交联型异体脱细胞巩膜行眼部修复的试验研究

目的 将交联型异体脱细胞巩膜植入眼睑,研究其组织相容性及抗原性变化.方法 将20只新西兰大白兔随机平均分为两组,去除睑板后,分别植入兔交联型脱细胞巩膜和异体巩膜,于植入后1、4、8、12周观察全身及局部光镜和免疫学变化.结果 脱细胞巩膜和异体巩膜植入眼睑后第1周、4周、8周,两组间外周血IgG、IgA、IgM、C3、C4和CD4+T细胞、CD8+T细胞定量均无明显差异.术后1周、4周、8周、12周,植入局部的光镜显示:脱细胞巩膜组的炎症反应和淋巴细胞浸润要小于异体巩膜组,8周后植入的异体巩膜组织中央部发生少量坏死溶解现象,术后12周两组成纤维细胞及血管完全长入植片.术后1、4、8周,局部CD4+T及CD8+T细胞计数显示脱细胞巩膜组明显少于异体巩膜组.结论 兔脱细胞巩膜植入眼睑后引起的免疫反应较同种异体巩膜小.     

氯化锂通过TGFBI促进角膜基质成纤维细胞增殖和自噬

目的：研究TGFBI和微管相关蛋白轻链3(LC3)在角膜营养不良患者中的表达,及氯化锂(LiCl)通过TGFBI对角膜基质成纤维细胞增殖能力的影响。

方法：用免疫组化和Western-blot方法检测角膜营养不良及正常角膜组织中TGFBI和LC3的表达。实验构建了TGFBI过表达载体并转染角膜基质成纤维细胞,分别以5、10、20、40mmol/L LiCl作用于突变型TGFBI转染的角膜基质成纤维细胞,检测不同时间(0、1、6、12h)后,TGFBI与LC3蛋白表达变化,并用CCK-8法检测细胞增殖活性。

结果：TGFBI和LC3在角膜营养不良患者角膜组织中显著高表达。TGFBI过表达抑制角膜基质成纤维细胞增殖活性(P<0.05)。LiCl抑制突变型TGFBI转染的角膜基质成纤维细胞中TGFBI和LC3蛋白表达,并增强其细胞增殖活性(P<0.05)。

结论：LiCl可以促进角膜基质成纤维细胞增殖活性和自噬,其作用机制与下调TGFBI和LC3的表达有关。     

交联型异体脱细胞硬脑膜行眼部修复的形态学及抗原性研究

目的将交联型异体脱细胞硬脑膜植入眼部，研究其组织相容性及抗原性变化。方法将20只新西兰大白兔随机平均分为两组，去除睑板后，分别植入兔交联型脱细胞硬脑膜和异体硬脑膜，于植入后1、4、8周观察全身免疫学指标的变化；并行光镜和免疫组织化学检查。结果脱细胞硬脑膜植入眼部后炎症反应轻，外周血IgA、IgM、C3和CD^4＋T细胞、CD^8＋T细胞的改变无明显差异，脱细胞组外周血IgG（术后1周）和植入局部的CD^4＋T细胞、CD^8＋T细胞浸润明显少于异体硬脑膜组。结论脱细胞硬脑膜植入眼睑后引起的免疫反应较异体硬脑膜小。     

脱细胞生物材料及其在眼部的临床应用

多种原因引起的眼睑退缩、眼睑缺损、眶周组织缺损、义眼台暴露等均需要合适的组织替代物植入到相应部位,而临床上常用的自体、异体及人工合成组织存在着操作方法复杂、炎症和排斥反应明显、组织相容性差等缺陷。以胶原为主要成分的脱细胞组织作为组织替代物可有效地避免上述并发症的出现,植入眼部进行睑板替代、眶周修复后能够介导宿主血管及成纤维细胞的长入,并维持正常的构型,而且植入局部的炎症及排斥反应轻微,是较理想的生物工程材料。     

新生儿急性细菌性结膜炎10年致病菌变迁

对1998～2007年临床确诊的新生儿急性细菌性结膜炎的细菌培养结果进行分析,探讨其致病菌10年的变迁,为临床治疗、合理用药提供依据.方法 对325例(466只眼)经临床诊断为新生儿急性细菌性结膜炎患儿的结膜囊分泌物标本进行细菌培养,同时对培养阳性的菌株进行鉴定分析.结果 新生儿急性细菌性结膜炎的细菌平均检出率为80%.不同年分的细菌检出率变化无明显差异(x2=0.83,P＞0.05).10年来,新生儿急性细菌性结膜炎的致病菌中革兰阳性细菌有逐渐减少、革兰阴性细菌有逐渐增加的趋势.在革兰阳性细菌中,条件致病菌(表皮葡萄球菌和腐生匍萄球菌)所占的百分比有逐年增加的趋势,金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌所占的百分比则有逐年减少的趋势.在革兰阴性菌中,淋球菌为主要致病菌.10年来,表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和淋球菌在新生儿急性细菌性结膜炎的致病菌中有逐渐增加的趋势.结论 对新生儿急性细菌性结膜炎患儿的结膜囊分泌物标本进行细菌培养、药物敏感试验既助于提高临床治疗,又可防止临床滥用抗生素、造成耐药菌株的增加.对于严重的新生儿急性细菌性结膜炎,早期可慎片喹诺酮类抗生素滴眼液治疗,待细菌培养和药物敏感试验结果报告后再结合治疗情况修改治疗方案.

Abstract：

Objective To study the results of bacterial culture from the inferior palpebral conjunctival surface of neonate with acute bacterial conjunctivitis and research the transition of bacterial pathogens in recent 10 years for sensitive antibiotics for its treatment,and to provide the basis for rational drug use for clinical treatment.Methods Secretion specimens were taken from 466 eyes of 325 cases with clinically diagnosed acute bacterial neonatal conjunctivitis for bacterial culture,and drug sensitivity test was carried out for specimens with positive culture results.Results Bacterial positive rate was 80% with insignificant changes among the different years.The past 10 years,neonatal conjunctivitis of acute bacterial pathogens,Gram-positive bacteria had a gradual downward trend;Gram-negative bacteria had a gradual upward trend.In Gram-positive bacteria,the percentage of opportunistic pathogen (Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus saprophytic) was a rising trend,the percentage of Staphylococcus anreus and hemolytic streptococcus was a decreasing trend.In the Gram-negative bacteria,the main pathogenic bacteria were Neisseria gonorrhoeae.Staphylococcus epidermidis,Staphylococcus saprophytic and Neisseria gonorrhoeae in neonatal pathogens of acute bacterial conjunctivitis had a gradual upward trend in recent 10 years.Conclusions Bacterial culture combined with drug sensitivity test of secretion specimens of the acute bacterial neonatal conjunctivitis are beneficial not only for clinical treatment,but also to guide clinical practice in preventing antibiotics misuse and causing an increase in resistant strains.For serious neonatal acute bacterial conjunctivitis,the early quinolone antibiotic eye drops can be used with caution.After the results of bacterial culture and drug sensitivity test,the treatment programs should be modified.     

好医生的评价标准和医生不良表现之浅析

如何评价医生的优劣,怎样克服与杜绝行医过程中的不良行为,从而整肃行风,提高医德境界已是一项重要的研究课题。笔者在广泛调查的基础上归纳出了称好医生的１４条标准和城市综合医院医生中存在的具有代表性的５类不良表现。同时对其从医学伦理学医学社会学、卫生人才学以及医学教育、医院管理等角度进行了分析与理论、以期对卫生事业建设有所裨益。     

不同光源共焦显微镜的活体正常角膜图像研究

目的 分别采用卤素灯光源共焦显微镜和激光光源共焦显微镜对中国正常成人活体角膜各层组织结构进行观察,对照研究其图像特征.方法 对35例(70只眼)中国成人(年龄18～55岁)中央部角膜分别采用卤素灯光源共焦显微镜和激光光源共焦显微镜进行检查,研究角膜各层结构的图像特点,并进行对比.结果 共焦显微镜检查的35例(70只眼)中,67只眼95.7％成功获得了角膜上皮翼状细胞层的图像,70只眼100％成功获得角膜上皮基底细胞层、前弹力层、前基质层、后基质层及角膜内皮细胞层的图像.结论 卤素灯光源共焦显微镜的放大倍数是1000倍,细胞放大倍数大,近似于初级电镜的放大倍数,但卤素灯光源的组织穿透力较弱,光源易衰减,所得的角膜各层细胞图像较激光角膜共焦显微镜的略微模糊,所得角膜各层图像总体颜色偏灰、结构偏模糊.激光角膜共焦显微镜的放大倍数是800倍,较卤素灯光源的共焦显微镜略小,但激光光源的组织穿透力强,所得角膜各层细胞图像较卤素灯光源的更清晰,而且在特定角度可获得非常类似角膜组织病理学切片的图像.     

暗场显微镜联合角膜激光共焦显微镜在非典型真菌性角膜溃疡的应用研究

目的 对非典型的真菌性角膜溃疡患者(角膜刮片取材,涂片镜检不能确诊的真菌性角膜溃疡),采用暗场显微镜联合角膜激光共焦显微镜检查进行观察研究,并归纳总结其临床特点.方法 23例(23只眼)非典型的真菌性角膜溃疡患者,在角膜刮片取材培养前采用激光角膜共焦显微镜对溃疡灶进行活体检查,然后进行角膜刮片取材,涂片常规镜检和暗场显微镜检查,研究其图象特点,并进行对比研究.结果 非典型真菌性角膜溃疡灶中的真菌菌丝在活体角膜激光共焦显微镜中结构不完整、成像不清晰;在常规镜检下,成像不清甚至难以成像;但采用暗场显微镜检查能发现清晰的真菌菌丝.结论 暗场显微镜观察非典型真菌性角膜溃疡有着独特的优点,该方法联合常规涂片镜检及共焦显微镜检查能提高对非典型真菌性角膜溃疡的诊断水平.     

改良聚羟乙基丙烯酸甲酯-聚甲基丙烯酸甲酯一体化人工角膜植入兔与猴角膜的实验研究(英文)

目的:探讨聚羟乙基丙烯酸甲酯(PHEMA)海绵支架材料与角膜组织的生物相容性,评价改良聚羟乙基丙烯酸甲酯(PHEMA)—聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)一体化人工角膜植入兔与猴角膜的初步临床效果。方法:通过两个阶段化学聚合结合车床机械切削合成改良的一体化人工角膜。实验分为两个部分完成。第1部分(A组):将PHEMA海绵边裙材料植入10只正常兔角膜板层间,术后2,4wk及2,3,4mo分别行组织病理、免疫组织化学及电镜检查,观察海绵边裙与角膜组织的生物学愈合情况。第2部分(B组):8只兔眼和2只猴眼角膜囊袋内I期植入一体化人工角膜,术后临床观察材料与组织的愈合情况;术后3mo时行Ⅱ期手术切除术眼角膜中央前板层角膜组织,暴露人工角膜中央镜柱,术后随访时间3 ～6mo,初步观察临床治疗效果。结果:1)A组接受角膜板层间边裙植入术的10只兔眼,随访期间未见并发症:组织病理学显示,PHEMA海绵边裙材料植入术后2wk始有成纤维细胞长入,术后2 ～3mo时多量成纤维细胞长入并伴有新生血管生长;免疫组织化学显示,海绵孔隙中长入的细胞和角膜基质细胞均对波形蛋白免疫反应呈阳性;电镜下可见,成纤维细胞在海绵材料间隙中生长,细胞生长状态良好,并分泌胶原和细胞外基质。2)B组接受一体化人工角膜移植术的,6只兔眼一体化人工角膜均在位,另2只兔眼I期术后有前板层角膜基质融解。接受一体化人工角膜移植术的2只猴眼,I期和Ⅱ期术后均未见明显并发症。结论:PHEMA海绵能与角膜组织良好的生物学愈合;改良PHEMA-PMMA一体化人工角膜植入术后能获得相对稳定的治疗效果。     

microRNA-126在多能干细胞定向分化为视网膜神经干细胞过程中表达量的变化及意义

目的 研究microRNA-126(miR-126)在湿性老年黄斑变性(wet AMD)疾病患者来源的多能干细胞(iPSC)定向分化为视网膜神经干细胞(RNSC)中表达量的变化及意义.方法 选取新发现的wet AMD患者10例作为观察组,无眼底病变及全身病的10例作为对照组.抽取受试者的外周静脉血,提取单个核细胞(PBMC),进一步提取CD34+细胞,行腺病毒转染,诱导产生iPSC且进行鉴定;应用实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-126在10个不同诱导发育阶段的RNSC中的相对表达量.结果 wet AMD疾病患者的外周血成功诱导分化出RNSC;观察组miR-126的不同诱导时间相对表达量的差异除了时刻8、9、10其余测试时间点均有统计学意义(P<0.05);对照组miR-126的不同诱导时间相对表达量的差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照组细胞miR-126相对表达量在不同诱导时间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 wet AMD患者早期miR-126的表达量显著升高,且有逐渐降低的趋势.