医养结合养老机构COVID-19疫情防控应急策略及效果分析

目的：探讨医养结合养老机构新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）疫情防控应急策略及其效果,为养老机构应对突发公共卫生事件提供参考。方法：采用回顾性研究的方法,对医养结合养老机构COVID-19疫情期间重点关注的医疗及照护指标与去年同期比较。结果：疫情暴发期间与去年同期数据相对比,老人病情变化日发生率无明显变化,但感冒相关症状日发生率[（1.67±0.94）%]较去年[（2.03±1.01）%]明显降低（P=0.015）;同时,日急性发热、日转院转诊率与去年相比明显下降（P=0.000）;不良事件日发生率无明显变化,但跌倒损伤日发生率[（0.007±0.044）%]与前一年[（0.030±0.090）%]相比明显下降（P=0.028）。员工日感冒相关症状[（1.11±0.81）%]与去年[（1.40±0.93）%]相比明显下降（P=0.027）;日急性发热[（0.11±0.19）%]与去年[（0.19±0.26）%]相比明显下降（P=0.024）;无季节性流感的发生。结论：医养结合养老机构COVID-19疫情防控应急策略总体实施效果良好,明显改善了疫情期间重点关注的医疗及照护指标,为养老机构应对突发公共卫生事件提供了参考,疫情期间形成的良好公共卫生习惯应予常态化。     

知母皂苷AⅢ抑制人脑胶质瘤增殖生长的机制研究

考察知母皂苷AⅢ抑制人脑胶质瘤U87MG细胞增殖的作用及机制分析。在裸鼠皮下荷瘤模型中,知母皂苷AⅢ组与模型组相比,显著降低瘤重。知母皂苷AⅢ呈剂量依赖性抑制U87MG细胞的体外增殖;呈剂量依赖性降低β-Catenin,Cyclin D1,Bcl-2的蛋白表达,同时升高p21在蛋白和基因水平的表达;降低ERK磷酸化水平,抑制β-Catenin的核转移,同时提高p38和JNK蛋白的磷酸化水平。联用JNK抑制剂SP600125和p38抑制剂SB203580后可逆转知母皂苷AⅢ处理而提高的p21和降低的β-Catenin的蛋白表达。知母皂苷AⅢ部分通过干预MAPK及Wnt/β-Catenin信号通路而抑制脑胶质瘤U87MG的增殖。     

桑枝提取部位及其组合对巨噬细胞炎症介质的影响

目的 研究桑枝不同提取部位及其配比对脂多糖（LPS）协同γ-干扰素（IFN-γ）刺激的巨噬细胞RAW264.7中炎症介质的影响。方法 采用有机溶剂萃取和大孔树脂富集的方法制备桑枝乙醇提取物不同萃取部位I～IV。各提取部位及不同部位组合分别作用于细胞后,Griess法测定RAW264.7细胞亚硝酸盐的量;MTT法检测细胞活力;三价铁还原抗氧化能力测试（FRAP）法测定细胞抗氧化能力;半定量PCR法测定炎症介质基因的表达;Western blotting法测定炎症介质蛋白的表达。结果 桑枝4个提取部位中,I和II以剂量相关方式抑制细胞悬液中亚硝酸盐的量,IC₅₀分别为145.23、152.14 mg/L。在I与II 3种配比（1∶1、1∶4、4∶1）组合中,1∶1配比时抑制细胞上清液中亚硝酸盐量的IC₅₀值最低,为110.31 mg/L,且对细胞活力具有保护作用。与模型组相比,I和II在200 mg/L时显著下调白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、诱生型NO合酶（iNOS）、环氧合酶-2（COX-2）、核因子-κB（NF-κB）基因表达水平（P＜0.05、0.01）,同时上调血红素加氧酶（HO-1）和过氧化物酶增殖体受体（PPAR-γ）基因表达水平（P＜0.05）,提高细胞抗氧化能力（P＜0.05）,且抑制ERK蛋白的磷酸化（P＜0.05）。I和II（1∶1）组合对COX-2、IL-1β、HO-1、NF-κB、PPAR-γ的表达有一定的协同调控效果。结论 提取部位I和II是桑枝抗炎的活性部位,其部分通过NF-κB和ERK/MAPK信号转导通路调控炎症介质的表达,其1∶1配比组合对炎症中某些靶点均有较好的协同调控作用,抗炎效果更佳。     

祖师麻醋酸乙酯提取物体外抗炎作用及其机制

目的研究祖师麻醋酸乙酯提取物(EAEDGC)的体外抗炎作用及其机制。方法用γ-干扰素(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同制备小鼠RAW264.7细胞炎症模型,Griess反应测定细胞上清液中NO生成量,MTT法测定细胞活力,三价铁还原抗氧化能力测试(FRAP assay)测定细胞总抗氧化能力,RT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;Western blotting检测iNOS、COX-2、HO-1、p-ERK蛋白表达水平。结果 EAEDGC以剂量依赖方式抑制细胞上清液中NO的生成,提高细胞总抗氧化能力,下调iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA及iNOS、p-ERK蛋白的表达,上调HO-1 mRNA和蛋白表达,同时不影响细胞生长;但对COX-2 mRNA和蛋白表达影响不大。结论 EAEDGC部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路抑制iNOS基因和蛋白的表达,从而抑制NO的生成,提高细胞总抗氧化能力,同时下调IL-1β、IL-6、TNF-α炎症介质和上调抗炎介质HO-1的表达,进而发挥抗炎作用。     

白及多糖对糖尿病溃疡创面愈合的作用研究

目的:研究白及多糖对糖尿病溃疡愈合的治疗作用及其作用机制.方法:SD大鼠56只,糖尿病模型通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg·kg-1)建立,72 h后,血糖大于≥16.7 mmol·L-1即认为糖尿病造模成功.4周后,切割2个直径为1.8 cm大小圆的全层皮肤,糖尿病溃疡模型制造后,2个创面分别用白及多糖和对照PBS干预;于伤后3,7,14,21 d时相点对创面愈合面积、组织形态学改变、成纤维细胞(FB)增殖情况、羟脯氨酸(OHP)含量、髓过氧化物酶(MPO)含量进行观察与检测.结果:白及多糖能显著促进糖尿病溃疡创面愈合(与PBS组比较P＜0.05),病理组织学检查发现白及多糖能有效刺激炎症细胞浸润,促进上皮组织形成,FB增殖明显,OHP含量增加.结论:白及多糖可能通过促进炎症细胞浸润、增加OHP含量的合成和释放、FB的增殖,从而促进糖尿病溃疡创面愈合.     

桑枝不同溶剂提取物对血小板聚集、血管舒张及巨噬细胞活化的不同作用

目的:研究桑枝不同溶剂提取物对血小板聚集、离体血管舒张及巨噬细胞活化后亚硝酸盐表达的不同作用。方法:桑枝醇提物经萃取分别得到乙酸乙酯提取物(Ⅰ)、正丁醇提取物(Ⅱ)和氯仿提取物(Ⅲ)。以二磷酸腺苷、花生四烯酸、胶原诱导大鼠体外血小板聚集;LPS和干扰素γ刺激巨噬细胞活化;离体血管环舒缩实验来考察不同溶剂提取物的不同作用。结果:氯仿提取物具有较好的浓度依赖性抑制血小板聚集、舒张血管作用;乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物则对巨噬细胞活化后过量亚硝酸盐产生具有显著的抑制作用。结论:桑枝醇提物经不同溶剂提取其药效大有不同。作者首次发现桑枝氯仿提取物在心血管系统的良性药理作用,而乙酸乙酯和正丁醇提取物抑制亚硝酸盐产生也提示其可能通过抑制过量一氧化氮释放而具有抗炎作用。     

分子靶向型中药对一氧化氮信息系统的调控作用

一氧化氮（NO）在各类分子进程中均作为重要的信号分子出现,其在生理学和病理学的作用已被广泛研究。作为气体分子和带非共用电子的自由基,NO参与不同的生物进程。在许多例子中NO通过活化环鸟苷酸和提高胞内cGMP合成来介导其生物效应;然而NO非cGMP依赖效应的种类列表也在快速增长。过量NO为特征的炎症反应在多种炎症性疾病中存在,靶向NO信号的治疗策略已于近年引起研究者注意。许多中药及其活性成分的使用在中医药传统治疗和现代生物医学研究中都享有盛誉。主要介绍NO作为药物的使用历史,着重指出发展靶向NO信号分子型新中药的重要性,并提出使用药理学、生物化学和分子生物学方法于细胞、器官及无细胞水平来鉴定、纯化和重组以调控NO信号途径将是治疗NO产量不平衡为特征的众多病理情况的新策略。     

清热解毒药对组分调控巨噬细胞M1/M2表型及其机制研究北大核心CSCD

考察清热解毒药对白花蛇舌草-半枝莲的组分(YDW11)对巨噬细胞表型M1/M2的调控及其机制。利用脂多糖(lipopolysaceharides,LPS)/干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素4(interleukin 4,IL-4)/白介素13(interleukin 13,IL-13)分别诱导鼠源巨噬细胞RAW264.7为M1和M2表型,MTT法检测YDW11对细胞活力的影响;Griess反应法检测细胞上清液中亚硝酸盐含量的变化;Trans-well小室迁移实验考察M2型巨噬细胞对乳腺癌细胞4T1的体外迁移及YDW11干预的影响;qRT-PCR法检测YDW11对细胞内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、白介素1β(interleukin1β,IL-1β)、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)基因表达的影响;Western blot法检测YDW11对i NOS和Arg-1蛋白表达的影响;Taqman microRNA RT-PCR法检测YDW11对miR155表达的影响。质谱(MS)联用超高效液相色谱(UPLC)检测YDW11中的化学成分。结果显示,等比水提取白花蛇舌草-半枝莲药对的乙酸乙酯组分(YDW11)呈剂量依赖性抑制巨噬细胞M1表型中亚硝酸盐含量,同时抑制M2型巨噬细胞引起的乳腺癌细胞4T1体外迁移加剧,且对未刺激的巨噬细胞M0无细胞毒性。YDW11呈剂量依赖性抑制M1表型标记物i NOS和M2表型标记物Arg-1基因及蛋白的表达,抑制M1表型中IL-1β和M2表型中MR的基因表达,调控M1表型上升而M2表型下调的miR155的表达。MS-UPLC联用结果显示,YDW11中含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种化学成分。结果表明,YDW11部分通过调控miR155的表达,抑制巨噬细胞M1和M2表型标志性产物i NOS和Arg-1的基因和蛋白表达,而调控巨噬细胞M1/M2表型的极化过程。     

清热解毒药对组分调控巨噬细胞M1/M2表型及其机制研究

考察清热解毒药对白花蛇舌草-半枝莲的组分(YDW11)对巨噬细胞表型M1/M2的调控及其机制。利用脂多糖(lipopolysaceharides,LPS)/干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素4(interleukin 4,IL-4)/白介素13(interleukin 13,IL-13)分别诱导鼠源巨噬细胞RAW264.7为M1和M2表型,MTT法检测YDW11对细胞活力的影响;Griess反应法检测细胞上清液中亚硝酸盐含量的变化;Trans-well小室迁移实验考察M2型巨噬细胞对乳腺癌细胞4T1的体外迁移及YDW11干预的影响;qRT-PCR法检测YDW11对细胞内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、白介素1β(interleukin1β,IL-1β)、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)基因表达的影响;Western blot法检测YDW11对i NOS和Arg-1蛋白表达的影响;Taqman microRNA RT-PCR法检测YDW11对miR155表达的影响。质谱(MS)联用超高效液相色谱(UPLC)检测YDW11中的化学成分。结果显示,等比水提取白花蛇舌草-半枝莲药对的乙酸乙酯组分(YDW11)呈剂量依赖性抑制巨噬细胞M1表型中亚硝酸盐含量,同时抑制M2型巨噬细胞引起的乳腺癌细胞4T1体外迁移加剧,且对未刺激的巨噬细胞M0无细胞毒性。YDW11呈剂量依赖性抑制M1表型标记物i NOS和M2表型标记物Arg-1基因及蛋白的表达,抑制M1表型中IL-1β和M2表型中MR的基因表达,调控M1表型上升而M2表型下调的miR155的表达。MS-UPLC联用结果显示,YDW11中含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种化学成分。结果表明,YDW11部分通过调控miR155的表达,抑制巨噬细胞M1和M2表型标志性产物i NOS和Arg-1的基因和蛋白表达,而调控巨噬细胞M1/M2表型的极化过程。     

甘草总黄酮及其成分体外抗炎活性及机制研究

目的:考察甘草总黄酮(TFGR)及其成分对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导巨噬细胞RAW264.7炎症模型的抗炎机制.方法:应用溶剂萃取和大孔树脂富集纯化制备甘草醇提物、组分及总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Greiss反应法测定各层次提取物及黄酮类单体对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;FRAP法测定总抗氧化能力;RT-PCR法考察TFGR及异甘草素对细胞内诱导型一氧化氮合酶iNOS,COX-2,IL-1β,IL-6,PPAR-γ mRNA的影响;Western blot法考察TFGR及异甘草素对细胞iNOS,COX-2及MAPK信号转导通路的影响.结果:甘草乙酸乙酯部位与其他提取物相比,在相同剂量时对亚硝酸盐含量的抑制率最高.乙酸乙酯提取物经大孔树脂富集的甘草总黄酮(甘草苷占60.08％)呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量且优于乙酸乙酯提取物,并对刺激后的细胞活力有保护作用,且总抗氧化能力也强于其他提取物;TFGR抑制iNOS,IL-6 mRNA并提高PPAR-γ基因水平,抑制iNOS,COX-2,p-ERK的蛋白表达;甘草黄酮类单体异甘草素能抑制iNOS,COX-2基因和蛋白表达水平和IL-1β,IL-6的基因表达,还能上调PPAR-γ的基因表达.结论:活性导向的分离提示乙酸乙酯部位是甘草抗炎活性组分之一,由此活性组分富集得到的TFGR呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制iNOS和COX-2基因和蛋白的表达而达到抗炎效果.其中异甘草素可能为TFGR抗炎的活性成分.