72h后达到最低点(20.7%±4.0%)。而与对照组相比,血管紧张素Ⅱ受体蛋白在24h和48h分别减少至46.9%±4.2%和37.0%±3.7%,最大减少在转染后72h(28.1%±4.0%)。结论成功地构建了编码大鼠血管紧张素Ⅱ受体mRNA的短发夹RNA真核表达载体后,在体外转染哺乳细胞中表达siRNA可有效地抑制靶基因的表达,并导致其蛋白的翻译受到抑制,达到基因干扰的目的。为利用RNAi从转录后水平对心血管疾病进行治疗做有益的探索,为进一步研究基因沉默在自发性高血压大鼠的降压治疗研究奠定了基础。     

小儿哮喘的护理体会

整合59例小儿哮喘患者的临床症状进行分析,总结患儿护理时的重点,并阐述了患儿在发病时期对生理和心理健康造成的影响。本文就小儿哮喘的护理问题,提出在面对患有哮喘病的儿童时,应对其进行综合性管理教育,包括病房护理、临床护理、生活护理、心理护理、健康教育等重要护理内容。对患病的儿童实施有效地护理措施,能对其临床症状起到良好的控制效果;对哮喘患儿进行细致周到的护理,对其症状的控制能有效发挥作用。     

万古霉素冲管预防肿瘤患者中心静脉导管感染有效性的系统评价

目的评价万古霉素冲管预防肿瘤患者中心静脉导管（CVCs）感染的效果。方法电子检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBASE、CBM、CNKI,并辅以其他相关期刊检索,收集随机对照试验（RCTs）,按照纳入和排除标准,由2名研究者独立筛选并提取资料,采用Jadad评分标准评价纳人研究的方法学质量。采用RevMan5．0软件统计分析,从预防导管相关性菌血症效果、预防导管细菌定植效果及预防导管出口感染效果方面进行Meta分析。结果共纳入5个RCT（包括400例患者）。Meta分析结果表明,万古霉素和肝素混合液与肝素液比较,2组导管相关性菌血症发生率差异明显,导管细菌定植发生率差异明显,导管出口感染率差异不明显。结论万古霉素和肝素混合液较之肝素液,能有效降低导管相关性菌血症、导管细菌定植的发生率。但万古霉素是否对预防革兰阳性菌引起的导管相关性感染及对中性粒细胞未减少的肿瘤患者更为有效,结论有待进一步确认,我们尚需更多设计严格的大样本随机对照研究以增加证据的强度。     

万古霉素冲管预防肿瘤患者中心静脉导管感染有效性的系统评价

目的 评价万古霉素冲管预防肿瘤患者中心静脉导管(CVCs)感染的效果.方法 电子检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBASE、CBM、CNKI,并辅以其他相关期刊检索.收集随机对照试验(RCTs),按照纳入和排除标准,由2名研究者独立筛选并提取资料,采用Jadad评分标准评价纳入研究的方法学质量.采用RevMan5.0软件统计分析,从预防导管相关性菌血症效果、预防导管细菌定植效果及预防导管出口感染效果方面进行Meta分析.结果 共纳入5个RCT(包括400例患者).Meta分析结果表明,万古霉素和肝素混合液与肝索液比较,2组导管相关性菌血症发生率差异明显,导管细菌定植发生率差异明显,导管出口感染率差异不明显.结论 万古霉素和肝素混合液较之肝素液.能有效降低导管相关性菌血症、导管细菌定植的发生率.但万古霉素是否对预防革兰阳性菌引起的导管相关性感染及对中性粒细胞未减少的肿瘤患者更为有效,结论有待进一步确认,我们尚需更多设计严格的大样本随机对照研究以增加证据的强度.     

胎膜早破的观察和护理

胎膜早破是指在临产前胎膜自然破裂,孕妇突感较多液体经阴道流出,继而少量间断排出。胎膜早破可诱发早产,增加宫内感染和产褥感染,脐带脱垂机会增加。 1 原因 主要原因为:宫内张力过大,如双胎、羊水过多;胎位异常,如臀位、横位;宫颈内口机能不全;腹压过大;机械创伤;感染。 2 确诊实验 2.1 阴道酸碱度检查:PH试纸测试阴道液,PH试纸测试阴道液,PH试纸变兰为阳性,破水可能性大,平时阴道PH环境为4.5～5.5,尿液PH为5.5～6.5。     

甲状旁腺切除术改善继发性甲状旁腺功能亢进症维持性血液透析患者生活质量

目的 评价甲状旁腺切除术(parathyroidectomy,PTX)对伴有继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)的维持性血液透析患者生活质量的影响.方法 选取2004年至2010年中日友好医院的维持性血液透析患者,其中因难治性SHPT实行PTX组33例,非PTX组35例.收集PTX组手术前和术后1年,非PTX组1年前、后的数据,包括血钙、血磷、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及血清全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,iPTH);应用简明健康测量量表(medical outcomes study 36-item short-form health survey,SF-36)调查,分析量表各维度得分并进行比较.结果 钙、磷、ALP、iPTH:PTX组术前与非PTX组比较各项指标均明显升高(均P<0.05);PTX组术后1年与术前比较各项指标均明显减低(均P<0.01).SF-36量表各维度得分:PTX组术前与非PTX组比较在生理功能、躯体疼痛2个维度有减低(P<0.01);PTX组术后1年与术前比较在生理功能、躯体疼痛、情感职能、精神健康4个维度有明显提高(P<0.01);PTX组术后与非PTX组1年后比较,在生理功能、情感职能及躯体疼痛3个维度有提高(P<0.05).结论 PTX不仅可以有效治疗难治性SHPT,而且可以明显提高患者生活质量.     

基于UPLC-Q-TOF-MS的泽泻盐制前后萜类化学成分分析

目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）对泽泻盐制前后化学成分进行辨识,考察泽泻盐制前后萜类成分的变化。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS检测,流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~0.01 min,20%B;0.01~5 min,20%~40%B;5~40 min,40%~95%B;40~42 min,95%B;42~42.1 min,95%~20%B;42.1~45 min,20%B）,电喷雾离子源（ESI）,正离子模式采集,扫描范围m/z 100~1 250,离子源温度500 ℃。利用PeakView 1.2.0.3软件进行数据分析,根据一级质谱精确m/z和二级质谱碎片信息,结合对照品和文献数据进行成分鉴定;质谱数据经MarkerView 1.2.1归一化处理后进行主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）,筛选得到差异性成分,根据相对峰面积分析差异性成分含量变化。结果 在正离子模式下共鉴定出了30个化学成分,其中原萜烷型三萜28个,倍半萜2个。PCA和OPLS-DA结果显示,泽泻盐制前后成分差异明显,共筛选得到23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇I、泽泻醇B、泽泻醇C、泽泻醇G、泽泻醇A、11-deoxy-alisol B 23-acetate、11-deoxy-alisol B、11-deoxy-alisol C和环氧泽泻烯10个差异性成分,其中泽泻醇G和泽泻醇A的含量盐制后明显下降。结论 利用UPLC-Q-TOF-MS可全面鉴定泽泻生品和盐制品中的化学成分。泽泻盐制前后部分成分含量存在差异,取代基团的不同是造成这一差异的主要原因,可为泽泻盐制前后功效变化的物质基础确定提供依据。     

足跟底逆行皮瓣样撕脱伤的治疗（附4例报告）

足跟底逆行皮瓣样撕脱伤的治疗（附４例报告）０５００１１石家庄市第三医院张文科，聂喜增，赵文燕河北省人民医院张学军我们自１９８２年以来，共收治４例足跟底逆行皮瓣样撕脱伤，采用保留皮瓣脂肪组织，原位缝合的方法，ｌ期愈合３例，延期愈合１例。经随访，效果满意...