脑电双频指数在调控丙泊酚镇静深度中的价值

目的 探讨危重症患者脑电双频指数对丙泊酚镇静深度调控的价值.方法 选取重症监护病房66例危重症患者,静脉持续泵入丙泊酚,以Ramsay评分3～4为镇静目标,连续观察24 ～ 72 h,记录每半小时的Ramsay评分及对应的BIS值,共监测Ramsay评分及相应BIS值202组,分析Ramsay评分与BIS值的相关性,确定镇静适度时所对应的最佳BIS值.结果 ICU危重症患者丙泊酚镇静期间Ramsay评分与BIS值呈负相关,r=-0.876（P＜0.01）.结论 脑电双频指数是调控丙泊酚镇静深度的有效指标.     

稳心颗粒治疗心房颤动的随机对照试验质量评价

目的:调查稳心颗粒治疗房颤随机对照试验(RCT)文献质量。方法:采用Jadad评分量表、CONSORT标准进行评价。结果:共检索到符合纳入标准的RCT文献66篇。采用Jadad量表评分,其中4分2篇,3分1篇,2分54篇,1分7篇,0分2篇。仅2篇文章描述采用随机数字表分组,无1例报道如何执行随机隐藏,1篇文章中提及盲法,文章中提及失访情况的有59篇(89.4%),按照CONSORT标准,仅6篇(9.1%)描述了如何产生随机序列,其中4篇(6.1%)为半随机,19篇(28.8%)有纳入标准,有6篇(9.1%)文章提及随访记录,51篇(77.3%)描写了不良事件,均未进行样本含量计算、意向性分析和分层分析,均未报道伦理审查和知情同意情况。结论:目前稳心颗粒治疗房颤的临床研究较多,在研究设计方法、文章报告全面性、质量等方面有待提高。     

人Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离培养及表型维持研究

目的 建立人Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)分离、纯化、原代培养及鉴定的方法,探索体外培养的表型维持情况.方法 取手术切除的边缘肺组织,用胰酶、弹性蛋白酶联合法消化分离人ATⅡ细胞粗悬液,经过滤、差速贴壁、密度梯度分离、磁珠分选纯化.用肺表面活性蛋白C前体(pro-SP-C)免疫荧光、溶酶体绿色荧光染料(GreendND-26)荧光探针染色以及透射电镜鉴定人ATⅡ细胞;用pro-SP-C免疫荧光法和GreenDND-26荧光探针染色法评估细胞纯度;锥虫蓝染色法评估细胞活性;并运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测体外培养过程中肺表面活性蛋白(SP-A、SP-B、SP-C、SP-D)的表达情况.结果 人ATⅡ细胞产量为(5～10)×105/g;锥虫蓝染色细胞活性为(93±2)％;pro-SP-C免疫荧光、GreendND-26荧光探针鉴定、评估细胞纯度一致,为98％左右,透射电镜下观察ATⅡ细胞特有的板层小体结构清晰可见.SP-A、SP-C表达持续时间在24d左右(SP-A 16d:0.52±0.03,20d:0.35±0.02,24d:0.26±0.01,28d:0.10±0.08;SP-C 16d:0.68±0.16,20d:0.31±0.04,24d:0.18±0.06,28d:0.14±0.09),SP-B、SP-D表达持续时间可在28d左右(SP-B 16d:1.05±0.17,20d:0.76±0.35,24d:0.55±0.15,28d:0.36±0.19;SP-D 16d:0.52±0.19,20d:0.33±0.12,24d:0.31±0.04,28d:0.23±0.02).结论 成功建立了一种分离、纯化及鉴定人ATⅡ细胞的方法,此方法能较持久维持ATⅡ细胞表型.     

机械牵张对人肺血管内皮细胞通透性的影响及其分子机制

目的观察机械牵张对人肺动脉内皮细胞（HPAEC）和人肺微血管内皮细胞（HPMVEC）通透性的影响及对通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5和Caveolin-1表达的调控。 方法采用机械牵张装置Flexcell FX-5000T对HPAEC（ATCC）和HPMVEC（ATCC）施加0.5 Hz频率10%或20%牵张应力。应用qRT-PCR及Western Blot方法检测机械牵张前后内皮通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5、Caveolin-1 mRNA和蛋白含量表达变化。采用细胞动态分析仪以及Transwell小室/异硫氰酸荧光素（FITC）-白蛋白法检测机械牵张后的HPAEC细胞和HPMVEC细胞通透性改变。 结果20%机械牵张后，与对照组比较，HPAEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达、Claudin-5 mRNA和蛋白表达和Caveolin-1 mRNA表达均下降（P<0.05），而Caveolin-1蛋白水平较对照组无明显变化；HPMVEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达，Caveolin-1 mRNA和蛋白表达均下降（P<0.05），而Claudin-5 mRNA和蛋白水平较对照组无明显变化。 结论机械牵张会导致肺血管内皮通透性增高，是通过下调通透性关键蛋白的表达，并且两种细胞的通透性影响机制有差异，HPAEC牵涉紧密连接，HPMVEC牵涉跨内皮细胞途径。     

肺炎克雷伯菌Ⅰ型整合子的检测与鉴定

目的研究Ⅰ型整合子参与肺炎克雷伯菌耐药的分子机制。方法收集2007年至2010年某院临床分离的297株肺炎克雷伯菌,应用K-B纸片扩散法检测耐药性,采用聚合酶链式反应进行I类整合子整合酶基因的检测;整合子可变区扩增、克隆测序,分析I类整合子基因结构。结果 297株肺炎克雷伯菌中,除MEM、IPM外,对其余11种抗菌素,Ⅰ类整合酶基因阳性菌株的耐药率明显高于Ⅰ类整合酶基因阴性菌株。57.91%(172/297)的菌株I类整合子整合酶基因阳性,共检测出10种不同基因盒。可变区编码耐药基因有aadA2、aadA1、aadA5、aadA3C、aacA4,介导氨基糖苷类抗菌素耐药;dhfrhI、dfrA12、dfrA14、dfrA17、dfrA1、dfrA25、dhfrhI,介导磺胺类抗菌素的耐药;aar-2,介导利福平耐药。结论Ⅰ类整合子在本院临床分离肺炎克雷伯菌中分布较广泛,主要介导氨基糖苷类和磺胺类抗菌素耐药。整合子与肺炎克雷伯菌的耐药有关,在肺炎克雷伯菌耐药性的形成和播散中具有重要作用。     

ICU分离的多重耐药鲍曼不动杆菌PFGE分型及Ⅰ型整合子介导的耐药研究

目的了解某院重症监护室(ICU)分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR AB) Ⅰ型整合子阳性率,并分析MDR AB的同源性,探讨Ⅰ型整合子参与耐药、传播的分子机制。方法收集2008年1月-2009年12月该ICU分离的40株MDR AB,采用K B纸片扩散法检测其耐药性,聚合酶链反应（PCR）进行Ⅰ类整合子可变区扩增、克隆测序,分析Ⅰ类整合子基因结构。应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析MDR AB的同源性。结果75.00%(30/40)的菌株Ⅰ类整合子阳性,共检测出两种基因盒,分别为aacA4 catB8 aadA1和aacC1 orfX orfX orfX’ aad A1。PFGE结果表明,40株菌分为4个克隆, 其中有26株属于B克隆, 为主要流行菌株型。结论Ⅰ类整合子在MDR AB中广泛存在,可能通过水平传播方式在ICU中传播。携带aacA4 catB8 aadA1整合子的MDR AB引起了ICU鲍曼不动杆菌的流行。
     

两种铜绿假单胞菌同源性分析方法比较

目的了解脂肪酸气相色谱分析方法能否应用于铜绿假单胞菌的同源性分析。方法收集某院2008年1—12月重症监护室住院患者痰标本分离的26株多重耐药铜绿假单胞菌,分别应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和脂肪酸气相色谱分析方法进行同源性分析,比较两组结果。结果 PFGE结果表明,26株菌有6个克隆;脂肪酸气相色谱分析显示,26株菌存在4个克隆,符合率仅26.92%(7/26)。结论脂肪酸气相色谱分析方法在菌株同源性判断的准确性上与PFGE分型有差距,其应用于铜绿假单胞菌的同源性分析仍需谨慎。     

羟苯磺酸钙治疗慢性肾功能衰竭临床观察

目的：观察羟苯磺酸钙治疗慢性肾功能衰竭的临床疗效。方法随机将慢性肾衰竭患者（Ⅱ-Ⅳ期）分成羟苯磺酸钙治疗组及对照组,每组37例。对照组给予慢性肾功能衰竭常规综合治疗,观察8周;治疗组在给予慢性肾功能衰竭常规治疗的基础上使用羟苯磺酸钙,每次0.5 g,每日3次,观察8周。结果分别观察2、4、8周治疗组尿素氮、血肌酐均有明显下降（P＜0.01）,尿蛋白、肝功能及血小板等变化无显著意义,对照组肌酐变化无统计学意义（P＞0.05）,尿素较治疗前降低（P＜0.05）。结论羟苯磺酸钙治疗各种原发病引起慢性肾功能衰竭安全有效,可延缓病情进展。