去泛素化酶YOD1调控肝脏脂代谢的初步研究

目的：探索去泛素化酶YOD1在肝脏营养代谢中发挥的作用。方法：通过Q?PCR检测高脂饮食C57BL/6小鼠、db/db小鼠肝脏中以及油酸（oleic acid,OA）处理后的Hepa1?6细胞内,YOD1的表达情况。在C57BL/6小鼠中,通过Q?PCR法检测YOD1的组织分布及不同营养状态下的表达情况。对Hepa1?6细胞中给予OA处理,通过甘油三酯试剂盒检测细胞内甘油三脂含量,并利用油红染色观察细胞内脂滴。经Q?PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞内相关基因的mRNA及蛋白水平。结果：短期高脂饮食后,肝脏中YOD1的mRNA水平显著下降。而与对照组db/+小鼠相比,db/db小鼠肝脏中YOD1的mRNA水平无变化。但是,经OA处理后,Hepa1?6细胞内的YOD1的mRNA水平明显减少。另外,YOD1主要表达于肝脏中。小鼠禁食后,肝脏YOD1的mRNA水平显著增加,而再喂食后显著下降。此外,过表达YOD1的Hepa1?6细胞中OA诱导的脂质堆积明显减少,且SREBP?1c的剪切被抑制。结论：本研究初步发现,去泛素化酶YOD1的表达水平受营养状态调控,并通过抑制SREBP?1c的剪切影响肝细胞的脂代谢。     

成熟SVFs细胞与Hepa1⁃6细胞共培养模型的建立及对肝细胞脂代谢的影响

目的：建立小鼠成熟脂肪细胞血管基质部分（stromal vascular fraction,SVF）与小鼠肝细胞（Hepa1?6）共培养模型,研究成熟脂肪细胞对肝细胞脂质堆积以及代谢的影响。方法：从小鼠皮下脂肪分离提取原代SVF细胞,经体外分化成熟后,以Transwell小室建立成熟SVF细胞和Hepa1?6细胞间接共培养48 h体系。应用逆转录?聚合酶链反应法（RT?PCR法）检测SVF细胞PPARγ和PGC?1α等分化相关基因及Hepa1?6细胞CD36、FATP2、GPAT1等脂代谢相关基因的表达。酶法检测经共培养后的Hepa1?6细胞甘油三酯水平。结果：小鼠原代SVF细胞经诱导成熟后,出现明显较大脂滴;成熟SVF细胞中PPARγ和PGC?1α等分化标志物较未分化SVF细胞显著升高;Hepa1?6细胞甘油三酯水平明显高于未共培养组;Hepa1?6细胞GPAT1、CD36基因表达水平明显升高。结论：已成功建立成熟脂肪细胞与Hepa1?6细胞Transwell共培养模型。肝细胞与成熟脂肪细胞共培养可以诱导其脂质堆积增加,该过程可能通过上调肝细胞中CD36 和GPAT1的表达水平增加脂肪酸的吸收和甘油三酯的合成通路实现。     

五株EV71病毒毒力、免疫原性与基因组比较分析

目的对5株EV71分离株(LCH01、LCH02、BJ01、BJ02、AH01)进行毒力、免疫原性和基因组的比较分析。方法分别用5株EV71分离株攻击Balb/c乳鼠,比较毒力差异;免疫6～8周龄Balb/c小鼠后收集血清,ELISA检测抗体效价,微量中和实验检测中和抗体效价;反转录获得5株EV71的全长cDNA进行全基因组测序;最后,用CLC Main Workbench 5.5软件对序列进行比较分析。结果通过对VP1基因的比较分析发现,这5株EV71分离株均为C4a亚型。1周龄Balb/c小鼠经脑部注射LCH01株,表现出后肢瘫痪和后继死亡;而注射其它4株EV71的小鼠在观察了14 d之后仍然存活。5株EV71血清抗体效价为210～211,中和抗体效价为27～28,无显著差异。LCH01毒株与其它几株序列相比,在5′-NTR、3′-NTR、3D等处均有明显差异。结论这5株EV71分离株为近几年流行的C4a亚型,具有较高的免疫原性;LCH01毒株的毒力高于其它几株,从基因组水平上找到了差异序列,这为EV71疫苗评价和致病机制研究提供了实验数据和实验材料。     

偏振光在医药学实验教学中的应用

光的偏振特性以及根据光的偏振特性制成的偏光显微镜和旋光仪在医学和药学领域实验检验中有着广泛的应用.     

针药灸并用在难治性胃炎中的应用

胃炎（gastritis）指的是任何病因引起的胃黏膜炎症，常伴有上皮损伤和细胞再生，其发病多与幽门螺杆菌感染有关。胃炎可出现在中医的脾胃系病证中，如胃痛、呕吐、泄泻、痢疾、便秘等。我师内蒙古一机医院中医科主任钱晓平教授在数十载临床工作中积累了“针药灸并用”治疗难治性胃炎的诸多经验，临床疗效明显优于单用针灸或者单用中药。现举数例报告如下。     

RP—HPLC梯度洗脱法同时测定茜芷胶囊中欧前胡素及大叶茜草素的含量

目的：建立茜芷胶囊中欧前胡素及大叶茜草素含量的测定方法。方法：采用高效液相梯度洗脱法测定茜芷胶囊中欧前胡素及大叶茜草素的含量，选用C18柱，流动相A：甲醇，流动相B：水，流速：1．3mL／min，进行梯度洗脱；检测波长：250nm。结果：欧前胡素在12．0～60．0μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9998）;大叶茜草素在20．2—161．6μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9999），平均回收率欧前胡素为：99．8％，RSD=1．0％，大叶茜草素为：99．97％，RSD=0．11％。结论：本方法简便、快速、准确，可作为本品的质量控制方法。     

流式细胞术分析外周血辅助性T17细胞在强直性脊柱炎患者外周血的表达及其意义

目的 检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血辅助性T17(Th17)细胞的表达,探讨其在AS发病机制中的作用.方法 用流式细胞术检测20例AS患者和15名健康对照者外周血Th17[白细胞介素(IL)-17]、Th1[干扰素(IFN)-γ]、Th2(IL-4)细胞及人类白细胞抗原(HLA)-B27,同时检测红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRp)等,并分析Th17细胞与Th1、Th2、HLA-B27及AS活动性指标的相关性.采用t检验和Spearman相关分析.结果 AS患者外周血Th17细胞[(2.6±0.8)%]高于对照组[(1.1±0.4)%](P＜0.01);Th1(IFN-γ)细胞[(3.9±0.8)%]低于对照组[(5.1±1.3)%](P＜0.05);Th2(IL-4)细胞[(4.1±1.6)%]比对照组[(3.1±1.4)%]升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);Th17细胞与HLA-B27百分数及与HLA-B27平均荧光强度、ESR、CRP无相关性(P＞0.05);但是,Th17细胞表达水平有随HLA-B27百分数及HLA-B27平均荧光强度增加升高的趋势.结论 AS患者外周血Th1细胞减少,而Th17细胞增加,AS患者体内存在Th细胞的失衡,Th17比例变化是反映AS整个复杂免疫反应异常的一个重要环节.

Abstract：

Objective To detect the expression of T helper 17 (Th17) cells in the peripheral blood of patient with ankylosing spondylitis (AS),and discuss its role in thc pathogenesis of AS.Methods Twenty AS patients and fifteen healthy controls were enrolled in the study.Th17 (IL-17),Th1 (IFN-γ),Th2 (IL-4)cells and HLA-B27 of their peripheral blood were analyzed by flow cytometry,at the same time,the levels of ESR and CRP were also measured in order to analyze thc relation of Th17 and HLA-B27,ESR as well as the CRP level.The statistical analysis was carried out with single-sample t-test and Speraman's correlation test.Results The level of Th17 cells was significantly higher in the perpipheral blood of AS patients[(2.6±0.8 )%] than those in healthy controls[ (1.1±0.4)% ] (P＜0.01).The level of Th 1 cells was significantly lower in the peripheral blood of AS patients[(3.9±0.8)%] than those in healthy controls[(5.1±1.3)%] (P＜0.01)and the level of Th2 cells was not different in the peripheral blood of AS patients[(4.1±1.6)%] when compared to healthy controls[ (3.1±1.4)% ] (P＞0.05).Th 17 cells was not significantly correlated with the percentage and mean fluorescent intensity of HLA-B27,ESR,CRP(P＞0.05); but there was a tendency that increased expression level of Th17 cells was associated with elevated percentage and mean fluorescent intensity of HLA-B27.Conclusion The level of Th1 cells is decreased,but Th17 is increased in the peripheral blood of AS patients.Th cells are imbalance in AS,patients.The change of Th17 cells may be an important part of the pathogenesis of AS.     

甘肃中医学院中医本科学生师承教育状况调查报告

为了进一步探索培养具有综合素质的高级中医专业人才的科学教学模式,了解中医医疗系本科学生师承教育状况,对跟师学生、带教教师、医院专门从事临床工作的中医师等进行了问卷调查、个别访谈、座谈研究,结果显示,接受过师承教育的中医本科学生在理论知识、实践能力、临床技能等方面明显优于其他学生,更能适应社会需求。     

血清总胆汁酸和胆红素在肝胆道结石中的临床意义探讨

目的 探讨胆结石患者血清总胆汁酸(TBA)及胆红素包括总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)和间接胆红素(IBIL)的测定在临床中的意义.方法 采取27例胆结石患者血清作有关检测与分析.结果 胆色素结石(PS)患者血清TBA显著高于胆固醇(CS)结石患者(p<0.05),而TBIL、DBIL及IBIL结果PS组比CS普遍偏高但无显著性差异(p>0.05);取石术后血清TBA比各类胆红素恢复明显迅速.结论 血清TBA的测定对两种胆结石的大致区分、急性胆结石症或胆道阻塞的临床诊断有较大意义;在观察结石手术后恢复情况方面,胆红素的监测比TBA测定更有实际的临床意义.     

36例SARS患者外周血象检查结果分析

目的　通过对 3 6例严重急性呼吸综合征 (SARS)患者外周血细胞数据的研究 ,动态监测SARS患者的血象变化 ,探讨血象在发生、发展转归中的临床意义。　方法　收集江门市医院 3 6例确诊SARS患者的外周血检查数据 ,进行动态分析。　结果　入院时 3 6例患者外周血白细胞计数 (WBC)均值为 ( 5 2± 3 0 )× 10 9/L随后WBC升高 ,至第4周有 91 6%病例WBC计数恢复正常 ,入院时淋巴细胞值低于 1 5× 10 9/L者占 88 9% ( 3 2 / 3 6) ,均值为 ( 1 0± 0 5 )×10 9/L ,入院 4周后有 86 1%患者淋巴细胞绝对数恢复正常。 1例血小板降低 ,占 2 8%。其他细胞分类及血红蛋白无明显异常。　结论　白细胞降低或正常及淋巴细胞降低可作为SARS的早期诊断指标 ,淋巴细胞降低可作为SARS早期诊断的标准之一 ;淋巴细胞的降低显示SARS病毒严重侵犯患者免疫功能 ,淋巴细胞是否回升可作为监测患者免疫功能是否重建的指标