血清苯丙氨酸、酷氨酸的高效毛细管电泳分析

目的 建立和完善用高效毛细管电泳（HPCE）快速测定血清中苯丙氨酸（Phe）和酪氨酸（Tyr）的方法。方法 用HPCE检测7例正常儿童和10例苯丙酮尿症息儿血清中苯丙氨酸和酪氨酸，用苯丙氨酸和酪氨酸标准液测定后绘制校正曲线，并使用高效液相色谱法（HPLC）对部分标本同步测定进行比较。结果 对HPCE实验条件和电泳条件进行优化和选择，最终采用：水浴温度50℃，水浴时间40min，硼酸钠缓冲溶液pH为9．8，分离电压28kV，分离温度15℃。苯丙氨酸迁移时间为6．8min，酪氨酸迁移时间为5．9min;用HPCE检测苯丙酮尿症患儿血清中Phe和Tyr的水平，与HPLC的检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 该方法快速、简便、准确、灵敏度高，为临床检测苯丙酮尿症提供了一种有效的方法。     

亚低温对重型颅脑损伤患者T细胞亚群及预后的影响

目的研究亚低温对急性重型颅脑损伤患者T细胞亚群及预后的影响。方法重型颅脑损伤患者共40例,随机分为亚低温组和对照组,亚低温组20例,于伤后24 h内行亚低温治疗,直肠温度控制在32~34℃,持续1~7 d;并监测患者的生命体征、颅内压（ICP）、血糖、血气、血电解质等治疗;对照组20例,除未应用亚低温治疗外其余治疗相同;亚低温组和对照组分别于伤后第1、3、7 d取外周静脉血采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8阳性细胞及CD4/CD8阳性细胞比值,两组间进行比较。伤后3个月时根据GOS评估法判定疗效。结果亚低温组和对照组之间比较,伤后第1、3、7 d T细胞亚群无统计学差异;预后比较,有统计学差异。结论亚低温治疗重型颅脑损伤可以提高患者的预后,不会加重T细胞免疫功能损伤,临床应用安全有效,有良好的临床应用前景。     

联合检测血清和胸水中多项肿瘤标志物对良恶性胸水的鉴别诊断价值

目的：探讨联合检测血清、胸水（胸腔积液）中人组织多肽特异性抗原（TPS）、可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFR）、恶性肿瘤生长因子（TSGF）、癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角质蛋白19片断（CYFRA21-1）对良恶性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法：79例临床已确诊的胸腔积液患者（恶性47例,结核性32例）的血清和胸腔积液采用酶免疫法进行TPS、sTNFR、TSGF、CEA、NSE、CYFRA21-1含量测定。结果：恶性胸腔积液患者的6种肿瘤标志物水平均明显高于良性疾病组,差异有统计学意义（P〈0.05）。联合检测血清及胸腔积液6项指标,平行试验对恶性胸腔积液诊断的敏感度为95.7%,特异度为59.4%,准确度为81.0%,Youden指数为0.6,较检测单一指标提高了诊断的敏感度、准确度及Youden指数;序列试验则对恶性胸腔积液诊断的敏感度为48.9%,特异度为93.8%,准确度为67.1%,Youden指数为0.4,较检测单一指标提高诊断的特异度、准确度及Youden指数。结论：联合检测血清、胸腔积液中TPS、sTNFR、TSGF、CEA、NSE、CYFRA21-1对良恶性胸腔积液的鉴别诊断有重要价值,能提高诊断准确率。     

全反式视黄酸及干扰素对胃癌细胞系MKN45中p16、p21、c-myc基因表达的影响

目的探讨全反式视黄酸(ATRA)及干扰素(IFN)对胃癌MKN45细胞的影响。方法将ATRA及IFN同时加入胃癌细胞系MKN45培养体系中,MTT法测定细胞生长状况,Northern Blot和免疫组化测定p16、p21及c-myc表达情况。结果 IFN、ATRA联合用药可有效抑制MKN45细胞生长,细胞p16和p21表达水平升高,c-myc表达水平下降。视黄酸受体RARα在MKN45细胞中呈低水平表达,经ATRA和IFN诱导后表达水平升高。结论 ATRA、IFN联合用药可调节p16和p21表达水平,抑制胃癌MKN45细胞生长,可能与RARα高水平表达有关。     

高效毛细管电泳法分析妊高征患者血清免疫球蛋白和补体

目的探讨应用高效毛细管电泳法分析妊高征患者体液免疫功能变化。方法采用毛细管电泳技术建立了血清IgG和C3毛细管自由区带电泳分析方法。运行缓冲液为50mmol/LTris盐缓冲液（pH8.30）;分离电压15kV,压力进样20pis×sec,200nm检测;分离温度25℃。结果妊高征血清IgG和C3的浓度均比正常妊娠明显降低（P〈0.05）。结论该方法稳定、重复性好,毛细管自由区带电泳可作为临床实验室分析血清蛋白常规分析方法。     

妇女生殖泌尿道解脲脲原体和人型支原体培养、分离鉴定、计数及药敏分析

目的:探讨女性生殖泌尿道解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染及耐药情况,为临床提供用药参考。方法:采用解脲脲原体和人型支原体培养分离鉴定、计数、药敏试剂盒,对我院妇科门诊疑似非淋菌性尿道炎(NGU)女性患者,取宫颈拭子进行支原体培养、鉴定及药敏试验。结果:2662例疑似非淋菌性尿道炎患者中,总的支原体检出率为59.6%,其中主要为解脲脲原体,检出率为46.5%,人型支原体感染检出率为13.1%,混合感染检出率为3.3%。药敏结果表明支原体主要对强力霉素(DOX)(81.3%)、美满霉素(M IN)(79.2%)、交沙霉素(JOS)(75.9%)、克拉霉素(CLA)(72.6%)等抗生素敏感,对阿奇霉素(AZI)、氧氟沙星(OFL)、左旋氧氟(LEV)等抗生素为中介,对罗红霉素(ROX)、司帕沙星(SPA)等抗生素耐药。结论:解脲脲原体和人型支原体是女性生殖泌尿道感染的主要病原体,其中感染率UU>Mh,且混合感染已是一个越来越严重的问题。支原体对罗红霉素、司帕沙星等抗生素有较高的耐药性,对强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素等抗生素敏感,并提示该类抗生素可作为治疗NGU支原体感染的首选药物。     

胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺与胃癌BGC-823细胞系P16、P21蛋白的表达研究

目的：探讨丙谷胺（PGM）抑制胃癌BGC-823细胞增殖及胃泌素的促增殖作用，通过P16及P21蛋白表达的变化，为内分泌途径治疗胃癌提供理论依据，并提供内分泌途径治疗癌症疗效的指标。方法：通过体外细胞培养及对癌细胞进行分组实验研究，应用免疫荧光技术及Northern blot方法测定癌细胞内P16及P21蛋白的表达情况。结果：P16蛋白的表达量随PGM的抑癌作用而升高，两者呈负相关；P21蛋白的表达量与PGM的抑癌作用无明显相关。结论：丙谷胺作为胃癌的一种内分泌治疗手段，可采用P16的表达情况作为其疗效的一个指标。     

血小板对ECV304细胞PTA1表达和PDGF释放的影响

目的:探讨血小板对妊高征患者血清刺激下的ECV304细胞(ECV304)表达人血小板/T细胞活化抗原1(PTA1)和释放血小板衍生生长因子(PDGF)的影响。方法①用间接免疫荧光染色结合流式细胞仪分析观察血小板与妊高征患者血清刺激的ECV304细胞孵育前后PTA1的表达②用ELISA方法检测血小板与妊高征患者血清刺激的ECV304细胞孵育前后PDGF的量。结果:①血小板与妊高征患者血清刺激(24h、48h)的ECV304细胞孵育后PTA1表达的百分率(6.32%、4.13%)明显低于对照组(15.51%、5.64%)(P<0.05)。②妊高征患者血清刺激ECV304细胞8h、24h、48h释放PDGF的量(1593、2625、2175ng/L)明显高于正常孕妇组(235、405、133.5ng/L)差异显著(P<0.01)。③血小板与妊高征患者血清刺激的ECV304细胞孵育后,24h、48h细胞培养上清液中PDGF-B的量又进一步增加(3266、2360ng/L),与对照组比差异显著(P<0.05)。结论:ECV304细胞与血小板之间的黏附可能是通过PTA1分子发挥作用的,同时导致了PDGF的进一步释放。     

苯酮尿症中脑蛋白异常表达与脑损伤关系的研究

苯酮尿症可影响脑的发育,造成严重的智力发育障碍和累进性精神障碍,然而脑损伤的机制仍不十分明了。近来一系列研究发现,苯酮尿症小鼠模型脑内多种蛋白表达异常,导致了脑内离子通道和信号传导异常、神经元死亡、脱髓鞘、大脑胞吞途径的改变和γ氨基丁酸减少,可能是苯酮尿症脑损伤的重要原因。     

COPD患者血清IL-18和sFas/sFasL的水平及意义

目的 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清白细胞介素18(IL-18)和可溶性Fas／可溶性Fas配体(sFas／sFasL)的变化及相关性，探讨它们在COPD发病机制中的作用及意义。方法 用ELISA法检测36例COPD急性加重期患者、20例健康对照者血清IL-18和sFas／sFasL的水平。结果 COPD患者血清sFasL及IL-18水平显著低于健康对照组，而sFas与对照组比较无显著性差异。结论 COPD息性加重期sFasL水平低下，提示COPD患者存在细胞凋亡水平下降，而IL-18水平下降可能提示其抗感染免疫不足。均可能是引起肺内慢性炎细胞异常浸润并导致肺实质破坏的原因之一。