去泛素化酶YOD1调控肝脏脂代谢的初步研究

目的：探索去泛素化酶YOD1在肝脏营养代谢中发挥的作用。方法：通过Q?PCR检测高脂饮食C57BL/6小鼠、db/db小鼠肝脏中以及油酸（oleic acid,OA）处理后的Hepa1?6细胞内,YOD1的表达情况。在C57BL/6小鼠中,通过Q?PCR法检测YOD1的组织分布及不同营养状态下的表达情况。对Hepa1?6细胞中给予OA处理,通过甘油三酯试剂盒检测细胞内甘油三脂含量,并利用油红染色观察细胞内脂滴。经Q?PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞内相关基因的mRNA及蛋白水平。结果：短期高脂饮食后,肝脏中YOD1的mRNA水平显著下降。而与对照组db/+小鼠相比,db/db小鼠肝脏中YOD1的mRNA水平无变化。但是,经OA处理后,Hepa1?6细胞内的YOD1的mRNA水平明显减少。另外,YOD1主要表达于肝脏中。小鼠禁食后,肝脏YOD1的mRNA水平显著增加,而再喂食后显著下降。此外,过表达YOD1的Hepa1?6细胞中OA诱导的脂质堆积明显减少,且SREBP?1c的剪切被抑制。结论：本研究初步发现,去泛素化酶YOD1的表达水平受营养状态调控,并通过抑制SREBP?1c的剪切影响肝细胞的脂代谢。     

基于蛋白组学探究七味癸宝颗粒治疗卵巢早衰的作用机制北大核心CSCD

利用蛋白质组学技术研究七味癸宝颗粒治疗卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)的可能机制。首先使用50 mg·kg-1剂量的雷公藤多苷溶液连续灌胃14 d,构建POF小鼠模型。造模结束的前10 d,每天观察小鼠的动情周期,以判断是否造模成功。然后,从造模结束后的第1天开始,用七味癸宝颗粒对POF模型小鼠每天进行灌胃给药,连续治疗4周。实验结束第2天,小鼠摘眼球取血,离心后分离出血清;取出小鼠卵巢和子宫,小心剥离脂肪组织,计算各组小鼠的卵巢和子宫的器官指数。ELISA检测各组小鼠血清中雌激素的水平。卵巢组织提取蛋白样品,运用串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)定量蛋白质组学技术研究七味癸宝颗粒干预前后和造模前后的差异蛋白情况。差异蛋白分析结果显示,七味癸宝颗粒的治疗能够调节雷公藤多苷诱导的POF模型相关的26个差异表达蛋白,主要有S100A4、STAR、adrenodoxin oxidoreductase、XAF1、PBXIP1等。GO富集结果显示,26个差异蛋白主要富集在生物过程和细胞组分。KEGG富集结果显示,这些差异蛋白主要涉及complement and coagulation cascades、focal adhesion、arginine biosynthesis及terpenoid backbone biosynthesis等信号通路。其中complement and coagulation cascades可能是七味癸宝颗粒治疗POF的潜在靶通路。该研究利用蛋白质组学筛选出七味癸宝颗粒治疗雷公藤多苷所致小鼠POF的相关差异蛋白,主要参于免疫调节、凋亡调节、补体和凝血级联反应、胆固醇代谢与类固醇激素生成,这些可能是七味癸宝颗粒治疗POF的主要作用机制。