长链非编码RNA UPK1A-AS1通过稳定HIF-1α的表达促进肝癌细胞的糖酵解

目的探讨长链非编码RNA UPK1A-AS1对肝癌细胞糖酵解的影响及其分子机制。方法通过慢病毒过表达系统构建UPK1A-AS1稳定过表达组（UPK1A-AS1）和慢病毒阴性对照组肝癌细胞株，两组细胞均分别置于常氧（21% O₂）及乏氧（1% O₂）条件下培养24 h，获得不同氧气条件下的UPK1A-AS1过表达组和阴性对照组肝癌细胞，利用葡萄糖及乳酸试剂盒检测过表达UPK1A-AS1对肝癌细胞糖酵解的影响。利用qRT-PCR法检测糖酵解相关基因HIF1A、GLUT1、HK1、HK2及PGK1的表达，采用双荧光素酶报告实验检测过表达UPK1A-AS1对HRE活性的影响。用放线菌酮处理肝癌细胞，检测过表达UPK1A-AS1对HIF-1α蛋白质稳定性的影响。利用泛素化蛋白质免疫共沉淀法明确UPK1A-AS1对HIF-1α蛋白泛素化修饰的影响。将肝癌细胞分为对照组、UPK1A-AS1稳定过表达组（UPK1A-AS1）、HIF-1α敲除组（si-HIF-1α）、UPK1A-AS1稳定过表达联合HIF-1α敲除组（UPK1A-AS1+si-HIF-1α），检测在过表达UPK1A-AS1的基础上干扰HIF-1α的表达后，肝癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成，HRE活性和糖酵解相关基因HK1、HK2及PGK1的表达情况，明确UPK1A-AS1是否通过上调HIF-1α的表达促进肝癌细胞的糖酵解水平。结果与对照组相比，不论在常氧还是乏氧的条件下，过表达UPK1A-AS1均能促进肝癌细胞葡萄糖的消耗水平，并促进肝癌细胞生成乳酸，差异具有统计学意义（P < 0.05）；过表达UPK1A-AS1能明显上调糖酵解相关基因HIF1A、GLUT1、HK1、HK2及PGK1的表达，且过表达UPK1A-AS1能促进HRE的转录活性（P < 0.05）；Western blot显示，过表达UPK1A-AS1能增加HIF-1α蛋白的稳定性，并显著减少HIF-1α的泛素化修饰。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明，敲除HIF-1α能逆转过表达UPK1A-AS1对葡萄糖消耗及乳酸生成的促进作用（P < 0.05）；干扰HIF-1α能恢复过表达UPK1A-AS1对HRE活性的上调作用。结论长链非编码RNA UPK1A-AS1通过稳定HIF-1α的表达上调糖酵解相关基因的表达，进而促进肝癌细胞的糖酵解水平。     

62例小儿输卵管卵巢扭转的诊治与分析

目的探讨小儿输卵管卵巢扭转的临床特征和诊治要点。方法对收治的62例患者进行回顾性分析。结果所有患者表现有下腹痛,病程2 h至半年不等,48例可查及下腹压痛；彩色多普勒超声检查均发现在盆腔一侧有不均质肿块,其中30例提示有扭转可能。所有患者均行手术治疗,其中行腹腔镜手术者14例；术中见47例为右侧附件扭转,15例为左侧扭转；渗出粘连明显者24例；35例行患侧附件切除,27例行附件复位、肿瘤剔除和冰冻切片检查后保留附件。在保留附件患儿中,有22例得到随访,除1例卵巢萎缩外,其余21例卵巢功能均良好。结论小儿输卵管卵巢扭转较少见,无特殊临床表现,易致误诊。一经诊断应立即行手术探查,扭转的附件应根据扭转时间、供血障碍程度、病变性质来决定取舍。     

两例冠脉搭桥同期肺癌手术患者的麻醉管理

分析上海市胸科医院在2012年11月间同期施行冠脉搭桥术和肺癌手术的患者2例,美国麻醉医师协会（ASA）分级为Ⅱ或Ⅲ级.在全身麻醉、非体外循环下先行冠状动脉搭桥术（coronary artery bypass grafting,OPCABG）后行肺癌手术.双腔支气管导管行肺隔离.2例患者均获得满意的麻醉效果,无围术期并发症,均顺利出院.非体外循环下OPCABG同期行肺癌手术患者术中循环和呼吸管理复杂,应引起麻醉医师关注并积极处理.     

浅谈多媒体在数学教学中的运用

多媒体教学能向学生提供并展示多种类型的资料,包括文字、声音、图像、动画等,并能灵活选择与呈现;可以创设、模拟多种与教学内容适应的情境;能为学生从事数学探究提供重要的工具.因此在平时教学过程中,巧妙地运用多媒体教学,可以展示与学习有关的学习情境,展示丰富的学习资源,激发学生的学习热情,帮组学生理解复杂的数学概念,领会数学实质,掌握数学知识,学会探究方法,提升数学能力,从而提高课堂学习的效率.     

血液灌流联合二巯基丙醇救治急性毒鼠强中毒的临床研究

目的研究血液灌流（HP）联合二巯基丙醇救治急性毒鼠强中毒的临床疗效及患者血清β-内非肽（β-EP），内皮素（ET），一氧化氮（NO），肿瘤坏死因了（TNF）在病程中的变化。方法将湖南省怀化市第二人民医院急诊科1996年6月-2004年12月收治的56例患者分为A、B、C三组。①C组（常规＋药物＋HP）（n=20）与B组（常规＋药物）（n=19）急性毒鼠强中毒39例患者，分别在入院后即刻、HP或入院后1、3、5、7、9、11d从外周静脉抽血2ml，测定β-EP、ET、NO与TNF。②A组（常规组）（n=17）为既往采用安定、苯巴比妥抗惊厥等一般救治措施；B组采用在A组治疗基础上加用二巯基丙醇治疗：C组在B组治疗基础上采用HP联合治疗。结果①C组和B组35例治愈者中，β-EP、ET、NO与TNF在C组均于入院后即刻达高峰，在B组均于入院后1d达高峰，随后均缓慢下降。C组和B组35例治愈者治疗后B—EP、ET、NO与TNF对应指标比较，C组较B组均有显著性降低。②C组和B组患者治愈率比A组均有显著性提高。C组中的安定和苯巴比妥用龟、止惊时间比B组、A组均有显著性减少；B组中的安定和苯巴比妥用量、止惊时间比A组均有显著性减少。结论HP联合二巯基丙醇救治急性毒鼠强中毒临床疗效优于单纯二巯基丙醇和常规救治措施，可以明显降低患者B—EP、ET、NO与TNF水平，可作为治疗急性鼠毒强中毒的一种较为理想方案。     

改良Brisson术治疗小儿隐匿性阴茎的远期随访结果

目的 探讨改良Brisson术治疗小儿隐匿性茎的远期疗效.方法 回顾2003年1月至2005年12月在本院用改良Brisson术治疗的隐匿性阴茎病例,通过电话访问的形式让家长回答问卷,根据问卷结果评价治疗的远期疗效.结果 在成功受访的39例患儿家长中,患儿术后症状改善36例(92.3％);手术能明显改善家长对患儿阴茎显露的满意率(P＜0.01);手术有助于减轻家长对患儿阴茎显露欠佳的心理负担(P＜0.01);但对学龄期儿童,手术似乎对他们的心理状况改善帮助不大(P＞0.05).对于手术后整体外观效果有21例表示满意(53.8％),13例表示较满意(33.3％),5例表示不满意(12.8％).家长对手术效果评分平均为(8.27±1.39)分(满分10分);其中38例(97.4％)患儿家长表示会把该手术推荐给有类似情况的亲戚或朋友.结论 改良Brisson术治疗隐匿性阴茎能得到较为满意的远期效果.     

大肠腺癌和腺瘤AEG-1基因的表达及意义

目的探讨AEG-1在大肠癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化的方法检测60例正常大肠粘膜、22例大肠腺瘤和60例大肠腺癌中AEG-1的表达。结果大肠腺癌和腺瘤中AEG-1的阳性率分别为91.7%和90.9%,明显高于正常大肠粘膜组织的23.3%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.001）,其中大肠腺癌的中度阳性率和强阳性率分别为31.7%和60%,而大肠腺瘤分别为63.6%和27.3%,两者差异具有统计学意义（P=0.019）;对大肠腺癌中AEG-1表达与肿瘤临床病理特征做相关性分析,结果表明,AEG-1表达强度与肿瘤T、N分期显著正相关（P〈0.05）。结论 AEG-1在大肠癌和大肠腺瘤中表达增强,在大肠腺瘤恶变、大肠癌发生发展过程中发挥重要作用,可作为诊断大肠癌新的生物标记物。     

右侧双腔支气管导管用于肺切除手术气道管理:2 504例回顾性研究

双腔支气管导管是单肺通气中最常用的气道管理工具[1].传统的观点认为,右侧双腔支气管导管易引起右肺上叶支气管开口阻塞,因而其不受欢迎[1].左侧双腔支气管导管仍是当今单肺通气气道管理的主流.     

高表达Ck2β与大肠癌发生和转移的相关性研究

摘要：目的探讨ck2β蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中的表达及其在大肠癌发生及转移中的作用。方法
采用免疫组化方法检测46例正常大肠粘膜组织、20例大肠腺瘤及66例大肠癌组织中ck2β蛋白的表达。用RNA干扰技术
沉默大肠癌细胞中ck2β蛋白表达,Western blot 实验检测干扰效果;平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;Transwell
侵袭小室实验检测细胞侵袭能力的变化。结果ck2β在正常大肠粘膜组织中不表达或弱表达,核表达阳性率为
8.7%,浆表达阳性率为13.0%;在大肠腺瘤组织中中度表达,60%呈核阳性表达,40%呈浆阳性表达;而在大肠癌组织中,
ck2β呈强阳性表达,核表达阳性率为75.8%,浆表达阳性率为62.1%,三者间差异有统计学意义(P<0.05)。ck2β蛋白表达与
大肠癌的淋巴结转移密切相关,伴发淋巴结转移的大肠癌组织ck2β阳性表达明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。体外实
验发现,沉默大肠癌细胞中ck2β的表达能显著抑制细胞的增殖及侵袭能力。结论ck2β蛋白的表达与大肠癌的发生和转
移密切相关。
     

肝细胞癌组织中microRNA表达谱研究

目的 检测人肝癌组织和对应的肝硬化组织microRNA表达的差异谱,为研究microRNA在肝细胞癌变机制中的作用提供实验基础.方法 Trizol法提取25例配对的肝癌和肝硬化组织总RNA,microRNA芯片分析肝癌和肝硬化组织中差异表达microRNA,实时定量PCR验证芯片的结果 .结果 肝癌与肝硬化组织间差异表达的microRNA共12个,其中3个表达上调,9个表达下调.实时荧光定量PCR结果 与芯片一致.结论 肝癌和肝硬化组织存在差异表达的microRNA,这些上调和下调表达的microRNA可能参与了肝癌的发生.