杭州市肠道病毒71型的分离与VP1区域序列分析

目的了解杭州市2008年和2011年肠道病毒71型(EV71)流行株VP1基因特征。方法手足口病患者咽拭子、粪便等样本先通过荧光RT-PCR方法初筛,然后选部分肠道病毒71型阳性样本进行病毒分离、培养;通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定上述培养物,并扩增VP1区全长基因和序列测定,利用生物信息学软件对序列进行分析,构建基因进化树。结果从2008年和2011年手足口样本中分离到EV71阳性毒株各4株,VP1基因全序列测定结果显示其与C4亚型代表株核苷酸和氨基酸的相似性最高,分别为93.8%～95.2%、99.0%～99.7%。结论杭州市手足口病患者感染EV71病毒的流行株属C基因型的C4亚型。     

杭州市2004-2005年流行季节脑膜炎奈瑟菌检测

为了及时发现和掌握流行性脑脊髓膜炎疫情动态，本实验室采用常规的培养分离和分子生物学技术相结合的方法，对本地区疑似流脑患者脑脊液（CSF）标本进行实验室检测。     

2013年杭州市人感染H7N9禽流感病例分布特征及暴露来源分析

2013年3月在我国上海和安徽两地首先发现人感染H7N9禽流感病例,疫情迅速波及到杭州地区,共报告30例人感染H7N9禽流感确诊病例。为此对30例确诊病例的分布、暴露史及其传播来源进行探讨。     

O139群霍乱弧菌的核糖体基因分型及其与药物抗性相关性研究

目的了解杭州市及浙江省部分地区O139群霍乱弧菌分离株的核糖体基因分型特征及其与抗生素抗性关系。方法对1994~2004年杭州市分离的105株及2000年浙江省部分地区分离的5株O139群菌株,PCR法检测ctxA和tcpA基因,纸片扩散法测定抗生素抗性,应用核糖体基因分型技术进行分子分型;并与1997~2001年分离的20株O1群霍乱弧菌流行株代表菌株的分子分型结果进行比较。结果杭州市105株O139群菌株中,95株ctxA阳性菌株分为8个型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅷ型),其中Ⅱ型菌株为2000年后的优势克隆群(占73.7%,70/95),并于2004年引起一起较大规模的爆发;10株ctxA阴性菌株被分为3个型(α、β和γ型)。2000年浙江绍兴市4株ctxA阳性O139群分离株属Ⅱ型,浙江湖州市1株ctxA阴性分离株属γ型。20株O1群流行代表菌株被分为5个型(A、B、C、D和E型),其中A型和B型分别与O139群中的Ⅵ型和Ⅶ型的带谱相同。ctxA阳性和ctxA阴性O139群菌株间的耐药谱显著不同。67株Ⅱ型O139群菌株中共有28种耐药谱,最少的仅对2种抗生素同时耐药,最多对11种抗生素同时耐药;分别有对11种和10种抗生素耐药的菌株在2002~2004年间成为优势菌(81.5%,22/27)。结论1994~2004年间多种核糖体基因型O139群霍乱弧菌在杭州同时或替换流行,多重耐药的核糖体基因型Ⅱ型O139群菌株于2002~2004年间成了杭州优势流行菌株。     

杭州市2007年流行性腮腺炎病毒分离株的基因型分析

目的：了解杭州地区腮腺炎病毒流行株基因型分布情况。方法：对杭州地区2007年腮腺炎病毒分离株SH基因测序后分型,测序结果与其他基因型参考株进行同源性比较,构建SH基因亲缘进化树。结果：杭州地区2007分离株病毒属于F基因型,与浙江株EF102876、EF102880相似性分别为99.3%、96.7%;与基因型代表株Z77158（兰州）、Z77160（上海）核苷酸相似性分别为98%、94.6%;与目前使用的疫苗株D90232（Jeryl Lynn）相似性为84.9%。结论：从本次分离株来看,杭州地区流行的为F基因型,未发现基因型间变异,但与上海株之间存在较大的型内差异。     

2006年杭州市麻疹病毒分离株N和H序列分析

目的:分析杭州市2006年杭州麻疹病毒分离株N与H核酸序列变异情况。方法:用RT-PCR对6个临床急性期麻疹病人的咽拭子标本及其麻疹病毒分离株的(Vero-slam细胞培养)扩增核蛋白(N)和血凝素蛋白(H)基因片段,并对本次分离株的核酸序列与近期分离株和疫苗株进行对比。结果:从标本中直接检测N片段基因的结果与细胞培养病毒的结果完全相符。本次分离株N片段基因与分离株浙江CHN/9.05/7、浙江CHN/02/2相似性分别为98.96%、96.04%,与疫苗株Shanghai-191、Changchun-47相似性均为94.58%;分离代表株H基因片段与分离株浙江CHN/02/2、浙江CHN/9.05/7相似性分别为99.59%、99.07%,与疫苗株Shanghai-191、Changchun-47相似性分别为95.14%、95.04%。结论:RT-PCR直接从标本中检测相关基因片段可作为分子病毒学研究的方法,但经细胞培养增殖后效果更好。麻疹病毒尽管遗传稳定,但还是存在着变异。     

浙江省妇女儿童规划纲要健康指标分析

儿童和妇女的生存、保护和发展是提高人口素质的基础．是人类未来发展的先决条件。为此，浙江省先后制定了“九五”、“十五”妇女和儿童两规划纲要（简称新旧《两纲》）。本通过对1993～2004年浙江省新旧《两纲》妇女儿童健康指标分析，评价浙江省旧《两纲》妇女儿童健康指标的完成情况，并对2005年能否顺利实现新《两纲》规划的相关健康指标进行推测，分析问题原因，提出相应的对策措施。     

浙江省2003年突发公共卫生事件流行病学特点分析

为了解浙江省2003年突发公共卫生事件分布和流行特征，为制定预防措施提供依据，现将浙江省2003年突发公共卫生事件流行情况分析如下。     

杭州地区2011－2013年儿童呼吸道感染人偏肺病毒分子流行病学研究

目的 了解杭州地区儿童人偏肺病毒(hMPV)的分子流行病学特点.方法 收集2011年1月至2013年12月杭州市2所哨点医院儿科呼吸道门诊和住院病例2 593例,门诊病例采集咽拭子1 676份,住院病例采集气管吸取物917份.用实时荧光定量PCR方法检测hMPV核酸,阳性样本用RT-PCR方法对hMPV 融合蛋白(F)部分基因片段扩增和序列测定.所测基因序列与GenBank代表株核苷酸同源性比较,并构建基因进化树.结果采用描述性统计和样本率的χ²检验.结果 杭州地区呼吸道患儿hMPV检出率为6.51%(169/2 593).门诊检出率为6.62%(111/1 676),住院检出率为6.32%(58/917),检出率差异无统计学意义(χ²=0.086,P=0.769).2岁和3岁组检出率最高,分别为14.14%(28/198)、14.01%(22/158),与其他组比较差异有统计学意义(χ²=38.654,P=0.000).冬春季检出高于夏秋季(χ²=67.032,P=0.000).测序的88株阳性基因序列与GenBank参考株核苷酸序列同源性为81.6%～100.0%,基因进化树分析显示分属于2个基因型的4个亚型. 2011－2012年B1亚型占优势,2012年底至2013年A2型为流行.<1岁组A基因型(67.56%,25/37)与≥1岁组(43.13%,22/51)检出率差异有统计学意义(χ²=5.143,P=0.023).结论 杭州地区儿童呼吸道感染hMPV存在4种基因型,<1岁组A基因型感染较多,2、3岁组hMPV检出率最高.